食品微生物检测关注了解更多检测内容分光光度计是实验室常用设备之一,在食品、制药、环境、生命科学等领域都有***的应用。所以实验室的小伙伴熟悉并掌握其如何使用时非常必要,而且简单的故障维修和维护也要有所了解。***小编把分光光度计使用中的那些事进行了总结,希望能对你有所帮助。分光光度计是用不连续的波长采样反射物体或透射物体的一种测量仪器。由于不同物体分子的结构不同,对不同波长光线的吸收能力也不同,因此,每种物体都具有特定的吸收光谱。能从含有各种波长的混合光中,将每一种单色光分离出来,并测量其强度的仪器叫做分光光度计。分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。分光光度法则要求近于真正单色光,其光谱带宽比较大不超过3-5nm,在紫外区可到1nm以下,来自棱镜或光栅,具有较高的精度。分光光度计?就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。分光光度计可分为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。项目对分析结果的影响1、波长准确度分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。分光光度计的工作原理是基于物质对光的选择性吸收。中国台湾元析分光光度计教程
可见分光光度计【原理】可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计,基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。其定量分析根据相对测量原理工作,即选定样品的溶剂(或空气)作为标准试样,设定其透射比为100%,被测样品的透射比则相对于标准试样(或空气)而得到,在一定的浓度范围,各参量遵循朗伯—比耳定律:A:吸光度T:相对于标准试样的透射比I:光透过被测样品后照射到光电传感器上的强度I0:光透过标准试样后照射到光电传感器上的强度K:样品溶液的比消光系数L:样品溶液在光路中的长度C:样品浓度【仪器结构】【使用方法】(1)开机预热仪器接通电源,微机进行系统自检,LCD显示窗口显示相应的产品型号后,仪器进入工作状态。默认的工作模式是T。注意:为使内部达到热平衡,开机预热时间不小于30分钟。(2)改变波长通过旋转波长手轮改变波长,并在波长观察窗的刻度选择所需的波长。(3)放置参比与待测样品选择测试用的比色皿,把盛放参比和待测液的样品放入样品架内,通过样品架拉杆来选择样品的位置。当拉杆到位时有定位感,到位时轻轻推拉一下以保证定位的正确。(4)调0%T、调100%T/0A为保证仪器进入正确的测试状态。浙江可见分光分光光度计操作分光光度计应按照国家计量检定规程规定,定期进行校正检定。
分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。
由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。2、透射比(吸光度)准确度很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。3、杂散光杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成的。杂散光是分析样品的非吸收光,随着样品浓度的增加,杂散光的影响也随之增大,将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器的灵敏度均明显减弱,杂散光的影响更不能忽视。因此,杂散光的大小也是仪器性能的一项重要指标。使用与维护1、若大幅度改变测试波长,需稍等片刻,等灯热平衡后,重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。2、指针式仪器在未接通电源时,电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况,需进行机械调零。3、比色皿使用完毕后,请立即用蒸馏水冲洗干净,并用干净柔软的纱布将水迹擦去,以防止表面光洁度被破坏,影响比色皿的透光率。4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯。更换分光光度计的光源灯时,请勿用手直接触摸灯泡,以免油粘着。
在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量不同其中铁含量为,其余溶液构成标准系列溶液。并用移液管吸取,并编号为7。将溶液放置15min左右;3、接通722N分光光度计电源,调节分光光度计的透光度T示数为(即T%=100%)发现此时吸光度A的示数位,波长调节至510nm条件下;4、拿出比色皿,一次只能测四种溶液,先用1、2、3、4号容量瓶中的溶液分别润洗(不能搞混了),并依次倒入编号溶液(不能倒太满,否则容易溢出),用面巾纸擦干比色皿表面尤其是光滑的一面。将擦干装有对应溶液的比色皿依次放入分光光度计的光路中使测定的顺序为1、2、3、4(要盖上仪器的盖子)。记录对应的吸光度;5、将4上述测完的比色皿拿出,将溶液倒入废液缸中,先用蒸馏水洗净4只比色皿。在按4步骤中的方法进行操作,此时的溶液编号为5、6、7。记录对应的吸光度;6、将记录的数据在电脑上用ORANGE软件进行处理。并绘出相应的图,并根据原理求出原始待测溶液中铁的含量;7、实验完毕断开分光光度计电源,清洗玻璃仪器和比色皿,整理实验台离开实验室。实验数据处理结果记录及讨论标准系列的实验数据及测定结果铁标准溶液/mL铁含量。超微量分光光度计不需要比色皿!火焰分光分光光度计推荐
选购分光光度计时需要能够考虑到波长的可检测范围。中国台湾元析分光光度计教程
它是一种结果准确、灵敏度高、结构简单、体积小、操作简便,能够测定易形成氢化物的元素、易形成气态组分和易还原成原子蒸气的元素的测量仪器。本仪器具有的气动流路系统、双光束光学系统、卷流式气液分离器、高效电子除水装置、免调元素灯组件和科学的整体结构设计。适用于Pb、Bi、Te、Sn、Sb、Hg、Cd、Zn、Ge等十一种元素的日常痕量分析,可普遍应生、环境监测、化妆品检验、医药卫生、农业环保、城市给排水检验、地质冶金、教学研究等等领域。中国台湾元析分光光度计教程
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