ELISA即酶联免疫吸附测定,ELISA试剂盒是基于这一原理开发的检测工具。其原理是抗原与抗体的特异性结合。在试剂盒中,固相载体(通常为微孔板)预先包被有特异性抗体或抗原。当含有目标抗原或抗体的样本加入后,会与预包被的物质发生特异性结合。然后加入酶标记的二抗或抗原,再次特异性结合形成复合物。加入底物,酶催化底物发生显色反应,通过检测吸光度值来确定样本中目标物质的含量。这种原理使得ELISA试剂盒具有高度特异性和敏感性,能在复杂的生物样本如血清、血浆、组织匀浆等中准确检测微量的目标分子。上海伊丽萨生物科技代理进口ELISA试剂盒,助力科研探索。广东综合ELISA试剂盒电话多少
操作方法:双抗体夹心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。专注ELISA试剂盒厂家价格比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
在自身免疫性疾病的诊断中,ELISA试剂盒同样具有重要意义。例如类风湿关节炎,患者体内会产生针对自身关节组织的抗体,如类风湿因子(RF)。ELISA试剂盒可用于检测血清中的RF水平。微孔板上固定有抗RF抗体,患者样本中的RF与之结合,再通过后续的酶标记和底物反应步骤进行检测。系统性红斑狼疮(SLE)也是一种常见的自身免疫性疾病,可通过ELISA试剂盒检测抗核抗体(ANA)等相关自身抗体。这些检测有助于医生准确诊断自身免疫性疾病,评估疾病的活动程度,为制定个性化的治疗方案提供依据。
将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗体,这些抗体就会与HEV的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与***次孵育结合上的HEVIgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEVIgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长:450nm处测量O.D.值,按照本HEVIgM抗体elisa试剂盒的测试标准,O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。上海伊丽萨生物科技,为进口ELISA试剂盒提供代理服务。
ELISA试剂盒的保存条件对于其性能至关重要。一般来说,试剂盒应保存在低温环境下,通常是2-8°C。这个温度范围有助于保持试剂的稳定性,特别是酶标记物、抗体等活性成分。对于一些特殊的ELISA试剂盒,可能还需要避光保存,因为光照可能会影响某些试剂的活性。此外,试剂盒中的不同组分可能有不同的保存期限,例如,酶结合物可能保存期限较短,而包被好的微孔板在合适的条件下可能保存时间相对较长。严格按照试剂盒的保存条件进行保存,可以延长试剂盒的使用寿命,确保检测结果的可靠性。上海伊丽萨生物科技代理进口ELISA试剂盒,助力科研创新。广东综合ELISA试剂盒电话多少
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在自身免疫性疾病的诊断中,ELISA试剂盒不可或缺。以类风湿关节炎(RA)为例,该疾病患者体内会产生针对自身关节组织的抗体,如类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)抗体。ELISA试剂盒能够精确地检测血清中的这些抗体。系统性红斑狼疮(SLE)患者体内存在多种自身抗体,如抗核抗体(ANA)等,通过ELISA试剂盒可以对这些抗体进行定量检测。这有助于医生准确判断疾病的活动程度,因为抗体水平往往与疾病的严重程度相关。对于干燥综合征,ELISA试剂盒可检测抗SS-A和抗SS-B抗体等标志物。这些检测结果为自身免疫性疾病的早期诊断、病情监测和治疗方案的调整提供了关键依据。广东综合ELISA试剂盒电话多少