月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。VRBA培养基的主要成分包括琼脂、胆盐、溴青紫红(Violet Red Bile)、乳糖等。乙酰胺琼脂培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
乳糖发酵培养基(LactoseFermentBroth),也称为乳糖复发酵培养基,是一种用于微生物检测的培养基,主要用于测定大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其特点和相关信息:1.**用途**:用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定。2.**实验原理**:蛋白胨提供碳源和氮源以满足细菌生长的需求;乳糖作为大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性环境下呈黄色,碱性环境下呈紫色。3.**成分**:通常包含蛋白胨20.0g/L、乳糖10.0g/L、溴甲酚紫0.01g/L,pH值调节至7.4±0.1(25℃)。4.**使用方法**:称取培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟备用。5.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和阴沟肠杆菌ATCC23355,来验证培养基的选择性和生长促进效果。6.**细菌生长特征**:不同细菌在乳糖发酵培养基上的生长特征不同,例如大肠埃希氏菌通常会产生酸性环境,使得培养基颜色变为黄色,并可能产生气体。7.**储存和运输条件**:未开盖的乳糖发酵培养基的保质期通常为6个月,需要在4-10度的条件下保存,运输时应保持常温。
亚硒酸盐胱氨酸(SC)培养基是一种选择性增菌培养基,主要用于沙门氏菌的选择性增菌培养。以下是其特点介绍:1.**成分**:SC培养基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亚硒酸氢钠、磷酸氢二钠和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,亚硒酸氢钠用于抑制革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌,磷酸氢二钠作为缓冲剂,L-胱氨酸作为还原剂。2.**检验原理**:SC培养基的设计原理在于其成分能够满足沙门氏菌生长的需求,同时抑制其他非目标细菌的生长。3.**配制方法**:SC培养基的配制方法是称取23g干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热至完全溶解。配制过程中应避免高压灭菌,以免影响培养基的有效成分。4.**使用注意事项**:SC培养基比较好现配现用,或在4℃下短期保存。在室温下,尤其是夏季,培养基容易出现颜色变化,导致增菌效果减退。5.**颜色变化**:过分加热或反复加热会使培养基颜色变深,影响使用效果。因此,配制过程中只能轻微煮沸,并且要迅速用凉水冷却。6.**保存**:开封后的SC培养基比较好存放于2℃-8℃环境下,以延长使用时间。改良后的Letheen琼脂培养基不仅限于传统的应用,还可能拓展到食品微生物学、环境微生物学等领域。
大豆酪蛋白肉汤培养基(TrypticSoyBroth,TSB)是一种通用的微生物培养基,应用于细菌的培养,特别是在药品抑菌剂效力检测中用于细菌检测。以下是其特点介绍:1.**成分**:TSB培养基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氢二钾和氯化钠。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为碳源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。2.**pH值**:TSB培养基的pH值通常调整至7.3±0.2(25℃),适合多种微生物的生长。3.**用途**:TSB培养基适用于的细菌培养,包括需氧菌和厌氧菌。它特别用于消毒剂消毒效果的测试、蜡样芽孢杆菌的多管发酵法测定、溶血性链球菌选择性增菌培养等。4.**制备方法**:将TSB培养基粉末称量后溶解于蒸馏水或去离子水中,加热煮沸以帮助溶解,然后进行高压灭菌。5.**质量控制**:在使用TSB培养基时,应进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存。7.**有效期**:在适当的储存条件下,TSB培养基的有效期通常为三年
NAC琼脂培养皿具有较高的选择性,能够有效地抑制不同种类的微生物,有助于分离目标微生物。乙酰胺琼脂培养皿
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专为梭菌属(Clostridium)细菌设计的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐,这些成分提供碳源、氮源、维生素和生长因子,适合梭菌的生长需求。2.**pH值**:RCM培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,通过高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。乙酰胺琼脂培养皿