细胞培养是很多下游实验的基础,细胞培养的好坏会直接影响后续实验的成功和稳定,而胎牛血清作为细胞培养的主要试剂对实验的重要性不言而喻!胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基,因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低,且含有丰富的细胞生长必须的营养成份,故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。胎牛血清起酸碱度缓冲液作用。福州优级胎牛血清价格
活性炭处理胎牛血清的应用:活性炭处理胎牛血清主要用于受体研究和雌Hormone相关的细胞研究实验。同时活性炭处理胎牛血清极大的降低了多种Hormone和生长因子,减少了影响细胞生化分析的干扰因子。性炭处理胎牛血清减少了血清中的类固醇类化合物,3x100nm无菌过滤内的毒性≤10EU/mL,血红素≤20mg/dL。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质较高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。福州优级胎牛血清价格血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚。
胎牛血清:在细胞培养过程,质量粗糙的FBS可能会导致细胞出现生长速度缓慢、不贴壁、容易老化等现象,从而导致实验受阻。经过质量验证的FBS,则可以十分确定这款FBS对哪些细胞具有良好的培养效果,进而判断其能否把自己的细胞养好。对于质量好的FBS,通常采用血清敏感性细胞(如干细胞)来进行培养验证,若培养效果良好,则其他常规细胞系的培养就更不在话下。FBS作为其他行业的副产品,其生产在本质上会受到天气、食物供应、经济条件和牛群规模等各种因素的影响,导致血清的供应可能出现货源、价格及批次间的不稳定性,从而造成实验的不顺甚至实验失败。在过去,国内外已有多个实验室出现过因血清批间差异大而导致实验结果无法重复的情况,浪费了巨大的时间和金钱成本。
胎牛血清要求:1、性状、外观:浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、无菌检验:阴性。5、支原体检验:阴性。6、细菌内的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒:阴性。8、大肠杆菌噬菌体:阴性。9、支持细胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等。血纤维蛋白在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中。
胎牛血清的处理方法主要有以下几种:1.活性炭处理,活性炭可以与亲脂性分子结合,因此已用于从FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)。这些血清脂质Hormone倾向于干扰免疫测定系统和胰岛素测定方法。2.透析,透析可以从FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。这包括极性和非极性分子。去除细胞因子、葡萄糖、氨基酸和许多其他物质。透析还可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。福州优级胎牛血清价格
血清有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。福州优级胎牛血清价格
胎牛血清融化方法:只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且较大限度减少了血清沉淀出现的几率。血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白,血清在培养细胞中,比较重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中较大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。福州优级胎牛血清价格
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