支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的培养基,它包含精氨酸作为生长因子,适用于那些需要精氨酸才能生长的支原体,如口腔支原体等。以下是该培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:通常包含猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖、L-精氨酸和酚红等成分。2.**配制方法**:-称取培养基粉末,按照说明书比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸馏水中。-加热溶解并调节pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至室温后,无菌操作下加入灭活小牛血清或马血清(通常为200mL)和青霉素(通常为80万单位)。-混匀后分装到无菌试管中备用。3.**用途**:主要用于药品和生物制品中支原体的检测,特别是口腔支原体的培养和检测。4.**培养条件**:通常在36℃±1℃的条件下培养7-14天。5.**观察指标**:培养基中的酚红作为pH指示剂,支原体生长时会因代谢产物改变培养基的pH值,导致颜色变化。例如,口腔支原体分解精氨酸产碱,使培养基颜色由橙色变为红色。6.**质量控制**:通过接种已知的质控菌株来验证培养基的灵敏度和有效性。小牛浸液琼脂的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),这为微生物生长提供了适宜的酸碱环境 。胰化大豆硫酸镁琼脂平板
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的固体培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化钠:5.0g-无水亚硫酸钠:3.0g-十二烷基硫酸钠:0.5g-猪胆汁粉:5.0g-雷佛奴尔:0.03g-庆大霉素:500U-琼脂:15.0g-pH值约为8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍乱弧菌的选择性分离培养。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉,加入到1L蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-冷却至50-55℃时,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。-待凝固后备用。4.**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子。-氯化钠维持均衡的渗透压。-亚硫酸钠可刺激弧菌生长。-柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、牛胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌。-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长。-琼脂是培养基的凝固剂。胰化大豆硫酸镁琼脂平板KI培养基有上层和下层培养基。上层培养基成分有血消化汤、琼脂、硫代硫酸钠、硫酸亚铁铵、乳糖和酚红溶液。
锰盐营养琼脂(ManganeseNutrientAgar)是一种用于微生物培养的培养基,特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途:1.**成分**:通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中,硫酸锰的含量为0.0308g/L,蛋白胨为10.0g/L,牛肉粉为3.0g/L,氯化钠为5.0g/L,琼脂为15.0g/L。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验,也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂作为培养基的凝固剂;硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。需要注意的是,由于培养基中含有少量硫酸锰,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:通过接种质控菌株,如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。
酵母浸粉葡萄糖琼脂(YPDA)是一种常用的微生物培养基,尤其是在酵母菌的培养中。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和琼脂。具体配方为1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固体培养基,加入2%琼脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常调节在6.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。葡萄糖溶液灭菌后加入,以避免高温下可能发生的化学反应导致培养基成分变化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培养,也用于药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉,然后进行高压灭菌。灭菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**储存条件**:液体YPDA培养基可常温保存;琼脂YPDA平板在4℃可保存几个月。7.**微生物生长特征**:不同细菌在酵母浸粉葡萄糖琼脂培养基上的生长特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌则有黑色孢子。PYG培养基的干粉应在避光、干燥处保存,未开封的保质期通常为三年。使用后应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块 。
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
木糖明胶培养基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明胶、木糖、磷酸氢二钠和酚红等。胰化大豆硫酸镁琼脂平板
TGY肉汤培养基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一种用于微生物培养的培养基,特别适合于芽孢菌的培养。以下是它的一些主要特点和用途:1.**配方成分**:TGY肉汤培养基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和琼脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖作为碳源和能源,琼脂用于固化培养基。2.**pH值**:该培养基的pH值通常控制在7.0至7.5之间,为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:TGY肉汤培养基主要用于细菌的培养,特别是对于需要营养丰富环境的细菌,如芽孢杆菌属的细菌。它也适用于细菌总数的测定和微生物的增菌培养。4.**配制方法**:通常需要称取一定量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌。灭菌后,冷却至适当温度,分装于无菌容器中备用。5.**质量控制**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等,来验证培养基的性能。这些菌株在TGY肉汤培养基上应表现出良好的生长特性。6.**储存条件**:干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。制备好的培养基应避免光线直接照射,并保存于2-8℃。胰化大豆硫酸镁琼脂平板