湖南构建实验动物模型

急性肺损伤与ARDS实验动物模型。急性肺损伤（ALI）是临床上较为常见的急危重症，是由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。临床上以急性进行性加重的呼吸困难、呼吸窘迫、难治性低氧血症和非心源性肺水肿为早期表现，ALI严重阶段可发展为急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。目前 ，ALI和ARDS是临床上急危重症医疗的重点、难点。而通过建立ALI和ARDS的动物模型是了解其主要发病机制及探索医疗方法的重要手段，人类研究中产生的假设可以在动物模型中进行测试，同时体外模型得到的实验结果也可以在动物模型中进行评价，也可应用于评估动物与人体疾病之间的联系。大鼠实验动物模型都有哪些？湖南构建实验动物模型

肝纤维化模型实验动物模型

1.诱导方法：1)成年雄性小鼠40%CCL4，皮下注射或灌胃5mL/kg。每三天/次，连续8周。成年雄性大鼠皮下注射60％CCl4（3ml/kg），每周2次，共9周。2)成年雄性大鼠1％二甲基亚硝胺DMN（10mg/kg），1次/d，2次/周，连续4周。3)成年雄性大鼠腹腔注射硫代乙酰胺（100mg/kg）隔日腹腔注射1次，连续13周。4)成年大鼠，灌胃给白酒7g/kg体重，每日晨1次，连续24周。

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英瀚斯生物配备自有IVC动物房，可用于裸鼠、转基因鼠等实验动物模型饲养

IVC大小鼠饲养笼的主要特点：

1、具有真正的可持续的SPF屏障环境，为啮齿类小动物提供SPF环境,防止交*污染，有效保护实验动物；

2、笼架上的进排风口的气流一定在同一水准，偏差小于0.5%。

3、提供统一标准的通风；

4、不同品系的实验动物可以在同一笼架进行饲养，但又可以在同一工作区内管理；

5、为动物提供高标准的低NH3、CO2微环境，提供非常适宜的湿度；

6、减少动物饲养笼的垫料更换、灭菌次数；

7、防止含有有害物质或被污染的气体在动物饲养笼间的传播、扩散；

8、解放人工、节省资源，保障工作人员的健康与安全；

9、设备设计合理，节省占地面积，轻便灵巧，带可方便移动的灵活滚轮。使笼具成为先进的IVC屏障系统，在普通环境、屏障环境、生物检疫设施、生物安全设施、环保监测设施中均可使用。

诱导式关节炎模型根据造模物质的不同进行分类，常见的有佐剂诱导型、胶原诱导型和胶原抗体诱导型关节炎。其中大鼠CIA模型的组织和免疫学改变与人RA**接近，AA模型的病情表现**为明显和持续。

（一）佐剂诱导型（AA）AA，又称为弗氏佐剂关节炎，介导溶剂分为完全佐剂（CFA）和不完全佐剂（IFA）。通常用CFA作介导剂，AA模型在T细胞相关致炎通路的药物筛选上发挥着重要的作用。

（二）胶原诱导型（CIA）CIA模型是由Trentham等于1977年***建立的实验性关节炎动物模型。通过皮下注射Ⅱ型胶原和等量CFA的混合液来建造，来源于鸡、小牛和大鼠的Ⅱ型胶原均能引起关节炎症。CIA是MHC相关型，以T/B淋巴细胞介导的关节炎症侵蚀为主要特征。

（三）胶原抗体诱导型(CAIA)抗Ⅱ型胶原单克隆抗体源自8周大的雄性DBA/1J小鼠CIA模型，这些抗体混合物注射到模型小鼠的关节腔后可直接作用于Ⅱ型胶原或其他在体内高表达的自身抗原，从而发挥免疫介导作用。该模型的临床症状与CIA和RA很相似，突出特点是能在几天之内迅速发病，关节组织中巨噬细胞和多核型白细胞浸润。该模型很好的体现了外源性抗原抗体刺激体诱导的严重关节损伤。 常规实验动物模型制作。

裸鼠瘤模型是比较常见和常用的一种瘤动物模型，它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。

造模方法：

1、细胞是贴壁细胞，细胞培养在RPMI-1640培养基中细胞传代培养：当细胞长至80-90%时，去除培养基，加入PBS洗1-2次，去除PBS后，加入1ml胰酶消化1-3min后，加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化，将消化的细胞转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min。倒掉上清后，加入3ml培养基重悬细胞，1:3传代至培养皿中培养。

2、将长到培养皿80%-90%的细胞用胰酶消化下来，1000rpm离心，去除上清，加入完全培养基重悬细胞，将细胞分别种在6孔板中，每孔种1×105个细胞。

3、将细胞进行扩增培养，对细胞进行计数，将数量调整为2×107个细胞/ml。5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后，随机分为3组，每组分别在右腋皮下接种2×106（100ul/只）细胞。接种约两周后出现结节，每周瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养4周后处死裸鼠，取裸鼠瘤拍照冻存。 英瀚斯生物，真实做实验动物模型，可实地参观考察。广东实验动物模型外包公司

实验动物模型制作周期多久？湖南构建实验动物模型

一型糖尿病实验动物模型构建：

胰腺中的胰岛β细胞变性和坏死，分泌的胰岛素不足。

诱导方法一：STZ诱导糖尿病模型。注射前用0.05mol/L柠檬酸(pH4.5)配成2％的STZ溶液，新鲜使用。大鼠糖尿病STZ的剂量为40～75mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。小鼠对此药敏感性较差，常用量为100～200mg/kg(静脉注射或腹腔注射)。

诱导方法二：四氧嘧啶糖尿病动物模型四氧嘧啶糖一次腹腔注射150～200mg/kg或静脉注射40～100mg/kg。用药后2～3小时后出现初期高糖，持续6～12小时后进入低血糖期，动物出现痉挛，24小时后一般为持续性高糖期，β细胞呈现不可逆性坏死，发生糖尿病。

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