在现代分子生物学研究中,聚合酶链式反应(PCR)技术已成为不可或缺的工具,广泛应用于基因扩增、突变检测、基因表达分析等多个领域。而一款PCR Master Mix则是确保实验成功的关键因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)凭借其性能和独特的产品特点,为科研工作者提供了高效、可靠的实验解决方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,这是一种具有高保真性的热稳定酶。它能够以极高的准确性复制DNA模板,错误率极低,为普通Taq酶的1/500,这使得它在扩增长片段DNA或对序列准确性要求极高的实验中表现出色。例如,在进行基因克隆或构建基因文库时,Phusion酶能够确保扩增产物的序列与原始模板高度一致,从而提高了后续实验的成功率。二、快速扩增能力尽管Phusion酶具有高保真性,但其扩增速度并未受到影响。它能够在短时间内完成长片段DNA的扩增,提高了实验效率。对于长度在5kb以内的DNA片段,Phusion Master Mix可以在几分钟内完成扩增,这对于需要快速获得实验结果的研究人员来说是一个巨大的优势。例如,在进行高通量基因筛查或大规模样本分析时,Phusion Master Mix能够缩短实验周期,提高工作效率。Ultra-Long DNA Polymerase是一种专为扩增超长DNA片段设计的聚合酶能够扩增长达数十kb上百kb的DNA片段。Recombinant Mouse Transferrin R/CD71 Protein,His Tag
Taq DNA Polymerase:科研中的关键工具Taq DNA Polymerase 是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶,其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点Taq DNA Polymerase 的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermus aquaticus,能够在高温条件下保持活性,适催化温度为75-80℃,即使在95℃下保温半小时,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而,它缺乏3'→5'校正活性,这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误,但对于大多数常规PCR应用而言,这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5'→3'外切酶活性,这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外,Taq酶在PCR产物的3'末端会添加一个A碱基,这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。Cre重组酶泛素从E1转移到泛素结合酶E2的活性位点半胱氨酸残基上,形成E2-泛素硫酯中间体。
50× ROX Reference Dye:实时定量PCR中的关键校正试剂50× ROX Reference Dye 是一种用于实时定量PCR(qPCR)的荧光校正染料,广泛应用于ABI、Stratagene等品牌的实时荧光定量PCR仪。其主要作用是校正由于加样误差、孔间差异或仪器光学系统不一致导致的荧光信号偏差,从而提高qPCR实验的准确性和重复性。产品特点高浓度设计:50× ROX Reference Dye 的浓度为25 µM,使用时需根据仪器型号和反应体系进行稀释。适用机型广:适用于多种ABI和Stratagene品牌的qPCR仪器,如ABI 5700、7900HT Fast、StepOne、StepOne Plus等。保存条件:常温运输,-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期可达2年。应用场景校正孔间误差:在qPCR实验中,由于加样量、孔位置、试管壁厚度或管盖透光性差异,可能导致荧光信号的偏差。ROX染料通过提供稳定的荧光背景,校正这些差异,提高数据的可靠性。标准化荧光信号:ROX染料可对报告染料(如SYBR Green I或TaqMan探针)的荧光强度进行标准化处理,为多重定量PCR提供稳定的基线。总之,50× ROX Reference Dye 是实时定量PCR实验中不可或缺的校正试剂,能够提高实验数据的准确性和重复性,是分子生物学研究和临床检测中的重要工具。
Pfu DNA聚合酶是一种从嗜热古细菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,因其准确性和热稳定性而被广应用于分子生物学研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,这种独特的校正功能使其能够在DNA合成过程中纠正错误掺入的碱基,从而提高扩增的保真性。与Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的错误率更低,其保真性是Taq酶的10倍以上。这种高保真性使其成为需要准确扩增的实验(如基因克隆、突变研究和测序准备)的理想选择。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的热稳定性,能够在95°C的高温下保持活性,适合PCR反应的高温变性步骤。其扩增产物为平末端,适用于平末端克隆,但需注意,Pfu酶扩增的DNA片段不适合常规的T载体克隆。Pfu DNA聚合酶的应用领域广,包括高保真PCR、基因克隆、点突变、全基因合成以及高质量测序样本的准备。它还常与其他酶(如Taq酶)联合使用,以结合高保真性和快速扩增的优点。总之,Pfu DNA聚合酶凭借其高保真性、热稳定性和广的应用场景,已成为分子生物学实验中不可或缺的工具,为科学研究提供了强有力的支持。Pfu DNA Polymerase的突变体研究:通过研究Pfu DNA Polymerase的突变体,可进一步优化其性能和应用范围。
One Step RT-qPCR Probe Kit:高效、特异的RNA定量检测解决方案One Step RT-qPCR Probe Kit 是一种为探针法实时荧光定量PCR(qPCR)设计的一步法试剂盒,适用于以RNA为模板的定量检测。该试剂盒将逆转录(RT)和qPCR反应集成在同一反应管中,操作简便,能够有效防止污染,提高检测效率。产品特点高灵敏度与特异性:采用高质量的逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶,结合优化的反应缓冲体系,能够实现高灵敏度和高特异性的检测。防污染设计:部分试剂盒引入了dUTP/UNG防污染系统,有效防止PCR产物污染,避免假阳性结果。操作简便:RT和qPCR反应在同一管中完成,减少了操作步骤,降低了污染风险。适用范围广:适用于多种RNA模板,包括病毒RNA、总RNA和低丰度基因的检测。多重检测能力:支持多重qPCR反应,可在同一反应中同时检测多个目标基因。应用场景病毒检测:适用于RNA病毒的快速定量检测,如流感病毒、病毒等。基因表达分析:用于定量检测特定基因的表达水平,尤其适合微量RNA样本。多重检测:可同时检测多个目标基因,适用于高通量样本分析。Phusion Master Mix (2×) 对各种类型DNA模板都有兼容性,无论是基因组DNA质粒DNA还是cDNA都能高效地进行扩增。Recombinant Human Exodus-2/CCL21
在对亚硫酸氢盐转化后的DNA进行扩增时,Hot-Start Taq DNA Polymerase能够提供高特异性和高灵敏度的扩增效果。Recombinant Mouse Transferrin R/CD71 Protein,His Tag
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus):高效、特异且防污染的qPCR解决方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus) 是一种为探针法实时荧光定量PCR(qPCR)设计的即用型预混液,结合了低浓度ROX校正染料和UDG防污染系统,能够有效提高检测的特异性和准确性。产品特点高特异性和灵敏度:采用抗体修饰的热启动Taq DNA聚合酶,结合优化的反应缓冲液,有效减少非特异性扩增,提高检测灵敏度。UDG防污染系统:含有UDG酶和dUTP,可在反应前降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染。低浓度ROX校正:含有低浓度ROX染料,适用于需要低浓度ROX作为校正染料的qPCR仪器,如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。多重检测能力:支持多重qPCR反应,可在同一反应中同时检测多个目标基因。操作简便:2×预混液设计,只需加入引物、探针和模板即可进行反应,减少了操作步骤和污染风险。应用场景基因表达分析:用于定量检测特定基因的表达水平。病原体检测:快速检测病毒、细菌等病原体的DNA。多重检测:可在同一反应中同时检测多个目标基因。