IdeSProtease的分子改造技术主要通过以下几个方面提高其稳定性和比活性:1.**定向进化**:利用定向进化方法,通过多轮的突变和筛选,获得具有改善特性的酶变体。定向进化不依赖于大规模突变文库的构建,而是通过定点突变操作,显著提高酶分子的稳定性。2.**半理性设计与理性设计**:结合半理性设计和理性设计的方法,通过计算模拟和结构分析,对酶的三维结构进行优化,以提高其在各种环境条件下的稳定性。3.**糖基化修饰**:作为一种新的酶分子稳定性改造技术,糖基化可以提高酶的稳定性,防止酶在逆境中的失活,从而提高其在实际应用中的催化活性。4.**消除蛋白质中的不稳定性弱点**:通过分析蛋白质结构中的稳定性弱点,进行定点突变,以增强蛋白质的整体稳定性。5.**提高比活性**:通过分子改造,提高IdeSProtease的比活性,使其在更低的浓度下就能有效地催化反应,从而提高整体的催化效率。6.**增加底物特异性**:改造后的IdeSProtease除了可以切割人IgG1~4、猴、羊、兔IgG外,还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性。。
11A型肺炎多糖鼠单抗是针对肺炎链球菌11A型多糖的单克隆抗体,具有以下特点:1.**特异性**:鼠单抗具有高度的特异性,能够识别并结合到11A型肺炎链球菌的多糖抗原。2.**制备方法**:通过将肺炎多糖与乙肝表面蛋白的偶联物作为抗原免疫小鼠,然后从小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出能够表达特异性抗体的杂交瘤细胞株。3.**应用**:11A型肺炎多糖鼠单抗可用于定量检测33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,其制备的腹水型单抗对不同批次的样本回收率为95%~105%。4.**疫苗开发**:在肺炎链球菌疫苗的研发中,多糖蛋白结合疫苗是当前的趋势,通过将多糖与蛋白偶联,可以提供更高效价的抗体水平和免疫记忆。5.**免疫反应**:11A型肺炎多糖鼠单抗能够诱导小鼠产生针对肺炎多糖的血清抗体,这有助于研究肺炎链球菌的免疫机制。6.**疾病预防**:肺炎链球菌是引起肺炎、脑膜炎和败血症等严重疾病的主要病原体,11A型肺炎多糖鼠单抗的研究有助于开发更有效的疫苗,预防相关疾病。7.**研究进展**:已有研究报道了使用半合成寡糖结合疫苗候选物,能够激发对肺炎链球菌3型的保护性免疫反应。
EndoS糖苷内切酶S在抗体药物偶联物(ADCs)研究中的应用主要体现在糖链定点偶联技术上。通过上海药物所的研究,开发了一种新颖的糖链定点ADC制备策略,利用EndoS2这种糖苷内切酶,可以将小分子细胞毒药物“一步”定点连接到抗体的糖基化位点,实现了糖链定点ADC化合物的制备。定点偶联技术相比传统的随机偶联具有更好的方法指数,能够提高ADC的均一性和稳定性,是当前ADC领域的研究热点之一。在抗体的Fc结构域N297位,这是一个保守的糖基化位点,通过在该位点引入细胞物质,可以形成具有优势的糖链定点ADC化合物(glycosite-specificADCs,gsADCs)。此外,EndoS2对多样化的LacNAc修饰显示出良好的兼容性,能够高效获得功能修饰的糖工程抗体,并且可以用于抗体的内吞成像研究及糖链延伸等功能化研究。研究人员通过这种“一步”制备策略得到的糖链定点ADC化合物,在结构均一性、亲水性、体外稳定性以及体外活性方面表现良好,并且在体内瘤抑制活性方面,相比阳性对照ADC化合物,在低载药量的情况下具有更强的抑制效果。EndoS酶的这些应用,不仅展示了其在简化ADC制备流程中的潜力,还有助于推动定点ADC药物的深入发展,为未来的生物药物开发提供了新的思路和方法。
EndoS,即糖苷内切酶S(Endo-S),是一种具有高度特异性的酶,它在生物化学研究中有着重要应用,尤其是在糖蛋白和抗体药物偶联物(ADCs)的研究中。以下是EndoS的一些关键特点:1.**特异性**:EndoS能够特异性地识别并切割N-连接糖链的壳二糖结构,即在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间的连接处进行切割。2.**应用**:在制备糖链定点ADC化合物中,EndoS被用于将小分子细胞毒药物“一步”定点连接到抗体糖基化位点,提供了一种重要的技术方法。3.**兼容性**:EndoS对多样化的LacNAc修饰显示出良好的兼容性,可以接受不同生物正交基团、荧光基团等衍生物作为底物,实现抗体糖基化修饰。4.**活性**:EndoS的活性对多肽没有严格的要求,可以接受蛋白质、肽、天门冬酰胺或游离聚糖作为底物。但是,对于具有三、四个支链的唾液酸化及去唾液酸化的聚糖,EndoS没有活性。5.**产品形式**:EndoS通常以带有His标签的形式存在,便于从反应中去除,这在实验操作中提供了便利。6.**研究进展**:EndoS在去糖基化方法研究中是一个重要的工具,特别是在研究糖蛋白的多肽部分和多糖部分的结构和功能时。
PreScissionProtease(PSP)是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST组成的融合蛋白。它具有以下特点:1.**特异性识别**:PreScissionProtease能在低温下(4°C)特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸残基之间进行酶切。2.**依赖结构**:底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构,还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。3.**分离GST标签**:它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。4.**表达宿主**:本品由大肠杆菌中重组表达,并以无菌液体形式提供。5.**物理性质**:分子量约为46kDa,物理外观为无菌无色液体。6.**储存缓冲液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切缓冲液**:10×酶切缓冲液为500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**纯度**:经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度大于95%。9.**酶活定义**:在5℃条件下反应16小时,能够切割10µg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。UBE2L3与其他E2酶的区别在于它具有特定的结构特征,它包含一个高度保守的UBC结构域,这是E2酶家族的标志。Recombinant Rat TNF-alpha Protein
许多Probe qPCR Mix (2×)产品采用热启动DNA聚合酶,能减少非特异性扩增,提高反应的灵敏度和特异性 。Recombinant Rat TNF-alpha Protein
重组Exendin-4是一种基于Exendin-4的重组蛋白,Exendin-4是一种从墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分离出来的39个氨基酸的多肽。它与胰高的血糖素样肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并与相同的膜受体相互作用。重组Exendin-4在体内增强依赖葡萄糖的胰岛素分泌,抑制不适当的高胰高的血糖素分泌,并减慢胃排空。它还在体外和动物模型中促进β细胞增殖和新生。重组Exendin-4是通过大肠杆菌表达的合成DNA序列编码的39个氨基酸的Exendin-4。重组Exendin-4的特点包括:-分子量约为4.2kDa,是一个非糖基化的单一多肽链,包含39个氨基酸。-具有调节血糖水平、减少胰岛素抵抗、降低胰高的血糖素、降低糖化血红蛋白(HbA1c)和刺激β细胞生长以促进胰岛素产生等多种生物活性。-通常以冻干粉的形式提供,需要在无菌条件下用无菌蒸馏水或含有0.1%BSA的水溶液复溶。-纯度高于96%,通过SDS-PAGE和HPLC分析确定。-内毒的素含量低于10EU/mg,通过LAL方法测定。在实验中,可以通过以下方法来优化重组Exendin-4的荧光特性:1.选择合适的激发和发射波长。2.优化激发和发射滤光片。3.评估荧光量子产率。4.调整缓冲液条件,包括pH值和离子强度。5.控制温度和氧浓度。Recombinant Rat TNF-alpha Protein
Recombinant Rhesus macaque VEGF R2/KDR Protein
肠激酶毕赤酵母表达
Recombinant Human TIM-4 Protein
Recombinant Mouse Semaphorin 4D/SEMA4D/CD100 Protein
Recombinant Cynomolgus PS20 Protein
T7 RNA聚合酶(高浓度)
Recombinant Mouse ECSCR Protein
Recombinant Human HMGB1(His Tag)
Biotinylated Recombinant Human 4-1BB/TNFRSF9 (His-Avi Tag)
Recombinant Human Kallikrein 3/PSAProtein