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来源: 发布时间:2022年09月28日

细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:细胞生长过老,破碎的细胞残骸;血清质量不好,反复冻融的结果;配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。胎牛血清常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。深圳无外泌体胎牛血清哪里有

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因为制作工艺成熟和产量大的原因,实验室常备血清一般都为牛血清。而牛血清种类也因适合培养不同种类的细胞分很多种了,同属于牛血清为什么它们价格却有天壤之别。我们就拿市面上应用较为广的胎牛血清和新生牛血清为例。除了生产成本和供应来源不一样外,两种血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可较为大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。二者的成分也很不一样。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,还含有丰富的胚胎生长促进因子以及各种还未完全鉴定的成分,可满足所培养细胞的特殊的代谢需求。深圳无外泌体胎牛血清哪里有血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚。

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未经检疫的胎牛血清可能携带传染性物质,一旦流入境内,将会对人民群众的生命健康造成重大威胁,如可能带有疯牛病病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛细小病毒、狂犬病毒或其他传染性物质,具有极高的检疫风险。此外,不合格的血清对实验的重复性、稳定性和真实性也会造成严重影响。无合格质检的胎牛血清存在支原体、病毒等污染,这对细胞培养的实验结果会造成严重不良影响;工艺不规范导致溶血,溶血较严重的血清含有许多胞内产物,对细胞有刺激作用,影响实验的稳定性和数据的真实性;血清批次不稳定,实验结果难以重复。

如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。胎牛血清的其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚。

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为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。深圳无外泌体胎牛血清哪里有

一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤。深圳无外泌体胎牛血清哪里有

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