月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。NAC琼脂培养皿具有较高的选择性,能够有效地抑制不同种类的微生物,有助于分离目标微生物。厌氧菌琼脂平板
亚硒酸盐胱氨酸(SC)培养基是一种选择性增菌培养基,主要用于沙门氏菌的选择性增菌培养。以下是其特点介绍:1.**成分**:SC培养基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亚硒酸氢钠、磷酸氢二钠和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,亚硒酸氢钠用于抑制革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌,磷酸氢二钠作为缓冲剂,L-胱氨酸作为还原剂。2.**检验原理**:SC培养基的设计原理在于其成分能够满足沙门氏菌生长的需求,同时抑制其他非目标细菌的生长。3.**配制方法**:SC培养基的配制方法是称取23g干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热至完全溶解。配制过程中应避免高压灭菌,以免影响培养基的有效成分。4.**使用注意事项**:SC培养基比较好现配现用,或在4℃下短期保存。在室温下,尤其是夏季,培养基容易出现颜色变化,导致增菌效果减退。5.**颜色变化**:过分加热或反复加热会使培养基颜色变深,影响使用效果。因此,配制过程中只能轻微煮沸,并且要迅速用凉水冷却。6.**保存**:开封后的SC培养基比较好存放于2℃-8℃环境下,以延长使用时间。T1N1琼脂培养皿不同的菌落形态和颜色可以帮助鉴定革兰氏阴性肠道细菌的类型。
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)是一种用于微生物培养的弱选择性培养基,特别适用于分离肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的几个关键特点:1.**产品用途**:用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。2.**实验原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,在酸性条件下结合形成黑色沉淀。3.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲基蓝、曙红钠和琼脂,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。4.**试验方法**:将培养基粉末溶解在纯化水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。5.**微生物灵敏度试验**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征性反应。6.**菌落特征**:大肠埃希氏菌在EMB上生长时,菌落通常呈紫黑色,有金属光泽;而沙门氏菌等则为无色或琥珀色半透明菌落。7.**配置方法**:将成分溶解、过滤、灭菌后,加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃后加入曙红和亚甲基蓝溶液,倾注平板。这些特点使得EMB培养基在微生物学研究和临床诊断中具有重要应用。
胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)是一种用于选择性分离培养肠道致病菌,特别是沙门氏菌和志贺氏菌的培养基。以下是DHL培养基的一些主要特点:1.**用途**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,特别是沙门氏菌和志贺氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧胆酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸铁铵、中性红和琼脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**检验原理**:去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢产生,使菌落中心呈黑色;中性红作为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色。4.**用法**:称取65.2g培养基,加热溶解在1000ml蒸馏水中,待冷至60℃时倾入无菌平皿,无需高压灭菌。5.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和福氏志贺氏菌CMCC(B)51572,观察其生长率和特异性反应。6.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。根据菌落的颜色,进行初步的鉴定。这种培养基的选择性作用有助于分离肠道菌。
乳糖胆盐发酵培养基(LactoseBileFermentBroth)是一种用于微生物学检测的培养基,主要用于检测和分离大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其主要特点和用途:1.**成分**:通常包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐和溴甲酚紫等。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,牛胆盐用于抑制革兰氏阳性细菌的生长,溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**pH值**:一般调节至7.4±0.2(25℃)。3.**用途**:用于多管发酵法测定药品、食品、饮用矿泉水、一次性使用卫生用品中大肠菌群的存在。4.**检验原理**:大肠菌群能够发酵乳糖产生酸性物质,导致培养基颜色变化,并且可能产生气体。5.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品接种到培养基中,进行培养并观察结果。6.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,来验证培养基的选择性和生长促进效果。7.**储存条件**:通常需要在避光、干燥的环境中储存,并在用后立即旋紧瓶盖,以保持其稳定性。假单胞菌分离琼脂培养皿在生物学和微生物学研究中应用,用于分离和纯化假单胞菌。卵黄琼脂培养皿
胰蛋白胨琼脂培养皿可以根据微生物的形态、生长速率、菌落颜色等特征进行初步鉴定。厌氧菌琼脂平板
pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。厌氧菌琼脂平板