营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。琼脂培养基的制备: 将琼脂培养基中加入去氧胆酸盐等特定成分,以制备适合特定实验目的的培养基。艰难梭菌选择性琼脂预装培养皿
TYC培养基(TryptoneYeastCystineMedium)是一种用于分离口腔中链球菌(Streptococcusspp)的选择性培养基。除了用于分离血链球菌外,TYC培养基也可以用于制备变形链球菌(Streptococcusmutans)的分离培养基。这种培养基的配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亚硫酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等成分,琼脂作为凝固剂,pH值调整至7.3±0.2(25℃)。TYC培养基通过其成分提供了细菌生长所需的氮源、碳源、维生素和生长因子。其中,L-胱氨酸和亚硫酸钠有助于抑制某些非目标细菌的生长,而促进目标链球菌的生长。此外,TYC培养基也可以添加杆菌肽(0.2U/ml)以增加其选择性。在实验室中,TYC培养基通常按照以下方法配制:1.称取98.0g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中。2.加热煮沸至完全溶解。3.分装后,在121℃高压下灭菌15分钟。4.灭菌结束后摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。5.如有需要,培养基冷却至50~55℃时,可选择性添加过滤除菌的杆菌肽0.2U/ml以增加选择性。TYC培养基在微生物学研究和临床诊断中具有重要应用,特别是在口腔微生物的检测和研究中。艰难梭菌选择性琼脂预装培养皿EMB是Eosin Methylene Blue的缩写,这是一种含有两种染料的培养基。
细菌固体分离培养基是用于分离和培养细菌的固体培养基,通常包含琼脂作为凝固剂。这种培养基能够为细菌提供稳定的生长环境,并有助于观察微生物的菌落特征。以下是细菌固体分离培养基的一些关键特点:1.**成分**:细菌固体分离培养基通常包含蛋白质来源(如蛋白胨)、碳源(如葡萄糖)、无机盐(如氯化钠)和琼脂等。2.**pH值**:培养基的pH值对细菌的生长至关重要,通常需要调节至适宜的pH值,如7.3±0.1(25℃)。3.**灭菌**:培养基在制备过程中需要进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟。4.**用途**:主要用于细菌的分离、计数和鉴定。通过稀释倒平板法、涂布平板法或平板划线法等技术,可以从混合的微生物群体中分离出单一的细菌菌落。5.**保存**:培养基通常在室温、避光、干燥的条件下保存。6.**操作**:在无菌条件下操作,避免污染。使用时,将培养基加热至液态,然后倒入无菌培养皿中,冷却凝固后即可用于接种细菌。7.**菌落特征**:不同种类的细菌在固体培养基上形成的菌落具有特定的形态特征,如大小、形状、颜色、边缘等,这些特征可以用于细菌的鉴定。
SlantzandBartley培养基是一种专门设计用于分离和计数肠球菌的选择性培养基,广泛应用于水和食品样本中的肠球菌检测。以下是它的一些特点:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、磷酸二氢钾、叠氮钠和琼脂等成分。其中,胰蛋白胨和酵母提取物提供细菌生长所需的营养物质,葡萄糖作为碳源,磷酸二氢钾作为缓冲剂,叠氮钠作为抑菌剂抑制革兰氏阴性菌的生长,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25°C),为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:叠氮钠对革兰氏阴性菌具有抑制作用,确保培养基的选择性。4.**应用**:开始设计用于通过膜过滤技术检测和计数肠球菌,但也证明作为直接涂布培养基同样有效。5.**配制方法**:通常称取41.5g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至沸腾以溶解琼脂,高压灭菌20分钟。灭菌后冷却至45-50°C,并分装进培养皿。6.**质量控制**:通过特定的质控菌株进行测试,确保培养基支持目标菌株的生长。例如,肠球菌ATCC29212在该培养基上应表现出良好的生长,而大肠杆菌ATCC25922则应被抑制。7.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在15-30°C的阴凉干燥处。配制好的培养基应保存在2-8°C。改良Letheen琼脂培养基的配方根据具体的应用需求可能会有所不同。
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些主要特点和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化钠:5.0g/L-无水亚硫酸钠:3.0g/L-十二烷基硫酸钠:0.5g/L-猪胆粉:5.0g/L-利凡诺:0.03g/L-庆大霉素:500U/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-十二烷基硫酸钠、猪胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉培养基,加入1L蒸馏水或去离子水,加热煮沸充分溶解,冷却至50℃左右,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。4.**使用方法**:-从冷藏柜中取出平板皿,并恢复至室温。-将包装整体送入试验地点。-试验或接种。-将平板从洁净室取出,按规定的温度和时间倒置培养。-观察、计数。改良Letheen琼脂培养基通过优化和改良配方,提高了其在微生物检测和其他相关领域的应用效率和范围。艰难梭菌选择性琼脂预装培养皿
VRBA(Violet Red Bile Agar)是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定肠道细菌。艰难梭菌选择性琼脂预装培养皿
TGE肉汤(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉汤,是一种用于微生物培养的液体培养基。这种培养基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作为指示剂的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉汤(含TTC)的主要用途和特点如下:1.**用途**:TGE肉汤主要用于水、牛奶和乳制品中异养细菌的计数。它适用于细菌总数的测定,也可用于检测乳品中的耐热细菌。2.**成分**:典型的TGE肉汤配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子,葡萄糖作为可发酵的糖类提供能量。3.**pH值**:TGE肉汤的pH值通常调节在7.0±0.2(25℃)。4.**制备方法**:将TGE肉汤的干粉溶解在蒸馏水中,加热煮沸以帮助成分溶解,然后进行高压灭菌。5.**使用**:通常取一定量的培养基加热溶解于蒸馏水中,分装后进行高压灭菌,然后用于微生物的培养。6.**指示剂**:TTC作为指示剂,当细菌代谢时,TTC会被还原成红色的三苯基甲烷,从而便于观察细菌的生长情况。7.**保存条件**:未开封的TGE肉汤通常在室温下避光保存,开封后应旋紧瓶盖,避免吸潮结块,并根据存放条件适当延长保存期。