近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求,以及起始样品的规模、数量,可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒,对操作人员也没有特别的经验要求,超滤法后来居上,成为实验室中制备外泌体的通用方法。上海超滤浓缩管销售公司。浦东新区默克0.5ml超滤浓缩管报价基于 Millipore® 先进的膜过滤技术,默克密理博开发了独特的腺***及慢***纯...
基于 Millipore® 先进的膜过滤技术,默克密理博开发了独特的腺***及慢***纯化与浓缩试剂盒。试剂盒中已经包括了必需的 Steriflip® 过滤装置和超滤管,能在短短 2 小时内安全、快捷地获得高产***。 节约时间:整个操作需 2 小时。 产量高:***回收率超过 70%。 整体体验极好:流程简便而***质量高。 设计新颖易操作:Steriflip® 过滤装置可以替代昂贵的设备,使原本繁琐凌乱的操作变得简单而标准。 安全:封闭的真空抽滤设计,完全避免样品飞溅造 成的***污染和损失。超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢?无锡超滤浓缩管哪家好特点与优点: 高产:没有样...
Amicon® Ultra 4 mL 超滤管 -离心速度快而保持很高的回收率 4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon® Ultra 4mL 超滤管中浓缩(3kDa 细胞色素 C, 10kDa 细胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG), 测定在离心一定时间后的回收率。数据显 示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均 >95%。 为了方便初次使用者选择**合适的超 滤管产品,默克密理博生命科学部网 站上提供选择指引,您需要按照提 示进行选择,**终会选出一款产品。 为每次实验选择**合适的, 您也能快速成为超滤高手!您知道益启生物公司的超滤浓缩管系...
离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。 化学相容性与溶出 样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截...
超滤(UF)常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响,这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa(MW)的分子,盐和水等小分子会透过,因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径,则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径,膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和,没有发生容易导致生物大分子失活的相变,而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的...
虽然影响因素较多,我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜,这样可以比较大化样品的回收,同时节省过滤时间。截留微滤中膜的孔径大小通常以微米计,表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据NMWL分级,有时也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见,实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时 膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时,孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构...
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过 程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。超滤浓缩管代理销售哪...
7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。 7. 加入2...
Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。 如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少? 按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。 Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。 Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。 不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用...
膜的吸附损失 对于浓度很低及珍贵的样品,除了考虑截留效率和操作方便外,额外 要关注的是采用的超滤膜及设备对目标蛋白的潜在非特异性吸附损 失。不同膜材质对生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel® 再 生纤维素膜在各类膜中对生物分子吸附**小,是 Amicon® Ultra 超滤管 等超滤产品成为优先的**技术关键之一。滤膜和装置表面对溶质的 吸附对样品收率会产生直接影响,所以如果希望尽可能提高得率,就 应该考虑采用较小的设备和膜面积。小量的、较为稀释的样品应该选 用膜面积小的装置,同时保证一定的流速。默克密理博设计了一系列 离心式或搅拌式装置,配合不同的膜面积、不...
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。 有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。 研究者可根据样品的粘稠程度,以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便达到更好的得率和操作体验。 样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管,请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度,可选用包被相应抗体的磁珠进行亲...
外泌小体(Exosome)是一种囊泡结构,直径通常在30-150nm,常见于正常体液和病理样本,培养细胞也可分泌。研究人员已经在血液、唾液、尿液、母乳等中发现外泌小体,其运载的蛋白和核酸涉及其细胞间物资、信息交流,影响和调控着多方面的生理功能,包括**的发生、免疫促进、凋亡调控、血管的生成、炎症的反应及发育和分化等。由于在体液中出现,外泌小体对于临床生物标志物检测来说特别有利,成为体外诊断、biomarker研究的新热点。超滤浓缩管直销公司。超滤浓缩管联系人外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein...
多台同时操作模式 借助Amicon®超滤杯多台操作连接装置可以同时运行多达3个超滤杯。 Amicon® stirred cells 耐溶剂型搅拌式超滤杯 用于对在有机溶剂中的样品进行浓缩和缓冲液置换。有 47mm 和 76mm 两种规格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等会降低碳氟化合物材质 O 形圈的使用寿命。 特点与优点: 采用圆柱形硼硅酸盐玻璃容器和 PTFE 超好化学兼容性超滤膜 可预装膜后进行高压灭菌 直接从上面操作,避免拆卸装置的麻烦 组件少,易于清洁和组装 配套使用 47 或 76 mm 直径预切膜片 应用: 带有有机成分的样品的浓缩、换液上海超滤浓缩管批发...
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计 一经推出即成为生物样品操作的行业头牌产品。不论是蛋白、 核酸、***或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品, Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准 化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻 松。 Amicon® Ultra 超滤管的独特优点: 有效浓缩同时保证比较高的蛋白回收率 合理的死体积设计 •避免样品离干而降低回收率 •便于估计和控制样品浓缩倍数 •重复性好,便于样品数据相互比较一个好的超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您知道吗?松江区Millipore超...
Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。 如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少? 按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。 Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。 Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。 不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用...
Millipore超滤浓缩管设有反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品回收,避免吸头吸取造成的样品丢失或操作错误; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式样品吸附损失小; 合理的死体积设计,避免样品离干而降低回收率; 能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻松。 有效浓缩同时保证高的蛋白回收率 设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作。你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?静安区浓缩管联系方式蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩) * 本操作受Amicon® Ultr...
特点与优点 温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性 所有型号都可以高压灭菌 提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品 浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速 应用: 大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换 渗滤(Diafiltration)模式 非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被 去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接, 使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统...
***的化学兼容性 •膜与管壁采用特别的热封工艺,避免使用胶水 带来的化学溶出对样品的污染 •Ultracel® 超滤膜和聚丙烯管材性能稳定,化学 兼容性好 •pH3-10 适用 特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Amicon® Ultra 离心超滤管: • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 尿液中蛋白质的浓缩 • 游离标记物的去除 • 抗体的快速浓缩 • 血清多肽生物标志物的纯化 • 双向电泳蛋白样品制备 • 样品去垢剂的去除 操作更安心 •设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即 使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作 •性能稳定,数据平...
抗体标记 适合25-200μg样品操作 5次低速离心,总耗时~50分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 加入抗体样品 • 对于比较稀释的样品(< 1 mg/mL) - 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(建议使用50k MWCO)。 - 加上至多1 mL抗体样品, 4,000×g离心15 min。 • 对于浓度较高的的样品(≥ 1 mg/mL) - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(建议使用50k MWCO)中加入至多100μL样品。 - 在Amicon®...
通量(超滤效率)及其影响因素 超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的 通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时 会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参 与影响通量的因素很多,包括: 压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力 (TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯, 这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚 至可能随着压力的增加而降低。超滤浓缩管的优点有很多。浦东新区Millipore超滤浓缩管代理商将装有样品的A...
抗体标记 适合25-200μg样品操作 5次低速离心,总耗时~50分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 加入抗体样品 • 对于比较稀释的样品(< 1 mg/mL) - 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(建议使用50k MWCO)。 - 加上至多1 mL抗体样品, 4,000×g离心15 min。 • 对于浓度较高的的样品(≥ 1 mg/mL) - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(建议使用50k MWCO)中加入至多100μL样品。 - 在Amicon®...
Millipore超滤浓缩管设有反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品回收,避免吸头吸取造成的样品丢失或操作错误; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式样品吸附损失小; 合理的死体积设计,避免样品离干而降低回收率; 能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻松。 有效浓缩同时保证高的蛋白回收率 设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作。超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。常州Millipore超滤浓缩管外泌小体(Exosome)是一种囊泡结构,直径通常在30-150nm,...
基于 Millipore® 先进的膜过滤技术,默克密理博开发了独特的腺***及慢***纯化与浓缩试剂盒。试剂盒中已经包括了必需的 Steriflip® 过滤装置和超滤管,能在短短 2 小时内安全、快捷地获得高产***。 节约时间:整个操作需 2 小时。 产量高:***回收率超过 70%。 整体体验极好:流程简便而***质量高。 设计新颖易操作:Steriflip® 过滤装置可以替代昂贵的设备,使原本繁琐凌乱的操作变得简单而标准。 安全:封闭的真空抽滤设计,完全避免样品飞溅造 成的***污染和损失。购买超滤浓缩管就找益启生物公司。上海默克0.5ml超滤浓缩管参数默克密理博 Amico...
核苷酸截留分子量(NCO) 超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的,适合各种蛋白研究,但在核酸 和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏 过,相对于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以选择 滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。 浓差极化 浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞,产生除了膜本身截留分 子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时,会形成相当于第二层滤膜作 用的胶体层,干扰分子通过滤膜,同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分 也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。超滤浓缩管咨询服务电话多少呢。松江区默克超滤浓缩管咨询报价膜的吸...
蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩) * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 3次低速离心,总耗时~75分钟(含60分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂(沉降的柱床体积)和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。(柱床)树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。 2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*,其间可温和搅动促进结合。上海超滤浓缩管供应商。崇明区超滤浓...
操作模式 常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流 过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常 用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF) 液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表 面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离 的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF 技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩 和分离操作也变得更加方便。超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。常州默克...
用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离...
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过 程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。 温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可 以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。 实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。 pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会 在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。上海超滤浓缩管哪家比...
截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。超滤浓缩管的系列有很多种。超滤浓缩管规格高通量超滤 MultiScreen®超滤膜板 MultiScreen® ...
操作模式 常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流 过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常 用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF) 液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表 面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离 的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF 技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩 和分离操作也变得更加方便。超滤浓缩管的优点有很多。浦东新区默克2m...