南京乐诊生物技术有限公司2026-01-22
确保菌悬液浓度准确需要标准化操作流程和定期验证。麦氏比浊法是常用的半定量方法,其原理是基于细菌悬浮液的浊度与菌浓度成正比。标准操作:取新鲜培养物(18-24小时)在适宜的液体培养基中培养至对数生长期,用无菌生理盐水或肉汤稀释至0.5麦氏浊度标准(约相当于1.5×10^8 CFU/mL)。但麦氏比浊法存在一定局限:不同菌种大小和形态差异会影响浊度与菌数的关系;菌龄、培养基残留、菌体聚集都会影响准确性。因此,对于要求严格的实验(如药敏试验、微生物限度检查),必须用活菌计数法进行校准验证。验证方法:将0.5麦氏浊度的菌悬液进行10倍系列稀释,选取适当稀释度涂布平板,培养后计数,根据稀释倍数反推原液浓度。建议每月至少验证一次常用菌株的麦氏浊度与实际CFU的对应关系。更精确的方法包括:使用光电比浊计(在600nm波长下,OD值0.1约相当于10^8 CFU/mL),但同样需要菌种特异性校准;直接使用商业化的标准菌悬液或浓度标定的冻干菌珠。我们提供标准化的菌悬液制备试剂盒和浓度验证服务,帮助建立实验室内部的菌悬液制备SOP。无论采用何种方法,制备过程都应严格控制:使用新鲜培养物、充分混匀、立即使用(制备后15分钟内使用比较好)。
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