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代谢组学的研究对象大都是相对分子量在1000以内的小分子物质，因此常用的血液样本在取样后，应小心操作，防止溶血，尽快分离出血清，分置于温环境下保存。由于用于理实验的动物采集相对其他样品的采集，操作更繁琐，在处理过程中许多细节容易忽略，造成数据不完美（甚至不能用）。因此接下来将重点介绍样品采集的注意事项及其固定。样品采集注意事项应新鲜，操作时间尽可能短，否则细胞发生死后变化、自融及现象。是动物心脏还在跳动时采集，样本取出后在5分钟以内置于固定液内，避免长时间暴露在空气环境中。块尽量小而薄。块的厚度以不超过5mm为宜，较为理想的厚度为2mm左右，主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入块内部。勿使块受挤压。在采集过程中，应尽量选择较为锋利的手术，如手术刀片等，避免操作过程中挤压挫伤标本。挤压过的均不可用。固定液的量一般以块大小的20倍为宜，能够在容器内自由移动。尽量保持的原有形态。新鲜经固定后，或多或少产生收缩现象（如胃肠），为此可将展平，以尽可能维持原形。保持清洁。块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗，然后再入固定液，但要注意防止损伤。要熟悉采集部位。要能准确的按解剖部位采集。随着科技的不断进步，科研人员将能够开发出更为精确、实用的动物模型，更好地为人类健康保驾护航。江苏疾病模型科研技术服务分离

原理以慢病毒包装为例，主要包括3个质粒：质粒DNA可以转录出慢病毒遗传物质(RNA)，但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成分的载体质粒，其同时含有目的基因和报告基因，psPAX2是可以表达慢病毒外壳的质粒，其表达产物可通过粘附机制更易穿过细胞膜。为慢病毒的膜蛋白质粒，通过脂质体进行三质粒共转到靶细胞基因组中，宿主基因组在表达时，随宿主基因转录出的目的基因RNA与psPAX2、基因翻译出的蛋白组装为慢病毒。病毒进入细胞后，其遗传物质RNA逆转录出DNA，该基因再整合到靶细胞的基因组中，完成转染过程。因为质粒DNA只能转录出病毒RNA和表达目的基因却不能表达出病毒的外壳和膜蛋白成分，因此其不能像普通的病毒一样在宿主细胞能反复增殖，故对宿主细胞是无害的并且高效的将目的基因转染到靶细胞基因组中。用途病毒产生，包装病毒。材料与仪器无菌1×PBS，对数期293T细胞，细胞计数器，病毒质粒(以慢病毒为例：psPAX2/)，转染试剂(lipMax或者lipo3000)，Polybrene、病毒浓缩液(生物公司有售)等。步骤(1)293T细胞铺板取对数生长期的293T细胞，用的胰蛋白酶消化293T细胞，计数。若是10cm大皿，建议按照10-12×106每皿的数量将293T细胞均匀铺入。若是6孔板。小鼠科研技术服务实验科研技术服务不仅提升了科研项目的成功率，也促进了科研人才的培养与发展。

二甲苯Ⅰ、Ⅱ各15min至透明。（2）放入二甲苯和石蜡等量混合液处理15min，再放入石蜡Ⅰ、Ⅱ透蜡各50~60min。透蜡在恒温箱内进行，箱内温度保持在55~60℃左右。4、包埋（1）用镊子夹取蜡模在酒精灯上稍加热，并倒入少许从温箱中取出的纯石蜡。（2）再将镊子在酒精灯上稍加热，夹取材料将切面朝下放入蜡模中，排列整齐，再放上包埋盒，轻轻倒入熔蜡。5、切片、展片、贴片（1）将包埋好的石蜡块固定在切片机上，调整厚度调节器到所需的切片厚度，一般为4~6μm。（2）切下的组织薄片要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。二、HE染色1、脱蜡、复水（1）保持水浴锅温度为60℃，将切片放入干燥的染色缸内，放入水浴锅中，30min至蜡熔化。（2）石蜡切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5min，然后放入100%、95%、90%、80%、70%各级酒精溶液中各3~5min，再放入蒸馏水中3min，以便染料可以进入组织。2、染色、脱水（1）切片放入苏木精中染色约10~30min，用流水冲洗约15min，使切片颜色变蓝。（2）将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色，几秒后见切片变红、颜色较浅即可，后将切片再放入流水中使其恢复蓝色。（3）切片放入50%、70%、80%乙醇中各3~5min。

RNA各种可逆的化学修饰被认为是一种新的表观遗传调控方式。m6A是真核生物mRNA常见的化学修饰，在调控mRNA稳定性，剪切和翻译方面具有重要的作用。作者使用转录组测序发现了METTL3（甲基转移酶3），一种主要的RNAN6-腺苷-甲基转移酶，在人肝细胞（HCC）和多种实体中高表达。在临床上，METTL3的过度表达与肝细胞患者不良预有关。体外实验证明敲除METTL3会抑制HCC细胞增殖，迁移及克隆形成。体内实验证明敲除METTL3会明显抑制HCC体内成瘤和肺转移。另外，使用CRISPR/dCas9-VP64系统，内源性高表达METTL3会促进HCC细胞在体外和体内生长。通过转录组测序、m6A-Seq、MeRIP-PCR，作者确定了SOCS2（细胞因子信号2的抑制因子）作为METTL3介导的m6A修饰的下游靶基因。敲除METTL3表达会消除SOCS2mRNAm6A修饰并增强SOCS2mRNA表达。m6A介导的SOCS2mRNA降解是依赖于m6A“读取器”蛋白YTHDF2。总之，METTL3在HCC大部分高表达中,并通过m6A-YTHDF2依赖机制抑制SOCS2表达从而促进HCC进展。因此，作者发现了在肝发生过程中表观遗传改变的一种新机制。图4RNA甲基化转移酶METLLT3在肝组织中高表达。以客户需求为导向，提供个性化的科研技术服务，助力科研项目的顺利实施。

在人类疾病研究中数据表明，常用实验动物模型按产生原因分为以下5类：自发性动物模型、诱发型动物模型、遗传工程动物模型、生物医学动物模型和阴性动物模型。下面上海研录带大家一起看看吧：1、自发性动物模型：是指动物未经任何有意识的人工处理，在自然条件下或基因突变条件下所产生的疾病模型。主要包括突变型的遗传病模型和近郊系的疾病模型。2、诱发型动物模型：亦称实验性动物模型。是使用物理、化学或生物致病因素诱导动物产生某些类似人类疾病表现而制备的动物模型。此模型具有制备方法简单，实验条件容易控制，重复性好等特点，广泛应用于药物筛选、毒理、传染病、病理机制的研究。3、遗传工程动物模型：是利用遗传工程技术对动物基因组进行修饰，用于研究基因功能或疾病机制的动物模型。也称基因修饰动物模型，是指利用胚胎工程和基因工程等生物技术有目的的干预动物的遗传组成，导致动物出现新的性状，并使其能够有效地遗传下去，形成新的可供生命科学研究的和其他目的所用的动物模型。4、生物医学动物模型：也是指利用健康生物的特定生物学特征，研究人类疾病相似表现得模型。这类动物模型与人类疾病存在一定的差异，研究者应加以比较，从中获得有关材料。维持细胞内外环境的稳定。细胞质是细胞内的液体，其中包含了各种细胞器和细胞骨架等结构。海南科研技术服务实验

总的来说，动物疾病模型是一种重要的研究工具，可以帮助科学家们更好地了解疾病的发生机制和开发新方法.江苏疾病模型科研技术服务分离

转录组和m6A分析显示精子发生相关基因的表达和选择性剪接发生了改变[19]。YTHDC2可促进靶基因的翻译效率，并降低其mRNA的丰度，在精子发生过程中起关键作用。当减数分裂开始时YTHDC2表达上调，YTHDC2敲除小鼠的生殖细胞没有经过偶线期的发育导致小鼠不育[20]。在DNA损伤反应中，METTL3可促进DNA聚合酶κ（Polκ）与核酸剪切修复途径快速定位到UV引起的DNA损伤位点，当缺失METTL3时，细胞无法迅速修复UV照射引起的突变，并且对UV照射更加敏感[25]。在淋巴细胞性小鼠过继转移模型中，Mettl3缺陷通过影响mRNAm6A修饰，降低SOCS家族mRNA衰减，增加mRNA和蛋白表达水平，从而抑制IL-7介导的STAT5活性和T细胞内稳态增殖和分化，进而抑制肠炎的发生[21]。在肝中，METTL14通过调控pri-miRNA的m6A修饰，影响MiR-126的生成加工，从而抑制肝的转移[22]。在乳腺细胞中，低氧刺激能促进依赖低氧诱导因子HIF的ALKBH5的表达，而ALKBH5过表达降低了NANOGmRNA的m6A修饰，从而稳定mRNA提高NANOG的表达水平，终增加乳腺干细胞所占的比例[23]。此外，低氧诱导乳腺细胞中依赖ZNF217的NANOG和KLF4的mRNAm6A甲基化抑制，且ALKBH5敲除降低免疫缺陷小鼠乳腺的肺转移[24]。在肺中。江苏疾病模型科研技术服务分离