做方法验证时，阳性对照和阴性对照如何设置？

南京乐诊生物技术有限公司2026-03-05

方法验证中的对照设置是证明方法有效性的关键，需科学设计。阳性对照：1. 目的：证明在给定条件下，方法能检出目标微生物。2. 设置方法：用标准菌株（如沙门氏菌检测用鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028）制备低浓度菌悬液（10-100 CFU/样品单位），与样品平行检测。3. 接受标准：阳性对照应检出目标菌，且反应典型（如生化反应、菌落形态符合预期）。4. 频率：每次实验（或每批样品）至少设置一个阳性对照。阴性对照：1. 目的：证明无污染、无非特异性反应。2. 设置方法：a) 空白对照：用无菌稀释液代替样品，全程操作；b) 试剂对照：用无菌水代替样品，加入所有试剂；c) 环境对照：在采样或接种过程中暴露的空白平板。3. 接受标准：所有阴性对照应无生长、无非特异性反应。4. 频率：每次实验至少设置一个空白对照和一个环境对照（如适用）。额外对照：1. 抑制性对照：对抑菌性强的样品，可在阳性样品中添加标准菌株，验证样品本身不抑制目标菌生长。2. 基质对照：用不含目标菌的样品基质，验证基质不干扰检测。南京乐诊提供方法验证对照菌株套装，包括多种目标菌和干扰菌。我们还提供对照设置指南和记录表格，帮助客户规范对照管理。建议实验室建立对照结果数据库，定期分析对照异常情况，作为方法性能的持续监控指标。