血清的主要作用:对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被较广用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢医治中起重要作用,如SeO3,硒等。血清的主要作用是提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。黄山细胞培养用胎牛血清多少钱
胎牛血清作为动物细胞培养基中的关键组分之一,在动物细胞培养中占据重要地位。胎牛血清是在封闭的屠宰机构对未发育完全的胎牛的心脏穿刺取血而获取的牛血清制品,牛血清制品随着取血对象的年龄变化可分为胎牛血清,新生牛血清以及(成年)牛血清,血清的成分及含量会随年龄变化。而胎牛血清由于血清采集时间早,其胎球蛋白较多,并富含多种生长因子。同时,由于未接触外界环境,胎牛血清所含的内有毒的、补体等细胞有害成分和抗体水平均是较低的。因此,胎牛血清从细胞培养的效果来看是较为很好的牛血清制品,在细胞培养的应用较为较广。黄山细胞培养用胎牛血清多少钱牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。
避免产生沉淀物:请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。若血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。血清提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。
未经检疫的胎牛血清可能携带传染性物质,一旦流入境内,将会对人民**的生命健康造成重大威胁,如可能带有疯牛病病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛细小病毒、狂犬病毒或其他传染性物质,具有极高的检疫风险。此外,不合格的血清对实验的重复性、稳定性和真实性也会造成严重影响。无合格质检的胎牛血清存在支原体、病毒等污染,这对细胞培养的实验结果会造成严重不良影响;工艺不规范导致溶血,溶血较严重的血清含有许多胞内产物,对细胞有刺激作用,影响实验的稳定性和数据的真实性;血清批次不稳定,实验结果难以重复。血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成。黄山细胞培养用胎牛血清多少钱
血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。黄山细胞培养用胎牛血清多少钱
血清的常见问题:保存方法,血清应保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。解冻方法:将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。避免产生沉淀物:解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。黄山细胞培养用胎牛血清多少钱