BloodDirectPCRMasterMix(2×)适合血液样本的PCR扩增主要通过以下几个方面:1.**抗血液抑制剂能力**:该预混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能够抵抗血液样本中的PCR抑制剂,如胆酸盐、血红素、蛋白质等。2.**优化的缓冲体系**:预混合溶液中的缓冲体系经过特别优化,以适应血液样本中的特定条件,包括pH、离子强度和Mg2+浓度,从而提高PCR扩增的效率和特异性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,能够在复制DNA时减少错误,保证扩增结果的准确性。4.**快速扩增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix产品具有快速扩增的特点,可以缩短PCR实验的时间。5.**宽泛的GC含量适应性**:该产品可以用于扩增不同GC含量的基因,包括高GC和低GC区域,提高了PCR的适用性。6.**直接使用血液样本**:无需对血液样本进行DNA提取或纯化,可以直接将抗凝血样品或干血斑样品加入PCR反应中。7.**兼容性**:兼容多种抗凝剂,如EDTA、肝素或柠檬酸钠,适用于不同来源的血液样本。8.**简化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步骤,BloodDirectPCRMasterMix简化了实验操作流程,减少了实验时间和潜在的污染风险。Pfu DNA Polymerase的热稳定性和保真性使其在优化PCR条件时更为灵活,比如在GC含量较高的模板中。Recombinant Mouse MFAP4 Protein,His-Flag Tag
Lambda核酸外切酶的活性表现在其高度特异性和过程性地消化5'端磷酸化的双链DNA。以下是一些关键点,描述了Lambda核酸外切酶的活性特征:1.**高度过程性(HighlyProcessive)**:Lambda核酸外切酶是一种高度过程性的5'→3'外切酶,这意味着它能够连续消化多个核苷酸,而不需要在每一步之后重新结合底物。2.**底物特异性(SubstrateSpecificity)**:该酶选择性地消化5'端磷酸化的双链DNA链,对单链DNA和非磷酸化DNA表现出低活性。3.**活性定义(ActivityDefinition)**:一个活性单位定义为在37°C下,30分钟内在50μl反应体积中,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer和1μg声波破碎的双链[3H]-DNA底物,产生10nmol酸溶性脱氧核苷酸所需的酶量。4.**反应条件(ReactionConditions)**:通常在37°C下进行孵育,使用1XLambdaExonucleaseReactionBuffer,该缓冲液包含67mMGlycine-KOH,2.5mMMgCl2,50µg/mlBSA,pH值为9.4。5.**热失活(HeatInactivation)**:通过在75°C下加热10分钟可以使Lambda核酸外切酶失活。6.**特定活性(SpecificActivity)**:Lambda核酸外切酶的特定活性为50,000单位/毫克蛋白。
转座酶是一类能够催化转座子(一种可移动的DNA序列)在基因组中从一个位置移动到另一个位置的酶。转座子可以在DNA分子上“跳跃”,在新的位置上插入自己的拷贝,而原始位置的转座子则可能被切除或保留。转座酶的作用是转座过程中的关键因素,它们可以被分为两类:1.**复制型转座酶**:在复制型转座过程中,转座子首先被复制,然后复制的拷贝到新的基因组位置,原始的转座子留在原位。这种机制通常涉及到“复制-粘贴”的过程。2.**剪切型转座酶**:在剪切型转座过程中,转座子从原始位置被切除,然后到新的基因组位置。这涉及到“剪切-粘贴”的过程。转座酶的活性和转座子的移动可以对基因组的结构和功能产生重要影响,包括:-**基因突变**:转座子的插入可能破坏基因的正常功能,导致突变。-**基因组多样性**:转座活动增加了基因组的多样性,有助于物种适应环境变化。-**基因调控**:转座子的插入可能激起或抑制某些基因的表达。-**新基因产生**:在某些情况下,转座子的移动可以导致新基因的产生。
磁珠本身并不直接参与电泳过程,但它们可以用于电泳后的样品处理,特别是在核酸(DNA或RNA)的提取和纯化过程中。以下是使用磁珠进行电泳后样品处理的一般步骤:1.**凝胶电泳**:-首先,将DNA或RNA样品通过凝胶电泳进行分离。凝胶通常是琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶,根据样品的大小和类型选择合适的凝胶浓度和缓冲体系。2.**观察和切割**:-电泳完成后,使用紫外线照射凝胶并使用适当的染料(如EB或SYBRGreen)对DNA或RNA进行染色,以在紫外光下观察到DNA或RNA的条带。3.**样品提取**:-确定目标DNA或RNA条带后,使用干净的工具(如切割器或移液枪)从凝胶中切割出含有目标分子的凝胶片段。4.**磁珠准备**:-根据磁珠试剂盒的说明书,准备磁珠。通常包括磁珠的重悬和可能的表面修饰,以确保它们能够特异性地结合目标核酸。5.**样品与磁珠混合**:-将切割出的凝胶片段转移到含有磁珠的溶液中,温和地混合以促进磁珠与核酸的结合。6.**磁分离**:-将含有磁珠和核酸的混合物置于磁分离架上,利用磁场使磁珠快速聚集在管底,从而实现与溶液的分离。7.**洗涤**:-移除未结合的溶液,向磁珠上加入洗涤液,再次进行磁分离以去除杂质。Phusion DNA Polymerase 应在后面加入反应体系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。
DNaseI是一种使用的酶,它能够水解单链或双链DNA,产生5'端为磷酸基团的二核苷酸、三核苷酸或更短的寡核苷酸片段。这种酶的活性依赖于钙离子,并且可以被镁离子或二价锰离子启动。在镁离子存在的情况下,DNaseI可以随机剪切双链DNA的任意位点;而在二价锰离子存在时,它可以在同一位点剪切DNA双链,形成平末端或1-2个核苷酸突出的粘末端。DNaseI的一个特点是它不含RNase活性,因此可以用于处理各种RNA样品,而不会对RNA造成降解。DNaseI的应用非常广,包括但不限于:-制备不含DNA的RNA样品;-在RT-PCR反应前去除RNA样品中可能的DNA污染;-体外RNA聚合酶催化的RNA转录后去除DNA模板;-进行DNaseI足迹实验研究DNA-蛋白质相互作用;-缺口平移(nicktranslation);-产生DNA随机片段文库;-在细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。DNaseI通常从牛胰腺中纯化得到,其分子量约为32kDa(单体)。活性定义为在37℃、10分钟内,能够完全降解1μgpBR322质粒DNA所需的酶量。在实验中,DNaseI的活性单位通常以Kunitz单位来表示,该单位是基于特定条件下酶降解DNA的能力来定义的。将合成的gRNA与Cas9 NLS蛋白混合,形成复合物。由于Cas9 NLS蛋白两端都有NLS,有助于复合物快速进入细胞核。Neuropeptide NPW-23 (Human)
在基因编辑中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或编辑工具的克隆,减少克隆过程中的非目标突变。Recombinant Mouse MFAP4 Protein,His-Flag Tag
磁珠法质粒小量抽提试剂盒中的磁珠分离通常涉及以下步骤:1.**裂解细胞**:-首先,使用裂解液(含有SDS等成分)裂解细菌细胞,释放出质粒DNA。2.**结合磁珠**:-将磁珠加入到裂解后的混合物中,磁珠表面通常修饰有能够特异性结合核酸的配体,使得质粒DNA吸附于磁珠表面。3.**磁分离**:-将含有磁珠和质粒DNA的混合物置于磁分离架上。磁分离架产生磁场,使得磁珠迅速聚集在管壁或管底。4.**未结合物质**:-在磁珠固定后,小心移除上清液,避免扰动磁珠。上清液中含有未吸附的蛋白质、RNA和其他细胞碎片。5.**洗涤磁珠**:-向磁珠中加入洗涤液,轻轻混匀以去除残留的杂质,然后再次使用磁分离架分离磁珠和洗涤液。6.**重复洗涤**:-根据试剂盒的说明,可能需要进行多次洗涤以确保高度纯化。每次洗涤后都需洗涤液。7.**干燥磁珠**(如果需要):-在某些情况下,可能需要去除洗涤后的残留液体,让磁珠在磁场作用下干燥,但要注意不要使磁珠完全干燥,以免影响DNA的洗脱。8.**洗脱质粒DNA**:-使用洗脱液(通常是低盐或高pH的缓冲液)将质粒DNA从磁珠上洗脱。洗脱液可以破坏磁珠与DNA之间的结合力,释放DNA。。
蛋白AG-微球菌核酸酶(pAG-MNase)
Recombinant Rat PLAU/uPA Protein
Recombinant Cynomolgus ANXA1 Protein
Recombinant Human HPN Protein
Recombinant Human IL-1R2/IL-1 RII/CD121b Protein
Recombinant Mouse ADAM8 Protein
5'端DNA/RNA腺苷酰化酶
Recombinant Cynomolgus SPARC Protein
Recombinant Cynomolgus IL-1 Beta/IL-1F2 Protein
Recombinant Human CD3E/CD3 epsilon monomer Protein