以下是一些判断荧光定量 PCR 仪光路系统是否需要校准的方法:熔解曲线异常峰形改变:熔解曲线的峰形变得不规则、宽化或出现多个峰,而样品和实验条件均无变化时,可能是光路系统对荧光信号的检测精度下降,导致熔解曲线的分析结果不准确,此时需要考虑对光路系统进行校准。Tm 值偏移:熔解曲线的 Tm 值(解链温度)与预期值相比出现明显偏移,且排除了引物设计、反应条件等因素的影响,可能是光路系统的荧光检测存在误差,影响了对 DNA 双链解链过程的准确监测,需要对光路进行检查和校准。激发光源能够稳定且有效地激发 TET 荧光染料,使其发出足够强的荧光信号。江苏SYBR-Green荧光定量PCR仪哪个好

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实时荧光定量 PCR 仪在多个领域都有广泛的应用,以下是一些主要的应用领域:作物遗传育种:在作物遗传改良中,可用于筛选优良基因、鉴定杂种优势以及检测转基因作物中外源基因的整合和表达情况。例如,通过检测与作物抗逆性、产量等相关基因的表达水平,筛选出具有优良性状的品种,加快育种进程。植物病害检测:快速检测植物病原体,如病毒、、细菌等,及时发现植物病害,采取相应的防治措施,保障农作物的产量和质量。例如,检测果树中的病毒情况,为果树的病虫害防治提供依据。
荧光定量 PCR 仪的检测结果会受到多种因素的影响,包括仪器设备、试剂质量、样本处理以及实验操作等方面,以下是具体介绍:样本处理因素样本采集:样本采集的部位、时间和方法不当都可能影响检测结果。例如,采集的样本量不足、未采集到病变部位的细胞,或者样本被污染,都可能导致检测到的目标核酸含量不准确,出现假阴性或假阳性结果。核酸提取:核酸提取的质量和效率直接关系到后续检测。提取过程中若核酸被降解,会使模板量减少,导致定量结果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白质、多糖等杂质,也会抑制 PCR 反应,影响扩增效果和检测结果的准确性。使荧光信号能够更准确地反映目标核酸的真实拷贝数,提高检测的灵敏度和准确性。

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荧光检测灵敏度:灵敏度高的仪器能够检测到低拷贝数的核酸模板,对于微量样本的检测至关重要。例如,一些仪器的荧光检测下限可达到几个拷贝数,适合于检测罕见病原体或低表达基因。准确性和重复性:仪器的热循环精度和荧光信号检测的准确性直接影响实验结果的可靠性。的仪器热循环误差应控制在较小范围内,荧光信号检测的变异系数(CV)较低,确保每次实验结果的一致性。动态范围:宽动态范围的仪器能够准确检测不同浓度梯度的样本,从低拷贝数到高拷贝数都能得到准确的定量结果,避免因样本浓度过高或过低而出现检测误差。江苏SYBR-Green荧光定量PCR仪哪个好