RNA提取注意事项:所有实验所用的泵头、离心管等消耗品均要使用RNase-free的;整个过程要在无RNase污染的条件下进行,通常可以在无菌操作台中进行实验,并用75%的酒精进行擦拭杀菌,如有必要也可在实验前喷洒一些商用的RNase压制剂;所有相关溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用无水乙醇与DEPC水配制);溶液的配制使用移液器进行操作,切勿使用量筒等中间器皿;研钵、研棒、镊子、剪刀等用锡箔纸包好后,200℃干热灭菌4h;实验过程中一定要戴手套和口罩;异丙醇、氯仿、乙醇等试剂要使用未开封的,或者开封之后直接分装至小容量离心管的,以避免多次使用的交叉污染...
众所周知,RNA提取是一项困难的工作。常见的挑战包括RNA降解、低产率和/或纯度以及DNA污染。此外,不同的样品类型有自己独特的特性,需要特别注意。例如,微生物(如革兰氏阳性/阴性细菌、菌类、古生菌等)的细胞壁坚硬,不易被化学和酶解。其他样本类型,如粪便和植物含有压制剂(如多酚类、腐殖酸/黄腐酸、单宁酸等),可与RNA共沉淀,并可压制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不稳定的,极易降解。许多样品含有高水平的RNase,会快速降解RNA。为了使之较小化,较好在采集时稳定样本中的RNA。常用的样品稳定方法包括液氮快速冷冻、干冰乙醇浴或-80°C冷冻室。然而,这些方法也有缺点,如核酸的冻融损伤,并...
植物RNA提取试剂产品特点:1.针对植物材料独特配置,操作更简单、流程更优化。2.配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。3.配有CS过滤柱,可有效去除其它杂质。4.RNA纯度更高,无杂质残留,特别适合于对纯度要求很高的下游实验。5.操作安全可靠,无需酚抽提,无需氯化铯梯度离心,无需氯化锂或乙醇沉淀。用途植物RNA提取试剂可从植物Chemicalbook组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎、白松松针或嫩苗和西红柿叶等),提取高纯度的总RNA。操作步骤先将RNaseFree离心管置于干冰中再放入研磨好的冷冻的组织样品。准备新鲜植物组织,在液氮中研磨成粉状,如果是干种子,可在...
如果把一个细胞比作一个城市,那么DNA就像是一个管理人员,它坐在细胞核内,监视着“细胞城”的一举一动,像哪里细胞膜破了需要修补,什么时候需要合成蛋白质,显而易见,光靠我们DNA管理人员一个人自然忙不过来啦,于是我们的DNA管理人员决定给自己找一些“打工仔”,它们就是RNA,但是近年来越来越多的研究发现,这些RNA似乎远远不止一个普通默默无闻的“公务员”那样简单,它们在基因表达中发挥着不亚于DNA的巨大的作用,如2006年诺贝尔奖生理/医学奖就颁发给了RNA干扰的两位发现者。RNA干扰现象的发现为遗传研究提供了一种强大的研究手段,这也说明这些对RNA的研究有着巨大的前景.而作为南大较好科研接班人...
RNA指的是核糖核酸。真核生物体的遗传物质存在于细胞核内,多数的真核生物使用DNA也就是脱氧核糖核酸来作为遗传的中心物质,但是少量的病菌遗传物质可以是RNA。正因为病菌的遗传物质是RNA,所以可以通过检测病菌的RNA是否存在,或者其浓度和含量来判断是否存在相应的病菌传染,传染的程度及病菌是否仍在大量复制。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的缩写。存在于生物细胞以及部分病菌、类病菌中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。专门的高盐缓冲系统允许...
RNA是什么?和DNA有什么区别?RNA(核糖核酸),是存在于生bai物细胞以及部分病菌、类病菌中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。与DNA的区别:组成的区别:1、RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶。2、DNA分子巨大,由核苷酸组成。核苷酸的含氮碱基为A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶及T胸腺嘧啶;戊糖为脱氧核糖。植物RNA提取试剂产品特点:RNA纯度更高,无杂质残留,特别适合于对纯度要求很高的下游实验。RNA提取试剂总RNA提取试剂是广谱型总RN...
植物RNA提取:植物组织中,富含酚类化合物,或富含多糖,或含有某些尚无法确定的次级代谢产物,或RNase的活性较高。这些物质在细胞裂解后与RNA紧密结合形成难溶复合物或者胶状沉淀,很难将其去除。所以我们在提取植物组织时,要选取针对植物的试剂盒,试剂盒里的裂解液能有效解决多酚易氧化、多糖化合物与核酸分离等难题。1、植物的果皮、果肉、种子、叶片等要在研钵中充分研磨,研磨过程中液氮要及时补充,避免样品融化,研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀,避免RNA降解。2、像水稻及小麦叶片等富含纤维的样本,则应适当减少提取用量,否则组织研磨及裂解不彻底,会使提取的RNA产量较低。3、含水分较多的植物组织例如...
植物RNA快速提取试剂盒:是一种单相RNA快速提取试剂盒,可高效裂解坚固的植物细胞并强烈压制RNA酶活性。细胞破碎之后,植物多糖立即被PlantRNAtrip独特的成分结合。离心抽提步骤将RNA与灭活的RNA酶、蛋白、基因组DNA污染分离,并清理植物多糖多酚以及次生代谢产物。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,并清理残余的多糖。提取可在60分钟内完成,所提取的RNA纯度极高,不含DNA和多糖和多酚污染,可用于构建cDNA文库、RT-PCR、Northern转印分析、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译、和RNA酶保护实验。rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的场...
酵母RNA的提取方法:稀碱法是属化学破壁法,其方法是在一定碱浓度下,使构成细胞壁的蛋白质、脂肪及糖的化合物得到水解,从而破坏细胞壁,此法对碱的浓度及提取温度要求比较严格,碱的浓度不可过浓,应控制在1%,并且对提取温度也有一定的要求,提取时间短。因为在过分剧烈的条件下,容易使核糖核酸分子内的酯键断裂,使核糖核酸降解而影响收得率。酵母菌作为重要的模式生物,是遗传学和分子生物学的重要研究材料。由于酵母菌的细胞壁成分复杂,且较原核生物厚,难于破碎,因此酵母菌总RNA的抽提纯化要比原核生物总RNA的抽提纯化困难的多。如何有效地破碎细胞壁并保证RNA的完整性,是获得高质量酵母菌总RNA的关键问题。总RNA...
拭子RNA提取试剂的选择?应有较高的提取得率。对离心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取决于离心柱对核酸的吸附能力、洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。离心柱的硅胶膜RNA吸附性能好、裂解液细胞裂解能力强、洗脱液洗脱能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果离心柱硅胶膜吸附能力不好,裂解液和洗脱液没有经过很好的优化,RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的确定,我们可以使用紫外分光光度法,但是不能作为判断得率的单独标准,较好还是要做个PCR或荧光定量。总RNA提取试剂,适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提,可有效防止RNA在提取过程中的降解。无锡正规RNA提取试剂哪家好RNA提取关键点病菌...
RNA提取试剂的选择:选择合适的提取试剂是较重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时,操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有诸多的成功案例。随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,进一步丰富了TakaraRNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统,无需苯酚氯仿抽提等步骤,简单快捷。组织或细胞裂解后,提取操作光需20分钟便可完成~带口罩、帽子,屏住呼吸、不说话,带乳胶手套并要时常更换。无锡RNA提取试剂...
RNA提取注意事项:所有实验所用的泵头、离心管等消耗品均要使用RNase-free的;整个过程要在无RNase污染的条件下进行,通常可以在无菌操作台中进行实验,并用75%的酒精进行擦拭杀菌,如有必要也可在实验前喷洒一些商用的RNase压制剂;所有相关溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用无水乙醇与DEPC水配制);溶液的配制使用移液器进行操作,切勿使用量筒等中间器皿;研钵、研棒、镊子、剪刀等用锡箔纸包好后,200℃干热灭菌4h;实验过程中一定要戴手套和口罩;异丙醇、氯仿、乙醇等试剂要使用未开封的,或者开封之后直接分装至小容量离心管的,以避免多次使用的交叉污染...
植物花总RNA提取试剂盒:采用进口硅基质膜制作的总RNA吸附柱,配合特殊的提取缓冲液,可以从多糖多酚植物的根、茎、叶以及花组织中快速提取总RNA,40~60分钟内即可完成提取过程,提取的总RNA纯度高,没有DNA和蛋白质污染,适用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot杂交等实验。特殊的提取缓冲液保证特殊植物材料中的总RNA充分溶解。总RNA提取速度快,提取效率高。有效去除植物花组织中的多糖、多酚类等杂质,提取纯度高。细菌总RNA提取试剂盒:本试剂盒可以快速从细菌体内提取总RNA,提取的总RNA纯度高,没有DNA和蛋白质污染,适用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分...
RNA提取关键点病菌RNA在提取后也仍然具有传染性,在提取时,实验人员需要佩戴口罩和手套等各种防护装备,以防实验室污染。而有种「自动灭活」的方法,在更加便利的同时,也能更好的保护实验人员的安全。许多样品中含有高水平的RNase,这种酶也会加速RNA的降解。为了使这种酶对降解的影响较小化,较好在采集时就稳定好样本中的RNA。这种情况下,可以在裂解缓冲液中立即进行溶解。比如可以通过TRIzol®、RNA裂解缓冲液等使RNase失活,然后再处理样本。另外,再采集样本之后马上加入DNA/RNAShield,可以快速降解掉RNase等蛋白物质。当然,DNA/RNAShield也会保证取样时微生物基因多样...
那RNA到底是什么呢?它又和基因有什么关系呢?基因的表达.其实人体内的RNA主要和基因的表达有关系。不知道你思考过这么一个问题没有,基因是我们体内的遗传物质,它如何来表达自己呢?事实上,这个过程是需要用到RNA的。具体来说是这样的,由于染色体是存在于细胞核当中的,而根据上述的内容,我们知道,基因其实是存在于染色体上的。如果一个基因要表达,只有两种办法,一个就是它亲自到细胞核外去完成一切的生命活动,另一个办法就是找个帮手来完成。而我们的基因选择的是第二条路径,也就是找一个帮手,这个帮手就是RNA,更准确地说是信使RNA(mRNA),基因会通过转录,利用碱基互补原则,合成一条信使RNA,这个过程都...
超快速多糖多酚植物RNA提取试剂盒:无DNA污染,可直接反转录,荧光定量,不会出现洗脱液含络合Mg离子成分,压制后续PCR反应的情况。本试剂盒提取的RNA可直接用于对前期RNA提取质量非常高的后续实验,如转录组RNA测序,制作基因芯片,荧光定量PCR,核酸杂交,反转录等所有后续实验。一个样十多分钟搞定!具有多糖多酚植物RNA提取试剂盒已普及到全国各大农业大学,农科院,植物所等相关院校单位,包括中国农业大学,中国农业科学院生物技术所,作物所,蔬菜所,多糖多酚植物RNA提取试剂盒由华越洋自主研发生产,博取众家之长,根据多年来市场反馈不断进行技术升级和改良得来。具有操作步骤少,实验快捷,RNA产量纯...
BIOG血液RNA快速提取试剂盒:BIOG血液RNA快速提取试剂盒是我公司研发团队在综合比较了国外同类较好产品的基础上反复研制优化而成,专门用于血液RNA的快速提取纯化。本试剂盒采用独特的裂解液配方,可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的RNA,操作简便快速,只需15分钟即可完成血液RNA提取。RNA提取得率较高,可在200μL全血中提取5μg左右RNA。BIOG血液RNA快速提取试剂盒采用了较新的较好离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,有效地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,特别适用于血液包括细菌、病菌等传染的分子检测。好的试剂盒价格比较贵,在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的...
拭子RNA提取试剂的选择?应有较高的提取得率。对离心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取决于离心柱对核酸的吸附能力、洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。离心柱的硅胶膜RNA吸附性能好、裂解液细胞裂解能力强、洗脱液洗脱能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果离心柱硅胶膜吸附能力不好,裂解液和洗脱液没有经过很好的优化,RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的确定,我们可以使用紫外分光光度法,但是不能作为判断得率的单独标准,较好还是要做个PCR或荧光定量。rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。杭州正规RNA提取试剂拭子RNA提取试剂的选择?1、产品价格。价格也是选购产品的重要考量因素。...
rRNA是细胞内的一种基本RNA,与r蛋白一起构成蛋白质合成的场所—核糖体。随着rRNA基因序列越来越了解,其在生物研究中也的得到了更普遍的应用,主要表现在生物进化研究和分子流行病研究。(1)rRNA在生物进化上的研究。rRNA具有高度保守性,且普遍存在于各种生物中,rRNA提供了足够的序列信息。现在还可用于在细菌分类、细菌鉴定等方面。(2)rRNA在分子流行病上的研究。目前,人们已经把rRNA在进化上的普遍差异应用到了流行病学研究方面,通过对不同细菌进行鉴定分类,从而明确病因,追踪传染源,进一步控制及预防疾病。较佳方法是保证样品完全裂解,但相同的裂解方案换了一个样本可能就没辙了。宁波RNA提...
RNA提取试剂的选择:首先,要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用压制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便,同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差~植物RNA提取试剂:提取的总RNA纯度极高,没有蛋白和其他杂质的污染。深圳RNA提取试剂厂家批...
拭子RNA提取试剂的选择?操作简便性。操作简便性也是拭子RNA提取试剂选择的一个重要因素。操作过于复杂,不光费时费力,还容易导致样本间的交叉污染,也容易损失样本。特别是用于临床检测或样本量较多情况下的检测,操作复杂如果导致交叉污染会引起误诊,还会影响出检测报告的时间。因而,选用操作简便、流畅的提取试剂盒非常重要。就我们曾经用过的以上三种提取试剂盒来说,Q公司的拭子RNA提取试剂盒提取过程大约25min,从样本处理开始需要10个步骤;T公司拭子RNA提取试剂盒整个提取过程需要1个多小时,从样本开始处理10个步骤;B公司的Biog拭子RNA提取试剂盒提取过程大约20min,从样本开始处理7个步骤,...
RNA的提取:众所周知,Trizol是一种RNA提取试剂,内含异硫氰酸胍和酚等物质,能迅速破碎细胞和溶解细胞中的其他成分,压制细胞释放出核酸酶,维持细胞中RNA的稳定性,我们可以在反应物中加入Trizol后摇匀,在加入氯仿离心,这样的话我们的RNA就进入了水相中,再用异丙醇沉淀水相中的RNA,即可达到提取总RNA的目的了。首先我们需要称取一定量的预处理好的废酵母配10%左右的酵母溶液,在一定温度下,加入一定浓度的氯化钠,之后加入NaOH溶液调节反应的pH,搅拌抽提一定时间后,离心分离上清液,调节pH至等电点,经酒精沉淀获得核糖核酸,用水定容至100mL取1m适当稀释,调pH7.0,这样的话RN...
总RNA提取试剂是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围普遍,可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在总RNA提取试剂中被充分裂解的同时能够较大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Re...
RNA的提取:众所周知,Trizol是一种RNA提取试剂,内含异硫氰酸胍和酚等物质,能迅速破碎细胞和溶解细胞中的其他成分,压制细胞释放出核酸酶,维持细胞中RNA的稳定性,我们可以在反应物中加入Trizol后摇匀,在加入氯仿离心,这样的话我们的RNA就进入了水相中,再用异丙醇沉淀水相中的RNA,即可达到提取总RNA的目的了。首先我们需要称取一定量的预处理好的废酵母配10%左右的酵母溶液,在一定温度下,加入一定浓度的氯化钠,之后加入NaOH溶液调节反应的pH,搅拌抽提一定时间后,离心分离上清液,调节pH至等电点,经酒精沉淀获得核糖核酸,用水定容至100mL取1m适当稀释,调pH7.0,这样的话RN...
那RNA到底是什么呢?它又和基因有什么关系呢?基因的表达.其实人体内的RNA主要和基因的表达有关系。不知道你思考过这么一个问题没有,基因是我们体内的遗传物质,它如何来表达自己呢?事实上,这个过程是需要用到RNA的。具体来说是这样的,由于染色体是存在于细胞核当中的,而根据上述的内容,我们知道,基因其实是存在于染色体上的。如果一个基因要表达,只有两种办法,一个就是它亲自到细胞核外去完成一切的生命活动,另一个办法就是找个帮手来完成。而我们的基因选择的是第二条路径,也就是找一个帮手,这个帮手就是RNA,更准确地说是信使RNA(mRNA),基因会通过转录,利用碱基互补原则,合成一条信使RNA,这个过程都...
RNA提取真正需要注意的要点:你的植物组织样本采样、保存正常吗?组织裂解充分了吗?组织起始量是否过大?起始量过大的话,他们得带进去多少RNase呀,导致裂解液不能充分压制内源性的RNase,失败就在预料之中!你的细胞活性好吗?细胞都到衰亡期了,你提什么RNA呀;细胞加的那么多,破壁不充分,怎么裂解的好呢,他们本身得带进去多少内源性RNase污染呀!转移液体时吸到沉淀了吗?吸水相时碰到中间层了吗?乙醇干燥净了吗?裂解样本的过程是重中之重液氮研磨(手工):要先加液氮预冷一下研钵,然后研磨,研磨过程要保证研钵中一直有少量液氮,研磨完成一个样本后,直接加入裂解液涡旋震荡后放常温,或者直接丢到液氮中,全...
超快速多糖多酚植物RNA提取试剂盒:无DNA污染,可直接反转录,荧光定量,不会出现洗脱液含络合Mg离子成分,压制后续PCR反应的情况。本试剂盒提取的RNA可直接用于对前期RNA提取质量非常高的后续实验,如转录组RNA测序,制作基因芯片,荧光定量PCR,核酸杂交,反转录等所有后续实验。一个样十多分钟搞定!具有多糖多酚植物RNA提取试剂盒已普及到全国各大农业大学,农科院,植物所等相关院校单位,包括中国农业大学,中国农业科学院生物技术所,作物所,蔬菜所,多糖多酚植物RNA提取试剂盒由华越洋自主研发生产,博取众家之长,根据多年来市场反馈不断进行技术升级和改良得来。具有操作步骤少,实验快捷,RNA产量纯...
Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。异硫氰酸胍氯化铯超速离心法:原理:使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效压制RNA酶的活性,经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质,进行密度梯度超速离心,RNA沉淀于管底,而...
RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。在细胞中,RNA种类繁多。根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依据DNA序列转录而成的蛋白质合成模板;tRNA是mRNA上遗传密码的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的场所。细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,像是组成剪接体(spliceosome)的snRNA,负责rRNA成型的snoRNA,以及参与RNAi作用的miRNA与siRNA等,可调节基因表达。拭子RNA提取试剂的选择?拭子样本的量与提取的核酸量成正...
RNA提取关键点病菌RNA在提取后也仍然具有传染性,在提取时,实验人员需要佩戴口罩和手套等各种防护装备,以防实验室污染。而有种「自动灭活」的方法,在更加便利的同时,也能更好的保护实验人员的安全。许多样品中含有高水平的RNase,这种酶也会加速RNA的降解。为了使这种酶对降解的影响较小化,较好在采集时就稳定好样本中的RNA。这种情况下,可以在裂解缓冲液中立即进行溶解。比如可以通过TRIzol®、RNA裂解缓冲液等使RNase失活,然后再处理样本。另外,再采集样本之后马上加入DNA/RNAShield,可以快速降解掉RNase等蛋白物质。当然,DNA/RNAShield也会保证取样时微生物基因多样...