胎牛血清如何采取?在牛屠宰过程中,如发现母牛怀孕,就应立即将生殖系统从尸体中分离出来,在无菌条件下从子宫中取出小牛,进行脐带打结处理,清理羊水并消毒。在胎儿两肋之间直接插入一根针头到心脏,在真空的条件下,血液通过导管被抽入无菌的血液收集袋内。在没有真空泵时,也可将血液收集袋放在胎牛身体下面,通过重力作用或按摩方式进行收集。血液收集后,放在低温条件下凝集,经过离心去掉凝集物而获得血清。胎牛血清的获得量取决于胎儿的大小和年龄。胎儿至少3个月,否则会因心脏太小而不便于操作。一个3月龄的胎儿可产生150mL的血清;6月龄和9月龄的胎儿可分别产生350mL和550mL血清。胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较为少。武汉细胞培养用血清哪里有卖
如何挑选好的胎牛血清:好的胎牛血清是实验的成功的前提是所有实验人做细胞培养的共识,如何挑选好的胎牛血清,可以从以下几个方面着手。1.外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明,血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。2、总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。3、血红蛋白,标准为不高于,20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。4、pH国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关。武汉细胞培养用血清哪里有卖胎牛血清:性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
如何挑选适合细胞生长的胎牛血清?原代或是正常细胞株建议使用BI特级胎牛血清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用特级胎牛血清,或胚胎干细胞胎牛血清。由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清质量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。如何正确保存胎牛血清?需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。
选购胎牛血清:为了保证胎牛血清产品的均一性和稳定性,胎牛血清生产需遵循相关规定进行操作。一般来说,胎牛血清制备需经过以下几个步骤:采集,离心,分离,无菌过滤,用来制作血清的牛血,是通过采集多头牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品质稳定的血清,获得大量健康、符合当地法律法规的供体动物,是先决条件。采集(5-8月龄牛胚胎)、离心以及粗血清分离的过程,不能保证完全的无菌,因此,整个过程中,无菌过滤就成为重中之重。严格的无菌过滤,能够尽可能祛除细菌、支原体等微生物的污染,保证胎牛血清品质。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中。
为什么要热灭活胎牛血清?胎牛血清加热可以灭活补体系统。开启的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,开启淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活胎牛血清。为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现少量沉淀?胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。胎牛血清提供对维持细胞指数生长的Hormone。武汉细胞培养用血清哪里有卖
反复冻融会破坏胎牛血清中有效成分,影响血清品质。武汉细胞培养用血清哪里有卖
胎牛血清的功能:胎牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。武汉细胞培养用血清哪里有卖
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