四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)基础是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性增菌培养。它遵循中国药典(ChP)标准。**成分**:该培养基的主要成分包括蛋白胨、牛胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠。其中,蛋白胨提供碳源、氮源和维生素以满足细菌生长的需求;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌,而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;牛胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其他革兰氏阳性细菌。**pH值**:培养基的pH值通常调节至8.4±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨提供细菌生长所需的营养;碳酸钙中和细菌代谢产生的酸;硫代硫酸钠在培养基中与碘和碘化钾反应形成四硫磺酸钠,抑制非目标菌;牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌。**用法**:称取培养基46.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟。临用前,每1000ml培养基中加入碘试液20ml和亮绿试液10ml,混匀后分装备用。**添加剂**:每瓶培养基需配套添加碘液和0.1%煌绿水溶液。碘试液由碘6g与碘化钾5g加水20ml溶解制成。亮绿试液由亮绿0.1g加水100ml溶解制成。使用VRBA培养皿时,通常将待测样品涂布在培养皿表面,然后进行培养,观察并鉴定产生的菌落。桔汁琼脂平板
0.5%葡萄糖肉汤培养基是一种专门用于微生物培养的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:培养基中含有蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和牛肉浸粉等成分,其中蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和氨基酸,氯化钠维持渗透压,葡萄糖提供碳源。2.**pH值**:pH值控制在7.2±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于硫酸链霉素等抗生物质的无菌检查,也用于消毒效果生物监测评价中指示菌的培养。4.**制备方法**:称取23.0g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃高压下灭菌15分钟,备用。5.**贮存条件**:需要防潮、避光、阴凉处保存。6.**微生物灵敏度试验**:通过接种质控菌株,如枯草杆菌黑色变种芽孢,进行生长情况的观察,以确保培养基的适用性。7.**质量标准**:遵循中国药典2020版、USP、EP等标准。8.**包装规格**:市面上有多种规格的0.5%葡萄糖肉汤培养基产品,如250g/瓶。9.**注意事项**:在配制和使用过程中,需要保证器材洁净,穿着实验服并戴一次性手套,以确保实验的安全性和准确性。这些特点使得0.5%葡萄糖肉汤培养基在药品检测和微生物学研究中具有重要应用。改良Letheen琼脂培养皿马铃薯浸出液琼脂培养皿可以更好地维持微生物的多样性,有利于保留微生物的天然群落结构。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。
营养琼脂培养基是一种常用的微生物培养基,具有以下特点:1.**成分丰富**:由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和琼脂等成分组成,为微生物提供氮源、碳源、维生素、氨基酸和其他生长因子。2.**pH值适宜**:pH值通常控制在7.0-7.4之间,适合大多数细菌和部分菌的生长。3.**凝胶性质**:含有琼脂作为凝固剂,使得培养基在冷却后形成凝胶状,便于微生物在表面形成菌落。4.**用途广**:适用于多种微生物的培养、分离和鉴定,包括细菌、酵母和霉菌。5.**易于操作**:琼脂培养基易于倒板和制备平板,适合实验室常规使用。6.**稳定性好**:在适当的储存条件下,营养琼脂培养基可以长时间保持其性能。7.**观察方便**:菌落形成在琼脂表面,便于观察和计数,也方便进行菌落挑选和纯化。8.**无菌操作**:在制备和使用过程中需要严格的无菌操作,以避免污染。9.**质量控制**:培养基的质量通过检验原理和微生物灵敏度试验进行控制,确保其稳定性和有效性。10.**执行标准**:营养琼脂培养基的制备和使用遵循相关标准,如GB4789.28-2013《中华人民共和国食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》等。VRBA培养基对于革兰氏阴性菌,尤其是肠道细菌,具有较强的选择性。
叶酸测定培养基是一种专门用于测定食品中叶酸含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:该培养基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作为氮源和碳源,乙酸钠作为选择剂和能量物质,以及氯化钠、硫酸锰等盐离子和多种维生素成分,为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值调节至6.8±0.2,以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于食品中叶酸的微生物测定,如GB5009.211-2022《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》中所述。4.**制备方法**:通常将干粉培养基与蒸馏水或去离子水混合,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管中,每管5ml,加入标准品或测试样品,用无菌蒸馏水或去离子水调整体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株(如鼠李糖乳杆菌ATCC7469)接种待测试培养基,在36±1℃下培养20-40小时,观察生长情况,如肉汤混浊和试管呈梯度浑浊。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应遵循无菌操作,避免污染,确保水的洁净程度,因为水中的叶酸残留或容器的污染直接影响试验结果。琼脂培养基的制备: 将琼脂培养基中加入去氧胆酸盐等特定成分,以制备适合特定实验目的的培养基。普通琼脂平板
结晶紫中性红胆盐琼脂培养皿是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定革兰氏阴性肠道细菌。桔汁琼脂平板
品红亚硫酸钠液体培养基(EndoAgar),也称为远藤琼脂培养基,是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于饮用水和水源中总大肠菌群的选择性分离和确证,符合GB(中国国家标准)的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氢二钾:3.5g-乳糖:10.0g-琼脂:13.0g-碱性品红:1.0g-亚硫酸钠:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和矿物质。-乳糖作为可发酵的糖类,用于检测细菌的乳糖发酵能力。-亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色。-发酵乳糖的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落。-快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明菌落。**使用方法**:-称取本品52.5g,加入20mL无水乙醇和980mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热搅拌溶解。-按需分装,116℃高压灭菌20分钟,备用。-质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成。-取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中。-将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱,于36±1℃需氧培养24±2小时,观察实验结果。桔汁琼脂平板