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毕赤酵母表达服务技术服务研发

来源: 发布时间:2024年12月17日

RNaseInhibitor,HumanPlacenta(人胎盘RNases抑制剂)是一种用于保护RNA不被核糖核酸酶(RNases)降解的蛋白质。以下是它的一些主要特点:1.**来源与表达**:由大肠杆菌重组表达,表达基因来源于人胎盘中编码该酶的基因。2.**抑制能力**:对RNaseA、RNaseB、RNaseC和人胎盘核糖核酸酶有极强的抑制能力,其Ki值约为4×10^-14M,远低于通常抗体和抗原的亲和常数(10^-6-10^-9M)。3.**快速结合**:RNaseInhibitor与人胎盘核糖核酸酶的结合非常快速,几乎在加入的瞬间就会形成复合物从而抑制其酶活性。4.**pH稳定性**:在pH5-8范围内保持其RNA酶抑制活性,在pH7-8时抑制活性比较高。5.**DTT依赖性**:维持其活力需要至少在溶液中含有1mMDTT。6.**His-tag**:产品N端带有His-tag,可以通过相应的His抗体检测或通过磁珠、镍柱吸附去除。7.**用途**:用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。8.**储存溶液**:含有20mMHEPES-KOH(pH7.5),50mMKCl,5mMDTT,50%(v/v)glycerol。通过固液分离和超滤技术进行粗纯,这些技术可以在不损害蛋白活性的情况下去除大分子杂质和沉淀物。毕赤酵母表达服务技术服务研发

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热敏感性双链脱氧核糖核酸酶(ThermolabiledsDNase)的热稳定性是指该酶在特定温度条件下能够保持其活性的能力。然而,ThermolabiledsDNase的一个特性是其热敏感性,即该酶在相对较高的温度下(通常为55°C)可以被快速且不可逆地失活。这种特性对于实验操作非常有利,因为它允许在消化双链DNA后,通过简单的热处理步骤来确保酶的完全失活,从而避免对后续实验步骤的干扰。具体来说,ThermolabiledsDNase在20-40°C的温度范围内保持高活性状态,其对双链DNA的酶切活性比对单链DNA高出约5000倍。此外,该酶的活性比牛DNaseI的活力高出约30倍。然而,ThermolabiledsDNase的热敏感性意味着它可以通过55°C加热5分钟而完全且不可逆地灭活。这种热敏感性与热稳定性是两个不同的概念。热稳定性通常描述一个酶在高温下保持其结构和功能的能力,而ThermolabiledsDNase的热敏感性则强调了该酶在特定温度下失活的特性。这种热敏感性使得ThermolabiledsDNase成为一个非常有用的工具,特别是在需要快速去除RNA样品中的基因组DNA污染,而又不希望引入额外的抑制剂或保护剂的实验中。安徽支持IND的GMP蛋白生产技术服务开发⽣物活性胶原蛋⽩的制备是将其⽬的基因导⼊特定宿主细胞,经基因表达 和蛋⽩翻译,来提取纯化⽽实现。

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dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)在细胞分裂中扮演着至关重要的角色,尤其是在DNA复制过程中。细胞分裂包括有丝分裂和减数分裂,其中DNA复制主要发生在细胞周期的S阶段(合成阶段)。以下是dNTPs在细胞分裂中的主要作用:1.**DNA复制**:在细胞分裂前的S阶段,细胞的DNA需要被复制,以确保每个新产生的细胞都能获得一套完整的遗传信息。dNTPs是DNA聚合酶用来合成新DNA链的原料。每个dNTP分子由一个去氧核糖、一个磷酸基团和一个碱基(腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤或胸腺嘧啶)组成。DNA聚合酶通过添加互补的dNTPs到生长的DNA链上,从而合成新的DNA分子。2.**确保复制准确性**:dNTPs的浓度和纯度对DNA复制的准确性至关重要。DNA聚合酶具有校对功能,能够识别并纠正错误配对的dNTPs,从而确保复制过程的高保真性。3.**DNA修复**:在细胞分裂过程中,DNA可能会受到损伤。dNTPs也参与DNA修复过程,帮助细胞修复受损的DNA碱基,维持基因组的稳定性。4.**细胞周期调控**:dNTPs的水平可以影响细胞周期的进程。例如,dNTPs的缺乏可以触发细胞周期的检查点,暂停细胞周期的进程,直到dNTPs的水平恢复到足够进行DNA复制。

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)withgDNAEraser是一种设计用于从RNA模板合成cDNA链的试剂盒,它具有以下特点:1.**去除基因组DNA污染**:该试剂盒包含gDNAEraser,一种特殊的酶混合物,可以在逆转录之前有效去除RNA模板中的基因组DNA污染。这有助于减少后续实验中可能出现的假阳性结果,特别是在进行定量PCR或转录组分析时。2.**RNaseH-酶**:该试剂盒使用的逆转录酶缺乏RNaseH活性,这意味着在合成cDNA的过程中不会降解RNA模板。这有助于保护RNA模板不被过早降解,从而可以合成更长的cDNA链,这对于需要合成全长或长片段cDNA的实验尤为重要。3.**高效的逆转录酶**:试剂盒中的逆转录酶通常经过基因工程改造,以提高其热稳定性和合成能力。例如,SPARKscriptⅡReverseTranscriptase是一种高温逆转录酶,可以在50℃的高温条件下进行cDNA链的合成,具有热稳定性强、灵敏度高、特异性高、聚合能力强等优点。4.**包含所有必需组分**:除了逆转录酶和gDNAEraser,该试剂盒还包含其他所有必需的组分,如dNTPs、引物(Oligo(dT)Primer和RandomPrimer)、反应缓冲液等,方便用户进行cDNA合成。毕赤酵母能够执行翻译后修饰,如O-和N-糖基化以及二硫键形成,这对于许多蛋白的正确折叠有关。

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1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)withgDNAEraser是一种设计用于从RNA模板合成cDNA 链的试剂盒,它包含gDNAEraser以去除基因组DNA的污染,以及RNaseH-逆转录酶以减少RNA模板的降解。以下是该试剂盒的一些关键特点和应用:1.**去除基因组DNA污染**:试剂盒中的gDNAEraser能有效去除RNA模板中的基因组DNA污染,确保后续实验结果的准确性。2.**RNaseH-逆转录酶**:该试剂盒使用的逆转录酶缺乏RNaseH活性,有助于保护RNA模板不被过早降解,从而可以合成更长的cDNA链。3.**高温稳定性**:逆转录酶经过基因工程改造,具有较高的热稳定性,可以在高温条件下(如50°C)进行cDNA 链的合成,有助于打开RNA的二级结构。4.**合成长链cDNA的能力**:能够合成长达5kb甚至更长的cDNA片段,适合于需要合成全长或长片段cDNA的实验。5.**包含所有必需组分**:试剂盒包含cDNA 链合成所需的所有试剂,如逆转录酶、RNase抑制剂、随机引物、寡聚dT引物、dNTPs、缓冲液等。6.**适用于多种RNA模板**:可以用于从总RNA或mRNA模板合成cDNA 链,适用于实时荧光定量RT-qPCR、3'-和5'-RACE等实验。毕赤酵母被认为是表达亚单位疫苗的独特宿主,这对医疗生物技术市场的增长具有影响 。河北大肠杆菌表达技术服务研发

通过基因工程技术,将编码病毒样颗粒的基因插入到大肠杆菌表达载体中,进行病毒样颗粒的大量生产。毕赤酵母表达服务技术服务研发

ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一种一步法反转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)试剂盒,它整合了反转录和PCR步骤,简化了操作流程。除了用于qRT-PCR,这种试剂盒还可以应用于多种分子生物学实验,包括但不限于:1.**基因表达分析**:通过实时监测PCR反应过程,广泛应用于基因表达分析,可以准确检测和量化基因表达靶标。2.**基因分型和基因变异分析**:用于分析单核苷酸多态性(SNP)、拷贝数变异(CNV)和其他遗传变异。3.**病原体和微生物检测**:以高灵敏度和高特异性检测细菌和病毒靶标。4.**多重检测**:可以在单个反应孔中进行多重检测,不同基因对应不同探针,不同探针对应不同荧光标记,进行多重荧光定量PCR检测。5.**防污染操作**:通过添加UNG酶,该试剂盒还可进行防污染操作,有效消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题。6.**RNA病毒或低表达mRNA的检测**:由于其高灵敏度,该试剂盒适合于检测RNA病毒或表达水平较低的mRNA。7.**cDNA合成**:在生成cDNA、进行northern印迹分析、S1核酸酶检测、RNase保护检测、逆转录PCR和差异显示PCR之前,可以快速准确测量RNA。

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