月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。DC培养基主要用于分离大肠杆菌等肠道革兰氏阴性细菌,因为这些细菌对去氧胆酸盐的敏感性较低。YM琼脂预装培养皿
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MAC)是一种具有中等选择性的培养基,主要用于分离和鉴定革兰氏阴性杆菌,尤其是肠道致病菌。以下是它的一些特点和用途:1.**成分**:麦康凯琼脂培养基的主要成分包括蛋白胨、胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐)、氯化钠、琼脂、乳糖、结晶紫和中性红。这些成分共同作用,为细菌提供生长所需的营养,同时具有选择性和鉴别性。2.**选择性**:胆盐和结晶紫的添加可以抑制革兰氏阳性菌的生长,而促进某些革兰氏阴性菌(如大肠杆菌和沙门氏菌)的生长。3.**鉴别性**:乳糖作为可发酵的糖类,与中性红结合,可以区分发酵乳糖和不发酵乳糖的细菌。发酵乳糖的细菌会产生酸性环境,使中性红从无色变为红色,从而形成特征性的菌落颜色。4.**菌落特征**:在麦康凯琼脂培养基上,大肠杆菌通常形成红色或粉红色的菌落,而沙门氏菌和志贺氏菌则形成无色或淡色的菌落。5.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于粪便、分泌物中肠道致病菌及肠球菌的分离培养,也用于检测或验证水、乳品和其他材料中的大肠菌群滴度。改良BPLS琼脂平板在临床实验室中,BHI Agar常用于从患者样本(如血液、尿液、脑脊液等)中分离和培养病原微生物。
胆盐乳糖培养基(BL)是一种专门用于增菌培养的微生物培养基,它具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐和去氧胆酸钠作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:通常调节至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品处理后加入培养基中,放入恒温培养箱内培养18至24小时,必要时可延长至48小时,观察结果。5.**应用**:胆盐乳糖培养基也用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,可以快速检测乳品中的大肠菌群。6.**选择性**:胆盐的存在使得培养基能够选择性地促进革兰氏阴性菌的生长,抑制革兰氏阳性菌的生长,这使得BL培养基在分离和鉴定肠道细菌中非常有用。7.**检测乳糖发酵能力**:由于含有乳糖,该培养基能够用于检测细菌的乳糖发酵能力,革兰氏阴性细菌如大肠杆菌等通常能够将乳糖发酵产生酸或气体。
品红亚硫酸钠液体培养基(EndoAgar),也称为远藤琼脂培养基,是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于饮用水和水源中总大肠菌群的选择性分离和确证,符合GB(中国国家标准)的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氢二钾:3.5g-乳糖:10.0g-琼脂:13.0g-碱性品红:1.0g-亚硫酸钠:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和矿物质。-乳糖作为可发酵的糖类,用于检测细菌的乳糖发酵能力。-亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色。-发酵乳糖的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落。-快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明菌落。**使用方法**:-称取本品52.5g,加入20mL无水乙醇和980mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热搅拌溶解。-按需分装,116℃高压灭菌20分钟,备用。-质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成。-取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中。-将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱,于36±1℃需氧培养24±2小时,观察实验结果。胰蛋白胨琼脂培养皿是微生物学领域中常用的一种实验工具,其在分离、培养和鉴定微生物方面发挥着重要作用。
伊红美蓝琼脂(EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于大肠杆菌和其他肠杆菌科细菌的分离和鉴别。以下是伊红美蓝琼脂的特点介绍:1.**成分**:伊红美蓝琼脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、琼脂、伊红Y溶液和美蓝溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作为可发酵的糖类,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,而伊红和美蓝则作为pH指示剂。2.**pH值**:伊红美蓝琼脂的pH值为7.1,适合多数肠道细菌的生长。3.**制法**:首先将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH值后进行高压灭菌。使用前加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50-55℃时加入伊红和美蓝溶液,摇匀后倾注平板。4.**用途**:主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别。大肠杆菌在该培养基上分解乳糖产酸,菌落呈深紫色并带有金属光泽;而产气肠杆菌则可能呈现棕色,很少有金属光泽。5.**保存**:伊红美蓝琼脂应在4℃至8℃的条件下保存,避免冻结,以保持其有效性。6.**有效期**:在适当的贮存条件下,伊红美蓝琼脂的有效期通常为三个月。
EMB培养皿是用于培养和检测肠道革兰氏阴性杆菌的一种特殊培养基。YM琼脂预装培养皿
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MacC培养基)是一种用于微生物学研究和临床诊断中分离和识别肠道细菌的培养基,具有以下特点:1.**选择性培养**:利用胆盐抑制革兰氏阳性细菌的生长,同时促进革兰氏阴性细菌,特别是大肠杆菌的生长。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、中性红和琼脂。其中乳糖作为可发酵的糖类,中性红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。4.**菌落特征**:大肠杆菌在MacC培养基上生长时,由于发酵乳糖产酸,菌落周围会出现胆盐沉淀的浑浊圈,并且菌落本身可能呈现粉红色。5.**检验原理**:通过乳糖发酵和中性红的颜色变化,可以将分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开。6.**制备方法**:通常需要将培养基粉末溶解在蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。7.**微生物灵敏度试验**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的适用性。8.**应用**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,如大肠埃希氏菌和志贺氏菌等。9.**注意事项**:在制备和使用过程中,需要做好防护措施,确保无菌操作。YM琼脂预装培养皿