甘肃M-SAN中盐核酸酶

M-SAN HQ中盐核酸酶在生理盐条件下的优势，让其成为生物生产工艺中去除核酸污染的更好选择。经过多年的市场宣传，M-SAN HQ中盐核酸酶品质已得到多个全球TOP CDMOs认可，纳入其工艺开发筛选平台。此外，目前全球有10+临床项目涉及的病毒载体生产用到M-SAN HQ中盐核酸酶。对于同一个项目，用M-SAN HQ替代Benzonase全能核酸酶，酶量减少、HCD去除效果更优、病毒载体产量也有一定程度的提高，酶相关成本降为原有的1/5以内，极大降低了病毒载体生产成本。M-SAN HQ中盐核酸酶在细胞培养盐浓度下具有较高活性，缩短酶切时间、得到更短DNA片段；甘肃M-SAN中盐核酸酶

Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒，MV)为例，评估了四种不同核酸酶（BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中盐核酸酶及SAN HQ高盐核酸酶）对于染色质DNA去除的效果。Vero细胞通过微载体贴壁培养来生产麻疹病毒MV，72hr后收获上清液，使用3µm cellulose filter(Sartorius)过滤后分装多份，置于-80℃保存便于后续使用。在解冻后的上清中调节对应盐浓度，并加入50 U/ml核酸酶，37℃孵育2hr进行消化，消化后留样；将消化后上清液过Capto Core 700 (Cytiva)柱子，收集流穿液，之后洗杂、洗脱，并分别留样。通过SDS-PAGE分析发现，相比Benzonase等传统核酸酶，在生理盐条件下M-SAN HQ中盐核酸酶更高效将染色质DNA剪切成更小片段，甚至将核小体DNA剪切更彻底。甘肃培养基条件中盐核酸酶70950-150M-SAN HQ中盐核酸酶不需调整培养基任何组分，使用简单方便；

此外，文章作者对每个步骤的样品进行纳米颗粒分析（NTA），结果发现：澄清环节后，M-SAN HQ中盐核酸酶和Benzonase处理组才出现比较明确的LV病毒颗粒峰；TFF处理后，回流液样品的LV病毒颗粒峰更加尖锐，表明病毒颗粒分散度更好、稳定性更高。回流液的NTA结果进一步表明，M-SAN HQ中盐核酸酶处理组只有一个病毒颗粒峰，而Benzonase处理组的回流液中有三个峰。作者推测Benzonase处理组的病毒颗粒还有严重的病毒团聚现象，而呈现多峰现象。

在传统生物技术行业（如抗体、疫苗领域）使用的下游纯化工艺步骤，已经用于慢病毒的大规模下游处理。主要是基于膜(过滤/澄清，利用切向流过滤TFF进行浓缩/渗滤，基于膜的色谱)和色谱(离子交换色谱IEC，亲和色谱AC，体积排阻色谱SEC)的技术。这些不同的过程步骤的组合是可变的，在某些情况下，不同的纯化方法可以用于相同的目的。此外，采用benzonase/M-SAN HQ中盐核酸酶降解污染的DNA或者用于下游的一个步骤，或者用于病毒生产阶段。中盐核酸酶具有纯度高（≥99%）、 内毒水平低（<0.25EU/1kU）的特点；

逆转录病毒载体可以将7.5Kb左右外源基因整合入靶细胞基因组，并稳定持久地表达，已经在批准的CAR-T产品和许多临床产品中得到应用。Shou个成功的基因药物临床试验是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV，gamma逆转录病毒)作为基因转移载体医治儿童的X性染色体连锁严重联合免疫缺陷（SCID-X1）。目前上市的6个细胞药物产品全部采用逆转录病毒（3个为gamma逆转录病毒载体，3个慢病毒载体）作为基因转移载体。逆转录病毒载体目前常用的主要有两个：gamma逆转录病毒载体(Retroviral vector,RV)和慢病毒载体(Lentivirus vector,LV)。两种病毒均属于逆转录病毒科，在自身携带的逆转录酶催化下将其正链RNA均逆转录为cDNA。病毒颗粒比较大，约为100nm（70-100nm，有的至200nm）,外层为表面突起的脂蛋白套膜，套膜内为20面体的衣壳（capsid）,核衣壳内由一螺旋结构的核酸。在biopharma生产，如细胞基因medicine及vaccine生产中，宿主细胞DNA残留是关键质量参数之一。重庆ArcticZymes中盐核酸酶70950-160

中盐核酸酶能够将单链及双链的DNA及RNA，消化成5个碱基为主的寡核苷酸oligos。甘肃M-SAN中盐核酸酶

市售的M-SAN HQ中盐核酸酶有三个规格，分别是25kU、500kU及5MU，分别满足研发初期及大规模生产各阶段的要求。通过SDS-PAGE检测蛋白纯度在99%以上。基于ArcticZymes Technologies的30年的酶学开发及大规模生产经验，M-SAN HQ的生产体系稳定，产品纯度高，批次一致性好，无蛋白酶活性。厂家开发出特异的缓冲液体系，使M-SAN HQ保存起来更加稳定，-15℃ - -30℃条件下保存4年没有活性下降。研究数据表明，经过5-6次的反复冻融，M-SAN HQ中盐核酸酶活性没有明显变化。甘肃M-SAN中盐核酸酶