安全设备和人员防护是确保实验室工作人员与病原微生物及其病毒直接接触的一级屏障。 生物安全柜是重要的安全设备,形成主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备CLASSⅠ、CLASS Ⅱ、CLASS Ⅲ级生物安全柜。所有可能使病原微生物及其病毒溅出或产生气胶的操作,除实际上不可实施外,都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。必要时实验室应配备其他安全设备,如设置配有排风净化装置的排气罩等,或采用其他不使病原微生物逸出确保安全的设备。菌株在环境监测、食品安全和医疗诊断等方面也将有着更为普遍的应用。Bacillus sp.菌株
保存条件斜面、穿刺菌和冻干粉可常温运输,但应在4-10度长期保存,甘油菌可常温运输,但应在-80度长期保存。微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退。冻干管的开启方法:方法一:将冻干粉甩至底部圆球位置,然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的前列(注意不是圆球端)放在火焰上加热。然后迅速滴几滴无菌水至加热处,此时冻干管的前列会自动破开。然后用镊子轻轻敲下冻干管前列,并将冻干管开口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)直接敲开法。方法二:首先将冻干粉甩至底部圆球位置,然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的前列(注意不是圆球端)放在火焰稍微加热灭菌。然后直接用大镊子敲打前列,敲开后将破口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)。簇生链格孢菌株菌株的研究涉及到多个领域的知识,需要进行跨学科合作和交流。
有些铜绿假单胞杆菌的保藏方法,如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害,保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。铜绿假单胞杆菌的多聚酶链式反应基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成模板DNA经加热至93摄氏度左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。
发酵时间:发酵液的lg活菌数值在 发酵前期随时间的延长而增长,在培养10~12 h后达到较高值,随后lg活菌数值增长缓慢。考虑到发酵液的lg活菌数在10 h之后变化不大,因此,选择发酵培养的时间为10 h较好。发酵10 h的结果显示,发酵液中活菌数可达约4.5× 1010 cfu/mL。涂片检查:取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰氏染色,在多形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前尿道炎患者,此法阳性率在90%左右,可以初步诊断。女性宫颈分泌物中杂菌多,敏感性和特异性较差,阳性率只为50-60%,且有假阳性,因此世界卫生组织推荐用培养法检查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少,阳性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高检出率。菌株的生理生态学研究也将推动微生物学向前发展。
传染部位:1、肠内传染:急性腹泻病,对于抵抗力差的老人及儿童甚至可引起溶血尿毒综合征。肠外传染:(1)尿路传染:泌尿系统是大肠埃希菌常见的肠道外传染部位,其发生与年龄、性别和生殖泌尿系统畸形等因素有关。(2)腹腔传染:大肠埃希菌是肝硬化患者自发性腹膜炎常见的致病菌,其来源主要包括腹腔内排泄物污染。腹腔或腹腔内脏脓肿、胰腺假性囊肿、阑尾炎、小肠憩室炎症穿孔及全身传染等。此外腹腔内传染多合并厌氧菌传染,脓液多有臭味。菌株与人类健康之间存在紧密关系,在疾病预防中有普遍的应用前景。侧毛壳
菌株的培养方式包括液态培养、固态培养等。Bacillus sp.菌株
致病性大肠埃希菌有下列五个病原群。(1)肠产毒型大肠埃希菌(ETEC):引起霍乱样肠毒腹泻(水样泻)(2)肠致病型大肠埃希菌(EPEC):主要引起婴儿腹泻。(3)肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC):可侵入结肠黏膜上皮,引起志贺样腹泻(能产生粘液脓血便)。(4)肠出血型大肠埃希菌(EHEC):又称产志贺样毒(VT)大肠埃希菌(SLTEC或UTEC),其中O157:H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征(HUS)。临床特征为严重的痉挛,反复出血性腹泻,伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。(5)肠粘附(集聚)型大肠埃希菌(EAggEC):也是新近报道的一种能引起腹泻的大肠埃希菌Bacillus sp.菌株
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