用于体外细胞培养的胎牛血清及其制备方法:将已存放血浆的试管置入-20~0℃环境下保存备用;将血浆分离提取胎牛血清,具体步骤如下:取6-12g氯化钠、0.1-0.5g磷酸二氢钾和1.4-2.4g磷酸二氢钾放入容器中,向其中加入300-700mL去离子水,搅拌均匀,使用质量分数为10-20%的盐酸溶液调节pH为7.0-7.3,将上述所收集的血浆倒入容器中,搅拌均匀,温度设定为25-38℃,静置8-20min,得混合液C;22)将上述的混合液C放入离心机中离心分离8-20min,转速设定为3000-10000r/min,取上清液。血清的主要作用是提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。上海优级血清供应商
胎牛血清有必要做热灭活吗?实验证明,经过正确处理的热灭活胎牛血清,对于大多数的细胞而言都是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,从而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此类沉淀物增加得更多,这常常会使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议客户,若非必须,可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省客户宝贵的时间,更确保血清的质量。宿迁细胞培养用胎牛血清多少钱胎牛血清常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
胎牛血清的处理方法主要有以下几种:1.活性炭处理,活性炭可以与亲脂性分子结合,因此已用于从FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)。这些血清脂质Hormone倾向于干扰免疫测定系统和胰岛素测定方法。2.透析,透析可以从FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。这包括极性和非极性分子。去除细胞因子、葡萄糖、氨基酸和许多其他物质。透析还可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。
为什么要热灭活胎牛血清?胎牛血清加热可以灭活补体系统。开启的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,开启淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活胎牛血清。为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现少量沉淀?胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。
如何挑选适合细胞生长的胎牛血清?原代或是正常细胞株建议使用BI特级胎牛血清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用特级胎牛血清,或胚胎干细胞胎牛血清。由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清质量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。如何正确保存胎牛血清?需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。我们常会看到胎牛血清的标注上有对产品灭活也有没有灭活的。合肥优级血清品牌
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。上海优级血清供应商
如何区别真假胎牛血清:沉淀,很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采的血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。澄清度,进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。上海优级血清供应商
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