胎牛血清是细胞培养重要的培养基且不可替代,它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养。因此,如何在使用过程中保护这些因子的活性,达到较为大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:正确储存,避免反复冻融:血清在-20°C冻存。血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液,应于一周内用完。血清避免在4°C或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。泰州去外泌体血清哪里有
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。莆田进口胎牛血清销售公司血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。
国内科研人员购买胎牛血清的现状:难辨真假。 原因很多,一方面是国内血清市场这几年是愈发的混乱了,很多商家都盯上了这块“蛋糕”,现在国内市场能见到的各种来源的血清品牌大于50种,使用者在不了解国家政策和相关知识的前提下很难去辨别和选择安全、稳定、合规的胎牛血清。另一方面是客户很难找到血清相关的真实信息,即便想去分辨也无从下手,只能听商家的了。现在允许进口的血清产地很少,只有南美(乌拉圭)、澳大利亚、新西兰。对血清行业有些了解的人看到这些,就会知道能够进口到国内的胎牛血清注定是很少的。胎牛血清有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。
对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛。韶关细胞培养用胎牛血清品牌
血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚。泰州去外泌体血清哪里有
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆较为大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。泰州去外泌体血清哪里有