枯草芽孢杆菌是一类普遍分布于各种不同生活环境中的革兰氏阳性杆状好养型细菌,可以产生内生芽孢,耐热抗逆性强,在土壤和植物的表面普遍存在,同时还是植物体内常见的一种内生菌,对人畜无毒无害,不污染环境。由于枯草芽孢杆菌生长速度快、营养需求简单,易于存活、定殖与繁殖,无致病性,并可以分泌多种酶和抗生养素,常用作生物类型杀菌剂。枯草芽孢杆菌大小为(0.7~0.8)×(2~3)μm[内生芽孢大小为(0.6~0.9)×(1.0~1.5)μm],具有单层细胞外膜,有鞭毛,能运动,无荚膜,普遍存在于腐烂的有机物和土壤中,容易在枯草浸汁中繁殖,所以命名为枯草芽孢杆菌。铜绿假单胞菌在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。侧孢短芽孢杆菌
利用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌菌种时,要将保存的铜绿假单胞菌接种于1.7毫升肉汤管中,在37摄氏度恒温培养箱培养18小时后加人无菌甘油0.3毫升,使甘油浓度为15%,充分混匀,吸取1毫升分装于无菌的冷冻管或1.5毫升离心管,封好盖子,在-20摄氏度冰箱中放置3小时后,置-70摄氏度冰箱中长期保存。菌种复苏:从-70摄氏度冰箱中取出一只菌种保存管(已保存2年3个月),迅速用接种环轻轻刮取几下,转种于已预温到37摄氏度的普通琼脂平板上,37摄氏度培养18~24小时。半固体保存法,要用接种针挑取少量菌苔移种于无菌半固体培养管,肉汤中加人琼脂粉至终浓度为0.25%,于37摄氏度培养18小时;用无菌方法将培养管的软木塞换为灭菌的橡胶塞后,放人菌种保存箱4摄氏度保存。哈尔滨产乙酸菌铜绿假单胞菌中的原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,原性强的保护性抗原。
枯草芽孢杆菌在土温10-40摄氏度范围内能够正常生长繁殖,在10-24摄氏度生长繁殖较缓慢,并随着温度增高而繁殖加快,25-37摄氏度较适宜生长繁殖,在碳源充足(也就是有机质丰富)时约20--30分钟繁殖一代,超过48摄氏度后生长繁殖受到抑制,但也能繁殖,在60摄氏度条件下可长期存活,在120摄氏度条件下可存活20分钟。水分是枯草芽孢杆菌生长的先决条件,在缺少水分的条件下,枯草芽孢杆菌表现为芽孢状态(休眠),不能生长和繁殖。在土壤湿度低于15%时,枯草芽孢杆菌不能正常生长和繁殖。在土壤湿度15-30%时,枯草芽孢杆菌可生长繁殖,当土壤湿度在30-45%范围内较适宜枯草芽孢杆菌的生长繁殖。实际上,当土壤湿度大于45%时,并不影响枯草芽孢杆菌的生长和繁殖,但是这个湿度条件往往对农作物不利。
金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:直接计数方法6.2.1吸取上述1:10混悬液,进行10倍递次稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液1mL,分别加人三块Baird一Parker平板,每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收,可将平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。在三个平板上点数周围有混浊带的黑色菌落,并从中任选五个菌落,分别接种血平板,36℃士1℃24h培养后进行染色镜检、血浆凝固酶试验,步骤同增菌培养法。铜绿假单胞菌普遍存在,而在潮湿环境尤甚。
关于铜绿假单胞菌的麸皮保存法是在麸皮内加入60%的水,经灭菌后接种培养,然后干燥保藏。纸片(滤纸)保存法是将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中,常压或减压干燥后,置于装有干燥剂的容器内进行保存。寄主保存法是铜绿假单胞菌侵入其寄主后加以保存的方法。低温冰箱保存法一般为-20摄氏度、-50摄氏度或-85摄氏度,低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。三硝基苯甲基硝胺梭菌菌株
枯草芽孢杆菌菌体自身会合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类。侧孢短芽孢杆菌
金黄色葡萄球菌免疫学检测方法:分子生物学检测方法:核酸探针技术:通过使用基因特异性核苷酸序列作为探针与目的DNA杂交的一种核酸杂交技术,通过检测该段特异性的标记物,从而判断是否含有目标微生物。核酸探针具有分子生物学检测技术的灵敏度高、特异性强的优点,但是实验周期长,操作繁琐,如果样品中目标微生物含量过低,极易造成样品目标微生物未检出,出现假阴性的实验结果。环介导等温扩增技术:该技术基于DNA扩增技术,能够在恒温条件下,根据设计的多对引物,利用链置换型DNA聚合酶快速的进行核酸的扩增。与PCR方法比较,环介导等温扩增法操作更加快捷简单,花费成本较低,且对仪器要求低,能够普遍利用在食源性致病微生物的检测中。侧孢短芽孢杆菌
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