ris-硼酸电泳粉剂(5×TBE):高效、经济的DNA电泳缓冲液在分子生物学实验中,琼脂糖凝胶电泳是分析DNA片段大小和纯度的关键技术之一。Tris-硼酸电泳粉剂(5×TBE)作为一种高效、经济的缓冲液原料,因其出色的性能和便捷性,成为实验室中不可或缺的工具。产品特点与优势Tris-硼酸电泳粉剂(5×TBE)是一种高浓度的缓冲液原料,主要成分包括Tris(三羟甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。这种配方能够在电泳过程中提供稳定的pH环境,确保DNA片段的清晰分离。高效分离:TBE缓冲液具有较高的离子强度,适合分离小分子量的DNA片段。它能够在电泳过程中提供稳定的电流,确保DNA条带清晰、分辨率高。经济实用:5×的高浓度设计使得该粉剂在使用时可以根据实验需求灵活稀释,减少浪费,降低实验成本。稳定性高:粉剂形式的TBE在干燥条件下非常稳定,不易受环境因素影响,适合长期储存。兼容性强:适用于多种类型的琼脂糖凝胶电泳,兼容常见的核酸染料(如EB或GoldView),满足不同实验需求。Tris-硼酸电泳粉剂(5×TBE)凭借其高效、经济和稳定的特点,成为分子生物学实验中理想的缓冲液选择。允许目标蛋白、具有不同亚基结构的多聚体蛋白的多个拷贝,或者表达目标蛋白及其同源结合伙伴。重组蛋白表达服务技术服务技术服务
DNA Marker VI:高效、精细的DNA分子量标准DNA Marker VI 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于快速估算DNA片段的大小。它由6条线状双链DNA片段组成,覆盖从250 bp到10,000 bp的范围,能够为DNA分析提供清晰、准确的分子量参考。产品特点组成:包含6条DNA片段,大小分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp。其中2500 bp条带浓度较高,显示为加亮带。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接上样,无需额外处理。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在-20℃下可长期保存,短期频繁使用可置于4℃保存。使用方法上样量:根据加样孔的大小,每次取2-5 µL直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:推荐使用1.0%的琼脂糖凝胶,电压4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融。琼脂糖质量:电泳时应尽量选用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。电泳缓冲液:及时更换电泳缓冲液并使用新制备的凝胶,以免影响电泳结果。重组蛋白表达服务技术服务技术服务它不仅替代了传统EB染料的不足,还为核酸检测和细胞研究提供了更强大的工具。
支持IND的GMP蛋白生产技术服务在临床前研究中的关键步骤包括:1.蛋白表达和纯化:利用多种表达系统,如大肠杆菌、昆虫细胞、哺乳动物细胞等,进行蛋白的高效表达和纯化。2.质量控制:确保所有细胞库和蛋白产品符合相关监管机构的鉴定和验证要求,保证产品的纯度和稳定性。3.项目管理:通过高效的项目管理团队和完善的沟通机制,确保项目的顺利实施和高质量交付。4.GMP生产服务:提供从早期研究到临床样品生产,再到商业化生产的全生命周期服务,确保生产过程符合GMP标准。5.原液生产线:拥有多条原液生产线,提供不同规模的发酵和纯化服务,满足不同阶段的开发需求。6.GMP级蛋白开发:提供GMP级蛋白的开发服务,开发时间一般为3-6个月,并提供必要的文档支持,如分析证书和数据表。7.客户审计:接受客户审计,确保服务的透明度和质量标准,增强客户信任。这些服务帮助药物研发企业在临床前研究阶段高效推进,同时确保生产过程的合规性和产品质量。
毕赤酵母表达系统的密码子优化是提高外源蛋白表达效率的重要策略之一。密码子优化主要涉及以下几个方面:1.密码子使用偏好:通过检查毕赤酵母基因组的密码子偏好谱,可以确定密码子翻译效率和使用频率之间的直接相关性。2.密码子优化策略:对目的基因进行密码子优化,以适应毕赤酵母的密码子使用偏好。这通常包括将基因中的密码子修改为毕赤酵母偏好的密码子,从而提高mRNA的翻译效率。3.GC含量调整:密码子优化过程中,需要考虑外源基因的GC含量,以避免由于GC含量过高或过低导致的mRNA结构不稳定或转录提前终止的问题。4.避免稀有密码子:去除或替换那些在毕赤酵母中使用频率较低的稀有密码子,以减少翻译过程中可能出现的障碍。5.提高表达水平:通过密码子优化,可以显著提高外源蛋白在毕赤酵母中的表达水平,有时甚至可以提高数倍到数十倍。6.基因工程应用:在实际应用中,例如人溶菌酶基因的密码子优化,通过使用毕赤酵母偏好的密码子替换原有密码子,成功提高了基因在毕赤酵母中的转录表达水平。AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 采用了优化的高保真DNA聚合酶和反应体系能够实现超快速的PCR扩增。
DL2000 Plus DNA Marker:精细的DNA分子量标准DL2000 Plus DNA Marker 是一种即用型的DNA分子量标准,广应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由多条线状双链DNA片段组成,能够为DNA分析提供精确的分子量参考。产品特点组成:DL2000 Plus DNA Marker 由8条线状双链DNA片段组成,条带大小分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、2000 bp、3000 bp和5000 bp。其中750 bp条带浓度较高,显示为亮带。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,使用时无需额外添加,直接上样。清晰的条带:电泳图像清晰,背景干净,条带亮度均匀。稳定性高:在室温下可稳定保存三个月,长期保存建议置于-20℃。注意事项保存条件:建议低温保存,避免反复冻融,以防止核酸酶污染导致条带降解。避免加热:使用前无需加热,直接上样。电泳缓冲液:及时更换电泳缓冲液,使用高质量的琼脂糖,以获得比较好分离效果。染料选择:如果使用GenGreen等安全染料,染色效果更佳。应用场景DL2000 Plus DNA Marker 适用于常规PCR产物、基因组DNA片段等的大小鉴定,特别适合需要精确测定DNA片段大小的实验,如基因编辑验证、小片段插入/缺失分析等。基因编辑技术可以用于研究大肠杆菌的基因功能。重组蛋白表达服务技术服务技术服务
胶原蛋白是脊椎动物的主要结构蛋白。它在为细胞提供支撑支架方面起着至关重要的作用,从而影响细胞的存活。重组蛋白表达服务技术服务技术服务
在大肠杆菌表达系统中,优化蛋白质的折叠和活性可以通过以下策略实现:1.优化表达载体:选择具有强启动子的表达载体,如T7启动子,以实现高水平的蛋白表达。同时,载体中包含的SD序列位置和转录终止子也会影响转录和翻译效率。2.密码子优化:对目的基因进行密码子改造,提高mRNA的稳定性和翻译效率,特别是在大肠杆菌中表达真核基因时。3.融合蛋白及分子伴侣的使用:利用融合蛋白如GST、MBP等增加蛋白的可溶性表达,并共表达分子伴侣如GroEL/ES、DnaK/J/GrpE等,促进重组蛋白的翻译后折叠加工。4.靶蛋白的定位表达:使用信号肽将重组蛋白分泌到细胞周质或胞外,周质空间的氧化环境有利于二硫键的形成和硫基蛋白的正确折叠。5.表达菌株的选择:选择适合目的蛋白特性的菌株,例如使用Rosetta2系列补充稀有密码子对应的tRNA,或使用Origami2系列促进二硫键的形成。6.诱导条件的优化:包括诱导剂的选择和浓度、温度、培养时间和细胞密度等因素的调节。例如,在较低温度下表达可能有助于提高蛋白的溶解性和表达水平。7.蛋白质的折叠和修饰:对于以包涵体形式表达的蛋白,进行重折叠和修饰,加入还原剂和折叠助剂促进正确的折叠。重组蛋白表达服务技术服务技术服务