TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
酚红葡萄糖肉汤(PhenolRedGlucoseBroth)是一种常用的微生物学培养基,主要用于鉴定细菌是否具有发酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酚红葡萄糖肉汤的配方包含月示胨(或称为蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持渗透压;酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌10-15分钟。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装试管,每管3ml。5.**质量控制**:接种蜡样芽孢杆菌后,在厌氧条件下35℃培养24小时,培养基由红色变为黄色,表明细菌发酵葡萄糖产酸。6.**用途**:酚红葡萄糖肉汤用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准),也用于检测大肠菌群。7.**结果观察**:如果培养基颜色由红色变为黄色,说明细菌发酵葡萄糖产酸;如果培养基颜色不变或红色加深,说明该微生物葡萄糖发酵阴性。8.**储存条件**:避光,密封,阴凉干燥处保存。NAP平板GAM肉汤培养基广泛应用于菌种的生长、保存和实验操作。它支持多种微生物的生长,并在菌种冷冻保存中。
细菌固体分离培养基是用于分离和培养细菌的固体培养基,通常包含琼脂作为凝固剂。这种培养基能够为细菌提供稳定的生长环境,并有助于观察微生物的菌落特征。以下是细菌固体分离培养基的一些关键特点:1.**成分**:细菌固体分离培养基通常包含蛋白质来源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、无机盐(如氯化钠)和琼脂等。2.**pH值**:培养基的pH值对细菌的生长至关重要,通常需要调节至适宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**灭菌**:培养基在制备过程中需要进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟。4.**用途**:主要用于细菌的分离、计数和鉴定。通过稀释倒平板法、涂布平板法或平板划线法等技术,可以从混合的微生物群体中分离出单一的细菌菌落。5.**保存**:培养基通常在室温、避光、干燥的条件下保存。6.**操作**:在无菌条件下操作,避免污染。使用时,将培养基加热至液态,然后倒入无菌培养皿中,冷却凝固后即可用于接种细菌。7.**菌落特征**:不同种类的细菌在固体培养基上形成的菌落具有特定的形态特征,如大小、形状、颜色、边缘等,这些特征可以用于细菌的鉴定。
改良R2A琼脂(ModifiedR2Amedium)是一种应用的低营养培养基,用于微生物的分离、计数和鉴定,特别是在水质检测中用于测定细菌总数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氢二钾-无水硫酸镁-酸钠-琼脂2.**pH值**:通常调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于纯化水中菌落总数的测定。-适用于EP(欧洲药典)、USP(美国药典)、ChP(中国药典)标准。4.**配制方法**:-称取适量的培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至适宜范围。-进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟。5.**保存条件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事项**:-在称量和操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。-使用后应立即旋紧瓶盖,防止吸潮。7.**应用**:-在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广的应用。8.**质控结果**:质控菌株接种后于30-35℃需氧培养48-120小时,用于评估培养基的性能。改良R2A琼脂因其营养丰富、操作简便和应用广,成为实验室中常用的培养基之一。KI培养基有上层和下层培养基。上层培养基成分有血消化汤、琼脂、硫代硫酸钠、硫酸亚铁铵、乳糖和酚红溶液。
胰蛋白酶大豆琼脂(TSA)是一种常用的微生物固体培养基,广泛应用于各种细菌的分离和培养。以下是TSA培养基的一些关键特点:1.**成分**:TSA培养基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone,15g/L)、大豆胨(Soytone,5g/L)、氯化钠(5g/L)和琼脂(15g/L),这些成分为细菌提供氮源、维生素、生长因子以及维持渗透压和凝固培养基。2.**pH值**:TSA培养基的pH值通常调节在7.3±0.2(25℃),以满足大多数细菌生长的需要。3.**用途**:TSA培养基适用于多种细菌的培养,包括非选择性增菌培养及用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验。4.**制备方法**:将TSA培养基的干粉加入到蒸馏水中,加热搅拌至完全溶解,通常分装到试管或平皿中,经过高压灭菌后备用。5.**保存条件**:未开封的TSA培养基通常在室温下避光保存,保质期可达三年。开封后应旋紧瓶盖,避免吸潮结块,并根据存放条件适当延长保存期。6.**注意事项**:在称量和操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。使用后应立即旋紧瓶盖,防止吸潮。粉尘可能引起呼吸道不适,操作时应佩戴口罩。7.**应用**:TSA培养基在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广泛应用。水琼脂培养基的凝胶结构在不同温度下可能会发生变化,因此需要根据微生物的特性调控培养温度。TPY琼脂平板
木醋杆菌的生长和纤维素的合成对pH值有一定的要求,通常在pH 5.0至6.8之间。TPY琼脂平板
SlantzandBartley培养基是一种专门设计用于分离和计数肠球菌的选择性培养基,广泛应用于水和食品样本中的肠球菌检测。以下是它的一些特点:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氢钾、叠氮钠和琼脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供细菌生长所需的营养物质,葡萄糖作为碳源,磷酸二氢钾作为缓冲剂,叠氮钠作为抑菌剂抑制革兰氏阴性菌的生长,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:叠氮钠对革兰氏阴性菌具有抑制作用,确保培养基的选择性。4.**应用**:开始设计用于通过膜过滤技术检测和计数肠球菌,但也证明作为直接涂布培养基同样有效。5.**配制方法**:通常称取41.5g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至沸腾以溶解琼脂,高压灭菌20分钟。灭菌后冷却至45-50°C,并分装进培养皿。6.**质量控制**:通过特定的质控菌株进行测试,确保培养基支持目标菌株的生长。例如,肠球菌ATCC29212在该培养基上应表现出良好的生长,而大肠杆菌ATCC25922则应被抑制。7.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在15-30°C的阴凉干燥处。配制好的培养基应保存在2-8°C。TPY琼脂平板