标准菌株阳性对照失效，排查优先级该如何排序？

南京乐诊生物技术有限公司2026-06-13

微生物检测实验必须设置标准菌株阳性对照，乐诊全系列质控标准菌株常作为对照菌种，出现对照无菌生长、生长偏弱、性状不符即为对照失效，直接导致整组实验数据作废，客户排查无从下手，耗时耗力，结合实验室实操，制定由易到难五步优先级排查顺序，高效定位失效根源，快速整改复工。第一步优先级：优先排查培养环境，查、高发诱因，占失效问题60%以上。核对培养温度、气体环境、培养时长三大参数，好气菌误放厌氧罐、厌氧菌敞口有氧培养、培养箱温度偏差±3℃、培养时长不足标准时长一半，是常见人为失误；同时排查培养箱隔板冷热温差、冷凝水污染平板，优先复测箱内实时温度，校准温控数值，此步骤无需耗材、耗时短，优先核验可快速排除外因。第二步优先级：排查培养基适配性，排除环境后核验耗材品质。核对本次实验培养基品类、批号是否适配菌株，比如沙门氏菌误用大肠选择性培养基、误用细菌琼脂，品类错配直接抑制菌株生长；查看培养基有效期、板面干裂、抑菌成分超标问题，取用同批次培养基，重新接种备用标准菌株复测，快速判定培养基是否抑菌，乐诊培养基每批次带适用性报告，可直接核对菌株适配清单，减少复测时间。第三步优先级：排查菌株活化状态，耗材无误后核验菌种活性。核查所用菌株传代次数，传代超6代菌株活性衰减，阳性对照大概率失效；核查冻存菌株复溶手法，复溶水温过高、复溶后未及时接种，菌体失活；核对斜面保藏菌株是否干裂污染，优先启用全新初代活化乐诊标准菌株，同步复测对照实验，初代菌株活性稳定，可快速验证旧菌株是否失效。第四步优先级：排查接种操作消杀残留，排除菌种外因。排查接种台面消杀残留、接种环消杀余温、稀释液抑菌残留，泡沫消毒液、高浓度酒精残留于操作台，会接触接种菌体造成灭活；接种环灼烧后未冷却烫死菌苔、稀释液配比错误自带抑菌性，都会让阳性对照无法生长，复测前延长操作台通风挥发时间，接种环充分降温，更换无菌生理盐水稀释。第五步优先级：排查实验耗材交叉污染，后排查低值概率问题。排查培养皿、吸头、试管是否混用抑菌处理耗材，微生物耗材与消杀耗材混放，内壁残留抑菌物质；同时排查同一操作台阴性样本、阳性样本交叉操作，杂菌竞争营养抑制标准菌株生长。

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