血清中絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?1.将冷冻保存的血清取出后,置4℃冰箱静止过夜;2.待血清融化后,上下颠倒,轻轻混匀,继续4℃2-3小时;3.轻轻吸取上层血清,分装,余底下50ml左右;4.低速离心5分钟,去掉沉淀。若解冻后发现有絮状沉淀物出现,该怎么处理?胎牛血清中沉淀物的出现有许多种原因,但较普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将胎牛血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。小牛血清取自出生10-30天的小牛。绍兴标准胎牛血清供应商
胎牛血清的功能:胎牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。丽水优等胎牛血清多少钱胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中。
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量,补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
那么如何保障胎牛血清的品质呢:内有毒的,内有毒的含量越低的血清,胎牛血清级别就越高:内有毒的≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;10EU/ml<内有毒的≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;内有毒的≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;应选取内有毒的含量低的胎牛血清,使培养的细胞更健康。如果选取内有毒的较高的血清,细胞一直泡在“毒液”里,短期内细胞看不出太明显的变化,但长期的话细胞会衰老得较快,从而对实验结果造成严重影响。微生物:微生物包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原毒等。严格的生产工艺可以对细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。同时3次0.1um过滤可以完全祛除支原体(支原体直径0.2~0.3um)。通过病毒的检测,可以严格控制牛腹泻、牛细小、蓝舌病等病毒。通过非疯牛病疫区生产还可避免朊病毒。胎牛血清非常适合各种细胞的培养。
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、无菌检验阴性。5、支原体检验阴性。6、细菌内的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒阴性。8、大肠杆菌噬菌体阴性。9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。苏州无外泌体血清多少钱
血清提供和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质、类固醇(雌二醇、睾酮、孕酮)等。绍兴标准胎牛血清供应商
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。绍兴标准胎牛血清供应商
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