麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MAC)是一种具有中等选择性的培养基,主要用于分离和鉴定革兰氏阴性杆菌,尤其是肠道致病菌。以下是它的一些特点和用途:1.**成分**:麦康凯琼脂培养基的主要成分包括蛋白胨、胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐)、氯化钠、琼脂、乳糖、结晶紫和中性红。这些成分共同作用,为细菌提供生长所需的营养,同时具有选择性和鉴别性。2.**选择性**:胆盐和结晶紫的添加可以抑制革兰氏阳性菌的生长,而促进某些革兰氏阴性菌(如大肠杆菌和沙门氏菌)的生长。3.**鉴别性**:乳糖作为可发酵的糖类,与中性红结合,可以区分发酵乳糖和不发酵乳糖的细菌。发酵乳糖的细菌会产生酸性环境,使中性红从无色变为红色,从而形成特征性的菌落颜色。4.**菌落特征**:在麦康凯琼脂培养基上,大肠杆菌通常形成红色或粉红色的菌落,而沙门氏菌和志贺氏菌则形成无色或淡色的菌落。5.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于粪便、分泌物中肠道致病菌及肠球菌的分离培养,也用于检测或验证水、乳品和其他材料中的大肠菌群滴度。VRBA培养基对于革兰氏阴性菌,尤其是肠道细菌,具有较强的选择性。亚硫酸铋琼脂培养皿
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。TOS丙酸盐琼脂预装培养皿改良Letheen琼脂培养基的配方进行了调整,以适应更多的微生物生长需求。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。
Endo培养基,也称为远藤氏琼脂或EndoAgar,是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于大肠菌群的检测。以下是Endo培养基的一些基本信息:**配方**:Endo培养基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、亚硫酸钠和碱性品红等成分,以及作为凝固剂的琼脂。具体的配方比例可能根据不同的供应商有所变化。**pH值**:培养基的pH值通常调节至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培养基用于大肠菌群的检测,特别是在水质检测中,如生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群。**使用方法**:通常称取适量的培养基粉末,加入指定量的蒸馏水或去离子水中,并添加无水乙醇,然后进行高压灭菌。灭菌结束后,将培养基摇匀以防琼脂沉积,备用。**培养基特性**:Endo培养基中的亚硫酸钠和品红对革兰氏阳性菌有弱抑制作用。乳糖发酵型大肠杆菌和大肠菌群在该培养基上产生乙醛和酸,乙醛与亚硫酸品红化合物反应,释放出品红,使菌落和周围培养基变红色。对于大肠杆菌,该反应可能过于强烈,使得品红结晶析出,给予菌落长久性的金色金属光泽。**储存条件**:Endo培养基通常需要在密封、阴凉干燥处保存,避免摄入、呼入和皮肤接触。胰蛋白胨琼脂培养皿可以根据微生物的形态、生长速率、菌落颜色等特征进行初步鉴定。
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。结晶紫中性红胆盐琼脂培养皿是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定革兰氏阴性肠道细菌。AN厌氧琼脂培养皿
VRBA也被用于监测食品和水的卫生质量,以及在临床微生物学实验室中进行一些肠道细菌的鉴定工作。亚硫酸铋琼脂培养皿
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。亚硫酸铋琼脂培养皿