细胞培养中出现黑点时该如何判断是否为污染？

南京乐诊生物技术有限公司2025-12-29

当细胞培养中出现黑点时，需要系统性地进行判断和处理。首先应在显微镜下仔细观察黑点的特征：如果是微生物污染，黑点通常具有规则的形态和生长趋势，细菌污染会呈现点状或杆状，污染可能呈现丝状结构，而支原体污染则表现为细胞周围细小颗粒。相比之下，细胞碎片或培养基沉淀通常形态不规则且不增殖。可通过更换新鲜培养基来初步判断：污染性黑点在换液后短期内会明显增多，而非污染性颗粒则不会增加。进一步可进行染色鉴别，使用革兰氏染色或吉姆萨染色可帮助识别微生物类型。对于疑似污染，可在培养基中添加两性霉素B等抗剂观察效果。若怀疑是支原体污染，需使用专门的PCR检测试剂盒进行确认。预防措施包括定期对细胞进行支原体检测，严格控制无菌操作流程，对新引入的细胞系进行隔离培养和检测。一旦确认污染，安全的做法是丢弃受污染的细胞，并对培养环境进行彻底消毒。如果细胞系珍贵且不可替代，可尝试使用处理，但必须进行严格的后续验证以确保污染被完全。