我们除了以上介绍的灭活型的病毒保存液外,还有非灭活的病毒保存液。含有Hank's液体、氯化钾、氯化镁、氯化钙、BSA等。多种联合,具有抗细菌和抗的作用;牛血清蛋白(BSA)作为蛋白稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;Hank's缓冲剂构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和稳定性。灭活型和非灭活型病毒保存液通常用于临床流感、禽流感、手足口病毒、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集和运送。)采集病毒标本时应由专业人员严格按照采样程序进行,标本进行检测时,应在符合安全级别的实验室进行操作。中国非灭活病毒保存液厂商
灭活型保存液:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。能有效阻止操作员二次,但是又含有Rnase抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样本保存以及运输的成本。
非灭活型保存液:
主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持型保存液。它能够保持病毒在外的活性以及抗原和核酸的完整性,含有Hanks液等,保护病毒蛋白外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。
可见根据不同的情况,不同类型的保存液有着各自的优缺点,但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其他影响造成错误检测。 成都核酸检测病毒保存液采购灭活型病毒保存液的主要优点是方便,快速,安全,缺点是检出率偏低;
市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。
对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。 病毒保存液主要适用于****、手足口病毒、流感病毒等常见的病毒样本采集保存运输工作。
采样前,在标签上注明样品信息;
根据不同的实验目的,用采样拭子在相应的部位采样;
采样后迅速将拭子放入含病毒运送培养基采样管中,在折断点处将其折断,旋紧管盖;
使用灭活款采样管新鲜采集的标本,可在常温(5-25°C)条件下,7天内运送至实验室,运输时有冰袋的效果会更好。用于核酸检测的标本,24小时内检测效果更好。
具体采样方法如下:
(1)鼻拭子:将拭子头轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以另一拭子拭另侧鼻孔,将拭子头浸入采样液中,在折断点处将其折断,弃之。(适合用本产品采样)
(2)咽拭子:用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,同样将拭子头浸入采样液中,弃之。(适合用本产品采样)。 病毒采样管用于临床流感禽流感手足口病麻疹****等病毒标本和支原体解脲支原体衣原体等标本采集和运输。天津灭活病毒保存液哪家好
获得的DNA/RNA质量好,能得到较快的检测结果可完成各种病毒检测及分析实验如PCRqPCR等,同时节省运输成本。中国非灭活病毒保存液厂商
病毒采样管-适用于、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒标本以及支原体、脲原体、衣原体标本的采集及运送。病毒及相关样本的冷藏状态下(2-8℃)的48小时内保存与运输。病毒及相关样本的-80℃环境或液氮环境中的长时间保存。
病毒采样管搜集病毒的采样方法
1、先用压舌板压住舌头,然后将采样拭子头部伸入咽喉部位擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,轻度用力拭抹咽后壁部位,应避免触及舌部。
2、以拭子测量鼻尖到耳垂的距离并用手指做标记,将采样拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子伸入距离少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半,使拭子在鼻内停留15-30秒,轻轻旋转3-5次,抽出拭子。
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