月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。EMB培养基的两种染料是:1.艾奥辛(Eosin);2.亚甲蓝(Methylene Blue)。尿素琼脂(pH7.2)培养皿
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基(CetrimideAgarMedium)是一种专门用于分离和培养铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的选择性培养基,具有以下特点:1.**选择性培养原理**:培养基中的溴化十六烷基三甲铵(Cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂,对多种革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌具有抑制作用,而铜绿假单胞菌对其具有一定耐受性,因此能够在这种培养基中生长。2.**营养成分**:明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供所需的碳、氮源、维生素和生长因子。3.**无机盐作用**:氯化镁和硫酸钾的添加可以促进绿脓菌素的产生,并帮助维持培养基的渗透压。4.**色素生成**:铜绿假单胞菌在该培养基中生长时,会产生两种水溶性色素——黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素,使菌落呈现特征性的黄绿色。5.**应用范围**:广泛应用于药品、化妆品、食品、饮用水和医院环境样品中铜绿假单胞菌的检测和分离。6.**使用方法**:通常按照培养基包装上的说明进行配制,121℃高压灭菌后,冷却至适当温度倒平板使用。7.**质量控制**:使用标准菌株进行灵敏度测试,确保培养基的选择性和培养效果,如铜绿假单胞菌ATCC9027在培养基上应表现为灰白色,扁平,湿润菌落。SPS培养皿不同的菌落形态和颜色可以帮助鉴定革兰氏阴性肠道细菌的类型。
0.5%葡萄糖肉汤培养基是一种专门用于微生物培养的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:培养基中含有蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和牛肉浸粉等成分,其中蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和氨基酸,氯化钠维持渗透压,葡萄糖提供碳源。2.**pH值**:pH值控制在7.2±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于硫酸链霉素等抗生物质的无菌检查,也用于消毒效果生物监测评价中指示菌的培养。4.**制备方法**:称取23.0g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃高压下灭菌15分钟,备用。5.**贮存条件**:需要防潮、避光、阴凉处保存。6.**微生物灵敏度试验**:通过接种质控菌株,如枯草杆菌黑色变种芽孢,进行生长情况的观察,以确保培养基的适用性。7.**质量标准**:遵循中国药典2020版、USP、EP等标准。8.**包装规格**:市面上有多种规格的0.5%葡萄糖肉汤培养基产品,如250g/瓶。9.**注意事项**:在配制和使用过程中,需要保证器材洁净,穿着实验服并戴一次性手套,以确保实验的安全性和准确性。这些特点使得0.5%葡萄糖肉汤培养基在药品检测和微生物学研究中具有重要应用。
pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。NAC琼脂培养皿具有较高的选择性,能够有效地抑制不同种类的微生物,有助于分离目标微生物。
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基是一种专门用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培养基,具有以下特点:1.**荧光检测**:MUG作为荧光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后产生蓝色荧光终产物,可通过紫外线监测。2.**应用广**:MUG培养基用于荧光检测大鼠体内的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表达,也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表达进行荧光检测。3.**产品特性**:MUG具有纯度≥99%,熔点102°C,分子量为352.29(无水基础),在冷冻(-20℃)条件下储存。4.**培养基配方**:包含蛋白胨、磷酸盐缓冲系统、硫酸锰、亚硫酸钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、氯化钠、氯化钙和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步骤**:包括称取培养基粉末溶解、分装、灭菌、接种质控菌液、培养和观察有无荧光等步骤。6.**试验现象**:接种大肠埃希氏菌等质控菌株,在30-35℃培养后,通过366nm紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。7.**安全性**:操作MUG时应穿实验服并戴一次性手套,以确保安全。8.**应用示例**:包括细菌培养物的荧光检测和转基因植物GUS基因的表达测定。9.**储存与运输**:MUG培养基应-20℃干燥保存,有效期2年,运输时使用冰袋。"去氧胆酸盐琼脂培养皿"(Deoxycholate Agar Plate)是一种用于微生物学实验室中细菌分离和鉴定的培养基。VRBA培养皿
胰蛋白胨提供了微生物生长所需的营养物质,琼脂则起到固体化培养基的作用。尿素琼脂(pH7.2)培养皿
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MacC培养基)是一种用于微生物学研究和临床诊断中分离和识别肠道细菌的培养基,具有以下特点:1.**选择性培养**:利用胆盐抑制革兰氏阳性细菌的生长,同时促进革兰氏阴性细菌,特别是大肠杆菌的生长。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、中性红和琼脂。其中乳糖作为可发酵的糖类,中性红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。4.**菌落特征**:大肠杆菌在MacC培养基上生长时,由于发酵乳糖产酸,菌落周围会出现胆盐沉淀的浑浊圈,并且菌落本身可能呈现粉红色。5.**检验原理**:通过乳糖发酵和中性红的颜色变化,可以将分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开。6.**制备方法**:通常需要将培养基粉末溶解在蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。7.**微生物灵敏度试验**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的适用性。8.**应用**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,如大肠埃希氏菌和志贺氏菌等。9.**注意事项**:在制备和使用过程中,需要做好防护措施,确保无菌操作。尿素琼脂(pH7.2)培养皿