对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水,从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。近年来,菌株的遗传改造已成为一个研究热点,可用于开发新药等。金黄色葡萄球菌菌株
安全设备和人员防护是确保实验室工作人员与病原微生物及其病毒直接接触的一级屏障。 生物安全柜是重要的安全设备,形成主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备CLASSⅠ、CLASS Ⅱ、CLASS Ⅲ级生物安全柜。所有可能使病原微生物及其病毒溅出或产生气胶的操作,除实际上不可实施外,都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。必要时实验室应配备其他安全设备,如设置配有排风净化装置的排气罩等,或采用其他不使病原微生物逸出确保安全的设备。金黄色葡萄球菌菌株耐药菌株是指对多种具有耐药性的细菌株,如MRSA。
埃希菌大小在宽0.4--0.7μm,长约1--3μm。革兰阴性。多数菌株有周身鞭毛,能运动。有菌毛,包括普通菌毛和性菌毛。有些菌株可以有致病性菌毛。肠外传染菌株常含有多糖包膜,即微荚膜。埃希菌兼性厌氧,对营养要求不高。普通琼脂平板培养37℃的环境24小时后,形成直径2-3mm的圆形凸起灰白色S型菌落。在人和动物肠道中繁殖却速度比较慢一些,成倍增长的时间为一天。在肥沃的土壤表层可存活数月。有些菌株在血琼脂平板上呈β溶血。在液体培养基中呈均匀浑浊生长。适合的温度范围是15--45℃。有些菌株对热 的抗性比较强,在60℃仍可存活15分钟。
婴儿双歧杆菌是常见的肠道有益菌之一,只需少量生素即可被杀死,是一类安全性较高的非致病性 专性厌氧菌。鉴于实体瘤内区别于正常组织存在低氧代谢区,故可利用厌氧菌趋低氧代谢的特点将其作为疾病靶向医治的载体。一些对双歧杆菌冻干菌粉的研究结果表明,双歧杆菌发酵制备的高密度菌体经历冻干后,菌体密度 基本呈指数级下降。因此需要改进冻干保护剂配方以 提高菌体的冻干存活率及婴儿双歧杆菌制剂的产品质量。 在适当保护剂的作用下,采用冷冻干燥技术能有效地保 藏发酵制剂。但是大量的研究显示保护剂的效果存在菌株特异性。冻干保护剂的选择在新开发益生菌制剂的应用中尤为重要。菌株资源的开发和利用需要注重环境债务和社会责任等方面的考虑。
实验室生物安全防护:实验室工作人员所处理的实验物件含有致病的微生物及其病毒时,通过在实验室设计建造、使用人员防护设置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面採取综合措施,确保实验室工作人员不受实验物件侵染,确保周围环境有受其污染。微生物危害评估:对实验微生物和病毒可能给人或环境带来的危害所进行的评估。气胶:悬浮于气体介质中粒径一般為0.001μm~1000μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态分散体系。生物安全柜:处理危险性微生物时所用的箱形空气净化安全装置。CLASS I级生物安全柜:至少装置一个高效率滤网HEPA对排气进行净化,工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察窗,下部为操作视窗,外部空气由操作视窗吸进,而不可能由操作视窗逸出。工作状态时保证工作人员不受侵害,但不保证实验物件不受污染。菌株的选择应根据其应用领域的需求,如医学、环境、农业等。金黄色葡萄球菌菌株
菌株的保存和传递需要注意其稳定性、纯度和活性等。金黄色葡萄球菌菌株
提供菌种有三种类型:好氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌,好氧菌可以做成斜面、甘油菌、定量菌液、冻干粉形式。兼性厌氧菌可以做成甘油菌、定量菌液和冻干粉。厌氧菌可以做成冻干粉和培养皿厌氧袋好氧菌冻干粉使用说明:冻干粉活化,将菌粉甩至底部,将尖头一侧用酒精消毒后敲开,取0.2-0.3ml溶解液加入至菌种管中,轻轻弹至菌粉混合均匀,用无菌吸头全部吸出溶解液,全部接种至2支斜面上培养。注意真空菌种管一旦敲开里面的冻干粉就必须全部被用掉,留着也没用。金黄色葡萄球菌菌株
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