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上海MicroDrop-100数字PCR原理

来源: 发布时间:2024年07月15日

二代测序辅助建库目前靶向测序建库方法包括扩增子方法,在均相溶液中,当扩增引物增加时,由于扩增引物之间的相互作用,从而影响扩增的效率;如果将其分散到大量微液滴中扩增,将可降低引物间相互作用,提高扩增效率。同时还可以实现对于少量模板的有效扩增,得到更多的有效测序数据。CRISPR-Cas9基因编辑结果验证CRISPR-Cas9技术的发明,是基因编辑技术的一大突破,但如何验证实验是否成功,仍需要高灵敏度的检测方法,数字PCR技术可以满足这一需求。Broad研究所张锋团队发明了以CRISPR为基础的SHERLOCK技术可以对核酸进行高灵敏度的定性检测,但精确定量评估时仍采取了数字PCR进行确认。浚和(上海)仪器科技有限公司为您提供数字PCR ,有需求可以来电咨询!上海MicroDrop-100数字PCR原理

数字PCR

数字PCR是一种核酸分子 定量技术。当前核酸分子的定量有三种方法,光度法基于核酸分子的吸光度来定量;,Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数;数字PCR是***的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种 定量的方法。主要采用当前分析化学热门研究领域的微流控或微滴化方法,将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,就可以推算出原始溶液的核酸浓度。上海MicroDrop-100数字PCR原理数字PCR ,就选浚和(上海)仪器科技有限公司,有需求可以来电咨询!

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研究方向基因表达差异研究检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的***定量,从而提供了比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究,尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况:microRNA、lncRNAs等的表达分析、等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、Exosome内核酸分子定量分析等。拷贝数变异(CNV)研究微滴化的样品处理及检测,这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的***拷贝数,为拷贝数变异的研究提供了***的检测精度。是其他诸如二代测序、芯片杂交等平台无法达到的,因此采用数字PCR能够有效对NGS、aCGH的实验结果进行验证,并具有成本低、通量高的特点。

数字PCR(DigtalPCR)是一种核酸定量精密检测的新兴技术手段,于20世纪由Vogelstein等提出。它是将稀释后的核酸模板分配到大量不同的反应单元中,使每个反应单元中有一个或没有核酸。利用PCR扩增的同时,加入可检测荧光。待扩增结束时,使用统计学方法采集每个反应单元出现的荧光次数,从而定量检测样本中的核酸浓度。基于分液方式的不同,数字PCR主要分为3种:微流体数字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴数字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片数字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。浚和(上海)仪器科技有限公司是一家专业提供数字PCR 的公司,有想法的不要错过哦!

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MicroDrop-100系统产品特点:一、适应性广,灵活性高1、理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用2、样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定3、开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。二、灵敏度高,准确性高1、***定量——无需依赖标准曲线2、采用微滴式技术高达100,000个的微滴3、线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一三、可分析复杂混合物1、准确度不完全依赖于扩增效率2、双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法3、支持多重数字PCR四、操作简单,使用方便1、全封闭防污染设计,一键式自动化操作。2、可选全中文分析软件浚和(上海)仪器科技有限公司为您提供数字PCR ,欢迎新老客户来电!上海MicroDrop-100数字PCR原理

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研究方向无创产前筛查无创伤的产前诊断,如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地贫检测或已知父母基因型的其它核酸病检测(孟德尔相关遗传疾病)。目前标本来源主要为血液,而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰,影响了检测的准确性。而QX200检测系统独特的微滴化技术完全可以作为二代测序法的补充来进行的无创伤产前诊断,从而提高工作效率及节约成本。转基因食品或成分的检测目前在确定转基因作物或成分的含量时采取定量PCR的标准曲线法,这种方法需要依赖于已知浓度的标准品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以彻底解决这些标准物质的定标工作。上海MicroDrop-100数字PCR原理