非灭活型:不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。非灭活的病毒保存液,具有抗细菌和抗的作用;牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和稳定性。非灭活的病毒保存液通常用于临床流感、禽流感(如H7N9) 、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送。而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测,所以在保存和运输时,就需要加入病毒保存液。血液保存液生产厂家
制造保存管的材质应注意选择,有资料提示聚丙烯(Polypropylene)与核酸的吸附有关,特别是在高张力离子浓度时,聚乙烯塑料(Polyethylene)比聚丙烯(Polypropylene)更容易抓住DNA/RNA。聚乙烯-丙烯聚合物(Polyallomer)塑胶与某些特殊处理的聚丙烯(Polypropylene)塑胶容器更适合做DNA/RNA的储存使用。另外,在使用可折断拭子时,保存管应尽量选择高度大于8厘米的容器,以防止在折断拭子时内容物外溅污染。
生产保存液的水:生产保存液使用的超纯水应经过分子量为13,000的超滤膜过滤,以保证去除生物来源的聚合物杂质,例如RNase、DNase和内,不推荐使用普通纯化水或蒸馏水。 浙江保存液****从采集完样品到开始检测中间可能遇到各种问题比如异地运输或邮寄标本这时病毒保存液就起到了相当大的作用。
另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液,主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分,这种保存液是直接裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase),如果用于RT-PCR较为合适,但裂解液可以灭活病毒,这种样本不能用于病毒的培养分离。
病毒保存液使用的金属离子螯合剂推荐使用EDTA盐类(如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠等),不推荐使用肝素类(如肝素钠、肝素锂),以免影响PCR检测。
灭活型病毒保存液可以对新鲜的临床病毒标本进行蛋白变性而起到病毒灭活作用,杜绝二次传播,保障运输及检测人员的安全。已灭活的样本可以搭配搭配多种病毒提取试剂盒进行使用,核酸提取仪快速提取核酸,同时配合呼吸道病原体PCR检测试剂盒实现快速检测,特异性灵敏度均不受影响。
病毒保存液具有很多功能:
①、操作简单,液体内含有能让蛋白变性的成分,从而起到病毒灭活的作用;
②、内含抑制剂,更大程度地保护病毒核酸稳定不被降解,大幅度提高核酸提取率;
③、产品采样前可常温保存12个月,采样后样本可常温保存一周,密闭性好,方便保存运输,节省运输成本。
为了保护病毒检测环境的安全和检测人员的安全,灭活病毒保存液其实是比较好的选择。
我们除了以上介绍的灭活型的病毒保存液外,还有非灭活的病毒保存液。含有Hank's液体、氯化钾、氯化镁、氯化钙、BSA等。多种联合,具有抗细菌和抗的作用;牛血清蛋白(BSA)作为蛋白稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;Hank's缓冲剂构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和稳定性。灭活型和非灭活型病毒保存液通常用于临床流感、禽流感、手足口病毒、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集和运送。病毒存在不易保存和易的弊端,但灭活型病毒保存液完美解决了这一弊端。河南保存液****
病毒核酸检测过程中,病毒保存液的作用尤其重要,我们的检验工作不可能在采集到样本后就立马进行检测。血液保存液生产厂家
病毒采样管由拭子+采样管+病毒保存液三部分构成。病毒保存液包括Hank's液基础、庆大霉素、、BSA (V)、冷冻保护剂、生物缓冲剂和氨基酸。在Hank's基础之上,添加4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五组分)等病毒稳定成分,可在较宽的温度范围内维持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分离的阳性率。
病毒保存液的质量,是提高PCR检测阳性率与病毒分离阳性率的关键因素,从根本上决定了病毒采样管的质量。添加常温稳定的类,可解决采样后的霉菌污染问题,实现采样液的常温保存。 血液保存液生产厂家
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