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南通VIC荧光定量PCR仪微量检测

来源: 发布时间:2025年09月11日

VIC与 FAM 类似,是一种荧光报告基团,可标记在引物或探针上用于荧光定量 PCR。它在 PCR 过程中,随着引物或探针与目标 DNA 的结合以及 PCR 产物的扩增,会发出特定波长的荧光,其荧光信号强度与 PCR 产物的量成正比,通过检测荧光信号的变化来实现对目标 DNA 的定量分析。特点:激发波长和发射波长与 FAM 有所不同,激发波长约为 538nm,发射波长约为 554nm,荧光颜色为黄绿色。VIC 常用于多重荧光定量 PCR 中,可与 FAM 等其他荧光染料同时使用,实现对多个不同目标基因的同时检测,因为其光谱特性与其他染料有较好的区分度,能避免荧光信号之间的相互干扰。拥有高灵敏度的光学检测系统,能够精确检测 TET 等荧光染料发出的微弱荧光信号,保证检测结果的准确性。南通VIC荧光定量PCR仪微量检测

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荧光定量 PCR 仪的检测结果会受到多种因素的影响,包括仪器设备、试剂质量、样本处理以及实验操作等方面,以下是具体介绍:样本处理因素样本采集:样本采集的部位、时间和方法不当都可能影响检测结果。例如,采集的样本量不足、未采集到病变部位的细胞,或者样本被污染,都可能导致检测到的目标核酸含量不准确,出现假阴性或假阳性结果。核酸提取:核酸提取的质量和效率直接关系到后续检测。提取过程中若核酸被降解,会使模板量减少,导致定量结果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白质、多糖等杂质,也会抑制 PCR 反应,影响扩增效果和检测结果的准确性。镇江FAM荧光定量PCR仪直销价在药物研发过程中,可用于评估药物对基因表达的影响。

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多重荧光定量 PCR:在同一反应体系中同时检测多个目标基因时,VIC 荧光染料可与其他不同发射波长的荧光染料(如 FAM、ROX 等)组合使用。由于 VIC 的光谱特性与其他染料有较好的区分度,能避免荧光信号之间的相互干扰,从而实现对多个不同目标基因的同时定量分析。例如,在疾病诊断中,可同时检测多个与疾病相关的基因标志物,提高诊断的准确性和全面性。SNP 基因分型:在单核苷酸多态性(SNP)检测中,通过设计特定的引物和探针,利用 VIC 荧光染料标记不同等位基因的探针。在 PCR 反应过程中,根据不同等位基因与探针的特异性结合,产生不同的荧光信号,从而实现对 SNP 位点的分型。这种方法具有较高的准确性和灵敏度,可用于疾病关联研究、药物遗传学研究以及个体遗传特征分析等领域。

SYBR Green I是一种双链 DNA 结合染料,它能非特异性地嵌入双链 DNA 的小沟中。在游离状态下,SYBR Green I 发出微弱的荧光,但当它与双链 DNA 结合后,荧光信号会明显增强。在荧光定量 PCR 反应中,随着 PCR 产物的不断合成,SYBR Green I 与双链 DNA 结合,荧光信号强度不断增加,通过检测荧光强度的变化来反映 PCR 产物的量,从而实现对起始模板的定量分析。特点:能与所有双链 DNA 结合,不依赖于特定的序列,因此可用于各种 DNA 模板的定量分析,通用性强。其激发波长约为 497nm,发射波长约为 520nm,荧光颜色为绿色。但由于它非特异性结合双链 DNA,可能会对引物二聚体等非特异性产物也产生荧光信号,需要通过熔解曲线分析等方法来区分特异性产物和非特异性产物。使荧光信号能够更准确地反映目标核酸的真实拷贝数,提高检测的灵敏度和准确性。

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实时荧光定量 PCR 仪在多个领域都有广泛的应用,以下是一些主要的应用领域:作物遗传育种:在作物遗传改良中,可用于筛选优良基因、鉴定杂种优势以及检测转基因作物中外源基因的整合和表达情况。例如,通过检测与作物抗逆性、产量等相关基因的表达水平,筛选出具有优良性状的品种,加快育种进程。植物病害检测:快速检测植物病原体,如病毒、、细菌等,及时发现植物病害,采取相应的防治措施,保障农作物的产量和质量。例如,检测果树中的病毒情况,为果树的病虫害防治提供依据。而荧光探测器则能够准确地捕捉到这些微弱的荧光信号,并将其转化为电信号或数字信号进行分析。南通Cy5荧光定量PCR仪价格

TET 荧光染料本身具有良好的荧光特性,其与核酸结合后能够产生较强的荧光信号。南通VIC荧光定量PCR仪微量检测

荧光信号强度异常信号值不稳定:在相同的实验条件下,对同一标准样品进行多次检测,若荧光信号强度波动较大,如原本稳定的信号值出现明显的忽高忽低,且排除了样品制备、反应体系等其他因素的影响,可能是光路系统出现问题,需要校准。信号值偏低或偏高:与以往正常实验结果相比,荧光信号强度明显偏低或偏高。例如,正常情况下某种样品在特定循环数下的荧光值应该在一定范围内,但现在检测到的数值远低于或远高于该范围,且排除了试剂、仪器参数设置等因素,可能是光路系统的荧光激发或检测效率发生变化,需要对光路系统进行检查和校准。南通VIC荧光定量PCR仪微量检测