胎牛血清融化:胎牛血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉,如同蜂蜜溶于水时的亮线,这就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔点高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高级冰淇淋和大棒冰的区别,你懂得!)试想,如果采用4℃过夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大约需要10小时左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此时就很容易有一些蛋白饱和析出,(大多是脂蛋白和纤连蛋白),这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等。珠海OriCell胎牛血清品牌
胎牛血清:胎牛血清参与细胞培养,是细胞生长天然的培养基,它为细胞提供生长因子、结合蛋白、脂质、矿物质、黏附和铺展因子等来促进体外细胞培养。透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究。这主要包括四个领域:蛋白质组学、同位素标记、细胞通讯以及报告基因细胞系的筛选,其中有些领域是相互交叉的。以下稍作举例。将13C或15N标记的氨基酸掺入到培养基中培养细胞,来标记细胞内新合成的蛋白质,一般培养5-6代,细胞中的蛋白质将都被同位素标记。然后质谱分析,即可比较经过不同处理的细胞,其内部蛋白质丰度的变化。广州标准胎牛血清供应商胎牛血清支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)大增殖浓度≥2.5×106 个/ml。
胎牛血清如何采取?在牛屠宰过程中,如发现母牛怀孕,就应立即将生殖系统从尸体中分离出来,在无菌条件下从子宫中取出小牛,进行脐带打结处理,清理羊水并消毒。在胎儿两肋之间直接插入一根针头到心脏,在真空的条件下,血液通过导管被抽入无菌的血液收集袋内。在没有真空泵时,也可将血液收集袋放在胎牛身体下面,通过重力作用或按摩方式进行收集。血液收集后,放在低温条件下凝集,经过离心去掉凝集物而获得血清。胎牛血清的获得量取决于胎儿的大小和年龄。胎儿至少3个月,否则会因心脏太小而不便于操作。一个3月龄的胎儿可产生150mL的血清;6月龄和9月龄的胎儿可分别产生350mL和550mL血清。
胎牛血清的意义:胎牛血清是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血,丰富的生长发育因子,胎牛血清非常适合各种细胞的培养,胎牛血清是细胞培养中重要的天然培养基,胎牛血清起到为细胞提供营养、支持、保护的作用。好的的胎牛血清是让细胞“快乐成长”的必备营养物,但劣质的胎牛血清,也可能会成为导致细胞死亡的“定时炸雷”。因此,挑选需要擦亮们的双眼。蛋白含量,总蛋白含量:胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,可能说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺入水或者其他溶剂。血红蛋白含量:标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的数值能侧面反映出时的牛龄情况,新生牛血清中容易检出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。胎牛血清:性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。小牛血清取自出生10-30天的小牛。广州标准胎牛血清供应商
血清可提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质。珠海OriCell胎牛血清品牌
如何区别真假胎牛血清:沉淀,很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采的血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。澄清度,进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。珠海OriCell胎牛血清品牌
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