培养皿的清洁:1.浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。2.刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。3.浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用清理器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。4.冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗的干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,然后用重蒸水洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。5.一次性使用的塑料培养皿一般出厂时就已射线灭菌或者化学灭菌。三糖铁琼脂试验的结果可以反映出细菌对三种糖的代谢方式和其铁素营养。淀粉硫酸铵琼脂预装培养皿
LA培养皿是一种常用的微生物培养基,全称为LuriaAgar培养基。它是由SalvadorLuria和GiuseppeBertani于20世纪40年代发展和改进的,用于培养大肠杆菌(Escherichiacoli)等革兰阴性菌。LA培养皿的成分和LB培养基类似,包括:蛋白胨:提供氨基酸、多肽和其他营养物质。酵母提取物:提供维生素、核酸和其他生长因子。氯化钠(NaCl):提供适当的离子浓度和渗透压。加入琼脂糖(agar)可以固化成为培养皿。与LB培养基不同的是,LA培养皿中的琼脂糖和营养物质的浓度通常较LB培养基更高,以促进菌落的生长和形成。因此,LA培养皿常用于细菌菌落计数、分离纯化菌落以及筛选含有特定基因的菌落等需要较大菌落的实验。需要注意的是,LA培养皿对于某些特定的细菌株可能不适用或需要进行适当的改进。在使用LA培养皿时,应根据实验目的和细菌的特性选择合适的培养基和条件。同时,在培养细菌前,应严格遵守无菌操作规范,以避免外源细菌的污染。TBA平板溴甲酚紫琼脂(也称为溴甲酚紫琼脂培养基)是一种微生物学培养基,通常用于分离和培养细菌。
乙酰胺琼脂(AcetamideAgar)是一种微生物培养基,常用于选择性和差异性培养大肠杆菌(Escherichiacoli)。乙酰胺琼脂的主要成分包括乙酰胺、琼脂和其他营养物质。乙酰胺是一种碳源,提供了大肠杆菌生长所需的能量和营养物质。琼脂是一种固体基质,使得细菌可以在琼脂表面形成菌落,方便观察和鉴定。乙酰胺琼脂的特殊之处在于它的选择性。通过在培养基中添加乙酰胺,乙酰胺琼脂可以抑制非大肠杆菌的生长,从而选择性地促进大肠杆菌的生长。这是因为大肠杆菌具有特殊的代谢途径,可以利用乙酰胺作为碳源进行生长,而其他菌株则无法利用乙酰胺。除了选择性作用,乙酰胺琼脂还可以通过其他特定的指示剂或试剂,如溴溴酚蓝(BromothymolBlue)和甲基红(MethylRed),进行差异性鉴定。这些指示剂可以根据大肠杆菌产生的酸碱度变化和代谢产物的形成,观察培养基的颜色变化或指示剂的反应,从而进行初步的鉴定。需要注意的是,乙酰胺琼脂是一种常规的培养基,适用于大肠杆菌的生长。然而,对于一些特殊的菌株,可能需要调整培养条件和添加其他特定的试剂或营养物质。因此,在使用乙酰胺琼脂时,需要根据具体的实验需求和菌株的特性进行调整和优化。
玫瑰红钠琼脂是一种常用的指示剂,常用于琼脂糖培养基中,以增加培养基的可见性和可区分性。它的化学名是2,3,5-三苯基四氢-1H-吡唑-1-酮-5-磺酸钠(RoseBengalsodiumsalt)。玫瑰红钠琼脂可呈现鲜艳的红色或粉红色,当被微生物染色时,可以对某些细菌和产生特定的反应。在某些培养基中添加玫瑰红钠琼脂,可以帮助鉴别不同的微生物群落和菌株。玫瑰红钠琼脂在微生物学实验中常被用作一种选择性指示剂。例如,在培养含有玫瑰红钠琼脂的琼脂糖培养基上,可以抑制细菌的生长,而某些菌株则能够生长并产生抑制细菌的特定代谢产物。这样,可以通过观察培养基上的菌落形态和颜色来区分不同的微生物。需要注意的是,玫瑰红钠琼脂的使用应根据具体实验的需要和目的进行调整和优化,遵守相应的实验操作规范和安全措施。CVT琼脂培养基(Crystal Violet Tetrazolium Chloride Agar Medium)用于乳及乳制品中嗜低温细菌总数的测定。
EMB是伊红美蓝琼脂(EosinMethyleneBlueAgar)的缩写。伊红美蓝琼脂是一种微生物培养基,常用于分离和鉴定肠道细菌,特别是大肠杆菌和其他革兰阴性菌。EMB培养基的主要成分包括水解酪蛋白、葡萄糖、伊红染色剂和美蓝染色剂。通过这些成分的作用,EMB培养基可以区分肠道细菌的发酵能力和产酸性,从而鉴定大肠杆菌等肠道细菌。在EMB培养基上,大肠杆菌等产酸性菌落会呈现出金属光泽的特征,而其他非肠道细菌则不会产生这种颜色反应。此外,EMB培养基还可以区分肠道细菌的产气性能力,产气菌落在琼脂中发酵产生气体,导致培养基表面显示出环形凹陷。EMB培养基在微生物学实验室中广泛应用,尤其是用于分离和鉴定肠道细菌,特别是大肠杆菌的筛选和定量。它也常用于监测食品和水样中的肠道细菌污染。需要注意的是,具体的EMB培养基配方和使用条件可能会根据实验需求和样品类型进行调整和优化。在使用EMB培养基时,应根据具体的研究目的和样品类型选择合适的培养基和条件,并遵守无菌操作规范,以避免外源微生物的污染。铁盐可以促进黑色素的生成,从而使得肠道杆菌科细菌在培养基上呈现出黑色。葡萄糖铵琼脂预装培养皿
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胆盐氯酚红亮绿琼脂(BileSaltChlorophenolRedBrilliantGreenAgar)是一种用于检测肠道杆菌科细菌(Enterobacteriaceae)的琼脂培养基。它主要用于选择性富集和鉴别肠道杆菌科细菌,特别是肠道致病菌。胆盐氯酚红亮绿琼脂的配方主要包括以下成分:1.琼脂:用于固化培养基,使其成为固体状态方便细菌的生长。2.胆盐:作为选择性抑制剂,抑制非肠道杆菌科细菌的生长。3.氯酚红和亮绿:作为指示剂,用于检测细菌对碱性条件的耐受性。4.其他辅助成分:如盐类、维生素等,用于提供细菌生长所需的营养物质。使用胆盐氯酚红亮绿琼脂进行培养时,可以将待测的肠道杆菌科细菌样品涂布在琼脂表面。胆盐的存在会抑制非肠道杆菌科细菌的生长,从而选择性富集肠道杆菌科细菌。同时,氯酚红和亮绿作为指示剂,用于检测细菌对碱性条件的耐受性。如果细菌能够生长并产生酸性代谢产物,琼脂的颜色会发生变化。胆盐氯酚红亮绿琼脂是一种常用的琼脂培养基,用于选择性富集和鉴别肠道杆菌科细菌。通过观察细菌在琼脂上的生长和琼脂表面的颜色变化,可以初步鉴定细菌的代谢特性和分类。然而,需要注意的是,细菌的鉴定通常需要进一步的确认试验和鉴定方法。淀粉硫酸铵琼脂预装培养皿