月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。大肠杆菌产酸,因此在EMB上形成带有金属光环的典型颜色,而其他非产酸菌则显示不同的表现。Letheen琼脂平板
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基(CetrimideAgarMedium)是一种专门用于分离和培养铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的选择性培养基,具有以下特点:1.**选择性培养原理**:培养基中的溴化十六烷基三甲铵(Cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂,对多种革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌具有抑制作用,而铜绿假单胞菌对其具有一定耐受性,因此能够在这种培养基中生长。2.**营养成分**:明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供所需的碳、氮源、维生素和生长因子。3.**无机盐作用**:氯化镁和硫酸钾的添加可以促进绿脓菌素的产生,并帮助维持培养基的渗透压。4.**色素生成**:铜绿假单胞菌在该培养基中生长时,会产生两种水溶性色素——黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素,使菌落呈现特征性的黄绿色。5.**应用范围**:广泛应用于药品、化妆品、食品、饮用水和医院环境样品中铜绿假单胞菌的检测和分离。6.**使用方法**:通常按照培养基包装上的说明进行配制,121℃高压灭菌后,冷却至适当温度倒平板使用。7.**质量控制**:使用标准菌株进行灵敏度测试,确保培养基的选择性和培养效果,如铜绿假单胞菌ATCC9027在培养基上应表现为灰白色,扁平,湿润菌落。BCYE鉴别琼脂培养皿对乙酰胺琼脂培养皿(Tryptone Soya Agar plate,简称TSA培养皿)是一种常用的微生物培养基。
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。
pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。将纯培养的菌株涂布在TSA板上,培养至单一菌落后,将培养皿密封保存在4℃或-80℃的环境中。
胆盐乳糖培养基(BileLactoseBroth,简称BL培养基)是一种在微生物检测中用于增菌培养的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾,其中蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钾和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。4.**使用方法**:将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,加热溶解后分装,121℃高压灭菌15分钟,待冷至常温后备用。5.**质量控制**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌等,观察其生长情况和特征性反应,以确保培养基的适用性。6.**应用**:除了用于药品检测,还用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,提高检出率。7.**相关产品**:胆盐乳糖培养基与其他用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌检验的培养基一同使用,如曙红亚甲基蓝琼脂培养基(EMB)、4-甲基伞形酮糖苷酸培养基(MUG培养基)等。
TTC的显色作用可以使大肠埃希菌等产生红色的菌落。Letheen琼脂平板
三糖铁琼脂培养基(TSI)是一种生化培养基,用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选,其特点如下:1.**用途**:TSI培养基用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、葡萄糖、蔗糖、酚红、硫酸亚铁铵、硫代硫酸钠和琼脂,pH值控制在7.4±0.1(25℃)。3.**检验原理**:乳糖、葡萄糖和蔗糖作为可发酵糖类,其发酵产酸时通过酚红指示剂测出,酸性呈黄色,碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢,与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁沉淀;氯化钠维持渗透压;琼脂作为凝固剂。4.**应用**:TSI培养基特别适用于沙门氏菌等肠道致病菌的分离鉴定,通过观察细菌在培养基中的生长情况、颜色变化和硫化氢产生等特征进行鉴定。5.**使用方法**:称取培养基64.5g,溶解于1000ml蒸馏水中,加热煮沸1分钟,分装于试管,121℃高压灭菌15分钟制成高层斜面。6.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如大肠埃希氏菌和乙型副伤寒沙门氏菌,观察其生长情况和特征性反应。7.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。Letheen琼脂平板