半固体储存培养基是一种在微生物学研究和细胞培养领域中扮演重要角色的培养基。它主要用于观察微生物的动力、菌种的保藏与运输、厌氧菌的培养、菌种鉴定、细胞培养、噬菌体效价测定以及微生物趋化性研究等。半固体培养基通常由液体培养基加入少量凝固剂制成,例如琼脂的用量在0.2~0.7%之间。在具体应用上,半固体培养基可以用于以下方面:1.**微生物动力观察**:通过推测细菌是否有鞭毛来进行鉴定。2.**菌种保藏与运输**:便于菌种的短时间保存和长途运输。3.**厌氧菌培养**:适用于厌氧菌的培养,对于研究厌氧微生物的生长和代谢至关重要。4.**菌种鉴定**:通过观察菌落的形态和生长特性来区分不同的微生物种类。5.**细胞培养**:在细胞生物学领域,半固体培养基广泛应用于干细胞、细胞克隆、细胞表达和细胞毒性等实验。6.**噬菌体效价测定**:用于双层平板法测定噬菌体的效价,是研究病毒与宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趋化性研究**:帮助研究微生物的趋化性,即微生物对化学物质的定向移动反应。蜡样芽孢杆菌在木糖明胶培养基中不发酵木糖,培养基颜色不变,液化明胶作为典型特征 。PLET琼脂预装培养皿
弯曲杆菌琼脂基础是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的培养基,尤其是空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)和大肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特点:1.**选择性培养**:弯曲杆菌琼脂基础通常与特定的选择性添加剂一起使用,如改良Karmali选择性添加剂或弯曲杆菌选择性添加剂,这些添加剂含有抗生物质,如万古霉素和两性霉素B,以抑制其他非目标微生物的生长,提高目标弯曲杆菌的分离率。2.**无血培养基**:某些类型的弯曲杆菌琼脂基础是无血的,这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。无血培养基通常使用活性炭、硫酸亚铁和酸钠替代血液。3.**微需氧环境**:弯曲杆菌是微需氧菌,生长环境是含氧气5%、二氧化碳10%、氮气85%。因此,弯曲杆菌琼脂基础通常在微需氧条件下使用,这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**:在适宜的条件下,空肠弯曲杆菌在弯曲杆菌琼脂基础中生长,形成灰色、湿润、平铺的菌落,这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.配方:弯曲杆菌琼脂基础的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化钠、琼脂等,提供碳、氮源、维生素和生长因子。
DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)是一种用于微生物培养的培养基,其特点和使用方法如下:1.**用途**:DTA培养基主要用于嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养。2.**成分**:该培养基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分比例为胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、琼脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**检验原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。5.**配制方法**:称取30.0gDTA培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃下高压灭菌15分钟,备用。6.**使用方法**:在加热灭菌前,培养基成分应边搅拌边溶解于水中。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20分钟,这个时间从中心温度达到121℃开始计算。7.**结果观察**:嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。8.**微生物灵敏度试验**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。
嗜盐菌选择性琼脂是一种专门用于分离和培养嗜盐菌的培养基,其特点和应用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化钠:40.0g/L-结晶紫:0.0005g/L-琼脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生长。-高含量的氯化钠创造高渗环境,有利于嗜盐菌的生长,同时抑制不耐高盐的细菌。-结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长。-琼脂作为凝固剂,使培养基凝固成固体。-高pH值有助于抑制部分杂菌的生长。3.**配制方法**:-称取77.0g培养基粉末,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中。-分装后,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**使用方法**:-将培养基倾注成平板,待凝固后使用。-接种样品后,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。5.**细菌生长特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:无色菌落,较湿润。-溶藻弧菌ATCC17749:无色菌落。-金黄色葡萄球菌ATCC25923:抑制生长。6.**微生物灵敏度试验**:-按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于36±1℃需氧培养18-24小时。-回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。
CIN-1培养基基础是一种用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性培养基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、琼脂、Irgasan、中性红、结晶紫和氯化锶等成分,pH值约为7.5±0.1(25℃)。这种培养基通过其成分的选择性作用,可以有效地促进目标菌的生长,同时抑制其他非目标菌。**CIN-1培养基基础的用途**:主要用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌(GB标准)。**添加剂**:每瓶需配套添加CIN-1添加剂,每200mlCIN-1培养基基础添加1支HB0269-2。**配制方法**:称取58.0gCIN-1培养基基础,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,加入一支过滤除菌的CIN-1添加剂(含头孢菌素3mg,新生霉素0.5mg),混匀,倾入无菌平皿。**检验原理**:胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌体生长所需要的氮源、碳源和微量元素;甘露醇作为可发酵碳源;氯化钠维持培养基体系渗透压;硫酸镁提供菌体生长的微量元素;去氧胆酸钠和结晶紫能够抑制革兰氏阳性菌;中性红作为酸碱指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。木糖明胶培养基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明胶、木糖、磷酸氢二钠和酚红等。PLET琼脂预装培养皿
由于双歧杆菌是厌氧菌,PYG培养基需要在厌氧或微需氧条件下使用,以确保细菌的正常生长 。PLET琼脂预装培养皿
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的固体培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化钠:5.0g-无水亚硫酸钠:3.0g-十二烷基硫酸钠:0.5g-猪胆汁粉:5.0g-雷佛奴尔:0.03g-庆大霉素:500U-琼脂:15.0g-pH值约为8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍乱弧菌的选择性分离培养。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉,加入到1L蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-冷却至50-55℃时,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。-待凝固后备用。4.**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子。-氯化钠维持均衡的渗透压。-亚硫酸钠可刺激弧菌生长。-柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、牛胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌。-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长。-琼脂是培养基的凝固剂。PLET琼脂预装培养皿