因为制作工艺成熟和产量大的原因,实验室常备血清一般都为牛血清。而牛血清种类也因适合培养不同种类的细胞分很多种了,同属于牛血清为什么它们价格却有天壤之别。我们就拿市面上应用较为广的胎牛血清和新生牛血清为例。除了生产成本和供应来源不一样外,两种血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可较为大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。二者的成分也很不一样。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,还含有丰富的胚胎生长促进因子以及各种还未完全鉴定的成分,可满足所培养细胞的特殊的代谢需求。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。莆田优级胎牛血清
血清的主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质(氢化可的松、)、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。福州标准级胎牛血清供应商每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
如何解冻血清?血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。需要对新买的血清进行过滤吗?血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。
较为低血清试验的要求。内有毒的检测:内有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革兰氏阴性菌的细胞外膜。临床上,内有毒的作为一些革兰氏阴性菌的诊断提示,如脑膜炎球菌。动物体内,内有毒的能够导致发热或者诱导炎症反应;细胞培养中,内有毒的能够诱导细胞反应异常。通常,采用鲎阿米巴样细胞裂解实验(LAL检测)检测内有毒的水平。LAL是从美洲鲎的血液中制备的,对内有毒的非常灵敏,在微量内有毒的存在情况下就凝结。阿米巴样细胞相当于哺乳动物的白细胞。特异性血清及其加工方式,热钝化:胎牛血清的常规处理方式是热钝化,即放在56°水浴30分钟;其目的是使血清中的补体成分及一些未知的细胞生长抑制分子失活。与胎牛血清的其它加工方式一样,热钝化处理过程必须小心谨慎,因为血清中的生长因子容易在较高温度或者较长时间加热条件下失活,甚至产生沉淀。使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。
合格的胎牛血清都需要经过严格的多重质检和验证,这里需要特别关注胎牛血清的相关质量合格证明,不但不能含有有害微生物,如细菌、菌类、支原体、病毒等,同时也必须通过了各种性能测试实验。通过验证细胞的形态、增殖速度、克隆形成率等多项测试,性能表现优异的胎牛血清对细胞培养更友好,效果更明显。胎牛血清作为畜牧业的副产品,产量十分有限,且受到天然环境、食物卫生、经济条件及等各种因素的影响,很好的胎牛血清就更加稀有。因此,找到稳定提供同批次胎牛血清的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,还能大量节省试错(经济)成本。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。台州细胞培养用胎牛血清哪里有
血清提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。莆田优级胎牛血清
血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,含有多种对细胞生长必需的营养因子及大分子物质。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及类物质。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很较广。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。相对于新生动物血清或成体动物血清来说,胚胎期动物血清有什么优点?与其它类型血清相比,胚胎期动物血清含有更多的生长因子,及较少的gamma球蛋白含量。血清与血浆的区别:血清是由血液凝固后的上清液制备的;而血浆中含有抗凝剂,所以血浆中含有血液凝固相关的蛋白。莆田优级胎牛血清