血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。血清主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。Luria-Bertani 培养基是一种常用的细菌培养基,可用于大肠杆菌 E. coli 的培养。韦荣氏球菌琼脂基础
培养基按成分分类有哪些?按用途分类:根据用途不同,培养基可分为基础培养基、营养培养基、增菌培养基、选择性培养基、鉴别培养基、厌氧菌培养基等。基础培养基(basic media) 大多数微生物共同需要的营养基础。某--微生物如有特殊需要,可在此基础上添加某种成分即可,如蛋白胨水、肉汤培养基、营养琼脂等。1%蛋白胨水培养基便是一个较简单的基础培养基,该基础培养基本身可供一般细菌增菌培养和靛基质试验用,若再加入指示剂和糖类,则配成糖发酵培养基,供糖发酵试验用,成为鉴别培养基;若在1%蛋白胨水中增加氯化钠用量并将pH提高到8.6左右,则变成碱性蛋白胨水,用于霍乱弧菌的增菌培养,成为专门用的增菌培养基。毛藓菌琼脂4号为了避免细胞爆破释放DNA和蛋白质,培养基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶类。
培养基按成分分类有哪些?按形态分类:培养基按其不同的物理状态,可分为液体、流体、半固体和固体4类,培养基的物理状态取决于培养基中是否加人凝固剂或凝固剂的加入量。1、液体培养基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固剂,常温下以完全液态存在的培养基,如肉汤培养基或一般液体增菌培养基。2、流体培养基(semi-liquidmedium)在液体培养基中加入0.05%~0.1%的琼脂粉,使其具一定黏度,即成流体培养基。加入琼脂粉增加了培养基的黏度,降低空气中的氧气进人培养基的速度,能使培养基保持较长时间的厌氧条件,有利于一般厌氧菌的生长繁殖,如硫乙醇酸盐培养基、改良马丁培养基等。一般用于霉菌和厌氧菌检查的液体培养基中可加人少量琼脂使其成为流体培养。
细菌培养基之面粉琼脂培养基:面粉60g,琼脂20g,水1000ml把面粉用水调成糊状,加水到500ml,放在文火上煮30分钟。另取500ml水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。微藻培养基,BG-11培养基:NaNO3 1.5g,K2HPO4 ·3H2O0.04g,MgSO4·7H2O0.075g,CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid (柠檬酸)0.006g,Ferric ammonium citrate(柠檬酸铁铵0.006g,EDTA (dinatrium-salt) 0.001g,Na2CO3 0.02g,A5 + Co solution * (A5溶液1000×)1ml Distilled Water (蒸馏水)919ml。
培养基通常由培养基粉末和水混合而成。
细胞培养过程中,细胞培养基是不可或缺的,细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。通常细胞体外培养时需要加入血清,以维持细胞的生长和存活。而除了血清之外,部分细胞在培养过程中需要添加胰岛素和β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分来维持细胞状态。MCF-7和NIH:OVCAR-3等细胞需要额外添加胰岛素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等细胞则需要添加β-巯基乙醇,不同细胞加入量会有差异,需根据细胞类型判断。培养基种类繁多,根据需求选择适合的培养基对于成功的微生物培养至关重要。SS琼脂 GB/SN
生长细胞需要的营养物质包括碳源、氮源、微量元素和维生素等。韦荣氏球菌琼脂基础
胰岛素(Insulin)作用普遍,包括调节脂肪和蛋白质的代谢以及促进细胞生长等。胰岛素功能的发挥源于其对细胞的作用,进而引起组织乃至机体的整体反应。一般可将胰岛素在细胞水平的作用分为三大类:代谢作用、促生长作用、以及代谢和促生长混合作用。胰岛素对细胞的代谢调节作用主要是通过其与细胞膜上的胰岛素受体(Insulin receptor, IR)相互作用而介导,而胰岛素对细胞的促生长作用则是通过其与细胞膜上胰岛素的样生长的因子受体(IGF Receptor, IG)相互作用而介导的。在无血清细胞培养液中,常添加胰岛素来维持细胞生长,调节细胞对葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的摄取、利用和贮存,同时抑制糖原、蛋白质和脂肪的分解。韦荣氏球菌琼脂基础
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