选择性培养基(selective media) 选择性培养基含有营养物(增菌剂)和抑菌剂(选择剂),标本接种于此类培养基后,由于抑菌剂的选择性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分离。利用选择性培养基经过一定时间的增菌培养,再接种于选择性鉴别培养基,可以提高目的菌的阳性检出率。抑菌剂的种类很多,常用的有孔雀绿、灿烂绿、亚硒酸钠、去氧胆酸钠、胆盐、四硫磺酸钠等。抑菌剂的加入量要适宜、准确,有的剧毒,有的不耐高热,配制时须特别注意。常用的富营养培养基包括麦康奈尔培养基和肉膏葡萄糖琼脂培养基。10%葡萄糖溶液
按培养基的营养成分是否完全区分:1.基本培养基,亦称“较低限度培养基”。只能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,称为基本培养基,是含有营养要求较低成分的合成培养基,常用“[-]”表示。这种培养基往往缺少某些生长因子,所以经过诱变过的营养缺陷型菌株不能生长。2.完全培养基,基础培养基添加血清等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。完全培养基可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要,常以“[+]”表示。3.补充培养基,凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基,称为补充培养基,它是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。根据在基本培养基中加入的是A或B等营养因子代谢物而分别用[A]或[B]等来表示。10%葡萄糖溶液营养成分的含量和比例对于培养基的功效和成效至关重要。
预装培养基是一种快速而方便的微生物培养技术,通常在无菌的纸板或管中提供。它们已经含有必要的营养成分,可以直接使用于微生物,从而将实验室的培养基制备时间从几个小时缩短到几分钟。此外,预装培养基通常具有长期的稳定性,可以存储数月甚至数年而不影响到较终的微生物培养结果。虽然预装培养基可以提供必要的营养成分,但它们不能提供微生物所需要的所有物质。一些微生物需要特定的营养成分,如果预装培养基缺少这些必要成分,它们将无法生长和繁殖。此外,某些微生物需要特定的肥料和环境条件来繁殖,而预装培养基通常无法满足这些要求。
近年来,国内外利用某些细菌特有的酶,选择相应的作用底物,研制出某些细菌专门用的的显色培养基,用于细菌的分离鉴别,收到了良好的效果,这种显色培养基实际上也是鉴别培养基。其基本原理是将色原(或荧光原)与细菌作用底物的结合物加于培养基中,当细菌含有相应酶时,使该结合物分解而显色(或显示荧光)。如色原糖苷结合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷与色原分离,并显示颜色;荧光氨基酸结合物(不显荧光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸与荧光物质分离而显示荧光。常用显色的色原有α-萘酚、β-萘酚、邻位硝基酚、对位硝基酚、对硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的荧光物有4-甲基伞形酮(又称7-羟基4-甲基香豆素)等。目前,显色培养基已用于多种细菌的分离鉴别培养,如沙门菌、大肠埃希菌、李斯特菌、双歧杆菌和乳酸杆菌、白色念珠菌等显色培养基。液体培养基是一种含有营养物质的液体,它是用于生物实验室中细胞培养的一种基础实验材料。
对于已经购买来的预装培养基,其内部较初的状态已经是无菌的。因此,在通常情况下,我们不需要对新的预装培养基进行任何形式的消毒处理。只需要在使用之前,检查预装培养基瓶口是否无菌,便可以直接使用。在使用过程中,应当严格遵守实验室操作规范,避免外界微生物的污染。对于需要自制的培养基而言,其情况也不尽相同。如果自制的培养基中包含天然成分,那么在自制之后就需要进行消毒处理,以杀死培养基中可能存在的微生物。在消毒处理之后,再将培养基装入瓶中,就可以进行进一步的实验使用。同时,在使用自制的预装培养基时,需要严格控制其培养温度、培养时间、以及实验环境等参数,以保证实验结果的准确性。液体培养基普遍应用于微生物菌株的生长、染色及细胞背景下的细胞培养等方面。10%葡萄糖溶液
在制备培养基时,要注意保持一定的 pH 值。10%葡萄糖溶液
制备培养基需要哪些材料?溶菌酶:溶菌酶是一种水解酶,可以分解大多数细菌细胞壁,促进菌落生长。溶菌酶通常与其他元素一起添加到培养基中,以加快菌落的生长速度和密度。营养物质:营养物质是细胞生长和减少细胞死亡所必需的化学元素和化合物。培养基中添加的营养物质包括氨基酸、糖类、维生素、核酸等。这些化合物可以提供细胞所需的能量和原料,促进细胞和菌落的生长。染色剂:染色剂是一类化学试剂,多用于细胞和菌落的研究中。常见的染色剂包括甲基红、溴菲尔蓝、乙酸洋红等。这些染色剂可以用于观察细胞生长和分化、菌落密度、代谢水平和产物含量等。10%葡萄糖溶液
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