胎牛血清:胎牛血清参与细胞培养,是细胞生长天然的培养基,它为细胞提供生长因子、结合蛋白、脂质、矿物质、黏附和铺展因子等来促进体外细胞培养。透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究。这主要包括四个领域:蛋白质组学、同位素标记、细胞通讯以及报告基因细胞系的筛选,其中有些领域是相互交叉的。以下稍作举例。将13C或15N标记的氨基酸掺入到培养基中培养细胞,来标记细胞内新合成的蛋白质,一般培养5-6代,细胞中的蛋白质将都被同位素标记。然后质谱分析,即可比较经过不同处理的细胞,其内部蛋白质丰度的变化。胎牛血清应用比较普遍。盐城标准级胎牛血清销售公司
胎牛血清的生产工艺:胎牛血清适合脉冲示踪实验(同位素标记研究细胞代谢)适合转染CHO后的筛选,避免外源小分子对细胞产生干扰。透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的。胎牛血清在无菌条件下要经过0.1微米膜三重过滤,要进行一系列的检测,包括理化性质检查(如渗透压和pH值),成分检查(如内的毒性和血红蛋白)、外源因子检查(如细菌、病毒和支原体)以及促进细胞增殖的检查等。透析胎牛血清为保证其性能和安全性,也需具备胎牛血清的这些工艺和检查。盐城标准级胎牛血清销售公司热灭活反而影响胎牛血清中的活性成分。
胎牛血清的功能:胎牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
胎牛血清的处理方法有:热灭活,FBS的常见处理方法是热灭活,其中将FBS在56°C的水浴中加热30分钟,偶尔摇晃。目的是灭活FBS中存在的补体系统的任何成分,以及其他潜在的未知细胞生长抑制剂。以前热灭活也是为了去除支原体污染,这不再是一个问题,因为现在所有的血清产品都通过小到足以去除支原体的孔径进行过滤。必须注意的是,热灭活也可能产生不良影响,例如降低培养细胞附着在表面上的能力。热灭活过程必须小心进行,因为温度过高或长时间加热会使生长因子失活,并产生沉淀物。胎牛血清适合脉冲示踪实验(同位素标记研究细胞代谢)适合转染CHO后的筛选。
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内的毒性,内的毒性是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内的毒性直接参与细胞凋亡,血清中内的毒性含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内的毒性含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内的毒性水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内的毒性应<10EU/ml。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。胎牛血清加热可以灭活补体系统。盐城标准级胎牛血清销售公司
胎牛血清含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及Hormone类物质。盐城标准级胎牛血清销售公司
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界,与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。所有胎牛血清均在当地兽医部门的监督下从注册的出口屠场采集,符合国际动物协会要求。盐城标准级胎牛血清销售公司
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