文莱养猪场非洲猪瘟检测

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，近期的研究再次表明，ASFV在4℃、22℃和40℃时稳定，在EMEM中培养24h后，损失不到10个50%血细胞吸附剂量（HAD50）/mL。组织中的ASFV可以在深度冷冻（-70℃）条件下存活多年而没有明显的滴度损失，但在20℃时会逐渐失去活性，但仍可存活至少105周。在4℃时，病毒在培养基中非常稳定，至少在61周内保持活性。在较高温度下，ASFV失活相对较快，在37℃下，ASFV在细胞培养基中可保持活性11~22d，但在50℃时，只有少部分病毒保持活性，而在60℃时，15min后就检测不到活毒粒子。八方同创要求非洲猪瘟阳性场，做好内防扩散措施，种猪免疫“一猪一针头”，仔猪“一窝一针头”。文莱养猪场非洲猪瘟检测

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，病毒灭活方法非洲猪瘟病毒可被有机溶剂、洗涤剂、氧化剂（如次氯酸盐、苯酚）及商业消毒剂灭活，灭活效果受暴露时间和温度影响。具体灭活方式包括：暴露于2.3%的氯、3%的邻苯基苯酚或含碘化合物中30分钟，可灭活病毒。其他有效灭活处理包括使用福尔马林、氢氧化钠、β-丙内酯、甘油醛或乙酰亚乙基亚胺（《非洲猪瘟科学报告》，欧洲食品安全局，2009年）。肥皂、洗涤剂和碱类物质可有效对动物圈舍、机械设备、衣物、交通工具及人类居住区域进行消毒；飞机消毒推荐使用卫可（Virkon®）等消毒剂。受病毒污染的饲料、污水和粪便应采用掩埋或焚烧的方式处理。在4°C（39°F）条件下，用1%的氢氧化钠或氢氧化钙处理受污染猪粪浆3分钟，或用0.5%的氢氧化钠或氢氧化钙处理30分钟，可灭活病毒（特纳、威廉姆斯，1999年）。蜱虫根除推荐使用杀虫剂，如有机磷酸盐类和合成拟除虫菊酯类杀虫剂。文莱养猪场非洲猪瘟检测猪群发现不吃料猪只，及时采样，建议采猪栏的环境拭子和口鼻拭子，进行PCR检测，排除非洲猪瘟病毒。

非洲猪瘟病毒的非洲野猪无明显临床症状。然而，根据病毒毒株的毒力、入侵途径和剂量以及宿主因素，欧亚野猪、家猪和野猪可能表现出类似病毒性出血热的严重临床症状。病例通常表现为急性、全身性临床征象，发病初特征为高热（因此得名“猪瘟”）。经口或口鼻暴露后，约4天后出现首批临床症状（潜伏期通常约为3-9天，少数情况下更长）。动物变得精神沉郁，采食量下降，动物可能相互堆叠躺卧。即使在饲喂时间进入猪舍或猪圈也异常安静。约1周内，动物出现恶化的呼吸系统和胃肠道体征，以及协调和平衡问题。在终末期，动物几乎无法站立（后肢轻瘫/瘫痪），身体和四肢可能出现红到蓝色斑点、皮肤出血以及从身体不同孔道急性失血。一些动物可能表现出更明显的神经体征，包括抽搐。大多数动物因肺水肿出现呼吸窘迫。重要的是，并非所有动物都达到终末期。也就是说，动物常在未出现出血或其他非洲猪瘟病毒相关体征时死亡。怀孕母猪可能因高热在妊娠任何阶段流产。上述急性型与超过90%的病死率相关（实验条件下甚至更高）。也可能见到**急性经过，直接导致死亡而无终末期（动物在发病后4-5天死亡）。

非洲猪瘟活疫苗策略可追溯到1960年代，涉及在葡萄牙和西班牙田间条件下使用的减毒非洲猪瘟病毒毒株。然而，这些早期活疫苗导致慢性病变和病例数增加终被停用。近期的进展引入了几种有前景的活非洲猪瘟病毒疫苗候选株，能够在实验环境中提供针对攻毒实验组完全的或接近完全的保护。除了自然发生的变异株外，基因改造的缺失突变株，如“ASFV-G-ΔI177L”、“ASFV-G-ΔMGF”、“ASFV-G-Δ9GL/UK”和“HLJ/18-7GD”，已显示出对抗当前基因型II非洲猪瘟病毒毒株的潜力。此外，CD2ν（EP402R）缺失突变株也显示出一些前景，能够提供针对基因型I和II毒株的保护。天然衍生的非红细胞吸附病毒“Lv17/WB/Rie1”及其衍生物也被探索作为疫苗替代品。值得注意的是，病毒“ASFV-G-ΔA137R”在具有保护特性的缺失突变株中脱颖而出。因此，现在有多种活疫苗候选株可考虑用于潜在批准，其中至少两种已获准在越南市场销售。尽管如此，先前涉及不当使用可能非法疫苗的事件强调，在没有彻底临床评估的情况下，在现实场景中部署活疫苗需要谨慎。 非洲猪瘟病毒弱毒株具有明显的间歇性排毒特点，口鼻拭子采样很难捕抓到病毒，建议增加环境和尾根血采样。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟病毒具有较强的酸碱耐受性。研究表明，病毒有较宽的pH值适应范围，在pH值为3.9~13.4（在含有血清的培养基中）时可稳定存活7d以上。一些强抵抗性毒株甚至在pH值为3.1时还能存活，直到pH值下降到2.7时才失去活性。pH值达到13.4时强抵抗性毒株仍可以在无血清培养基中存活20~22h，在25%血清中存活7d。研究表明，ASFV在环境中存在至少3种不同的循环模式：丛林传播循环、蜱-猪循环和家猪（猪-猪）循环。目前，我国仍主要关注家猪循环。ASFV传播途径分为直接和间接接触传播，直接接触传播主要由猪通过口、鼻接触而传播；间接接触传播是由被污染病毒的泔水、工具、设备、物资、饲料、环境等传播，还可经由软蜱、蚊、蝇等叮咬猪后携带病毒。非洲猪瘟病毒的弱毒株阳性猪群体现无症状或轻微症状，需要通过高灵敏度的PCR试剂盒检测才能确诊。文莱养猪场非洲猪瘟检测

非洲猪瘟在全球蔓延，病毒毒株多样化，发病常态化，虽然有的流程毒株毒力下降，但是仍然危害重大。文莱养猪场非洲猪瘟检测

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 文莱养猪场非洲猪瘟检测

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