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病理实验外包，病理染色常见染色介绍VonKossa染色：简介：钙结节的形成为成骨细胞特有，Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法，利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐，在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程：石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片（中性树胶）→Vonkossa染**（钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，细胞核呈蓝色，背景呈红色；或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，背景呈红色）。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积，由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于血管钙化的检测病理实验外包检测平台 - LCMS检测_病理实验外包检测_南京英瀚斯。宁夏专门做病理实验外包实验室

病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（抗体的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且保证整个过程中不会使组织干涸）。3.  将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.  滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7.  回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8.  做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。宁夏专门做病理实验外包实验室病理实验外包检测(小鼠***成像/药代动力学/动物造模)技术服务。

病理实验外包，病理染色骨组织的处理方式：组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶，经过固定后，需要先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。如果脱钙不全，则切片容易撕开或碎裂，损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程，称为脱钙。骨组织固定24小时后，锯下不超过0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间，但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脱钙将组织置于脱钙剂中，每日更换新鲜液，直至组织软化为止除酸流水冲洗24小时脱水、浸蜡、切片进行常规脱水、透明、浸蜡、切片南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。

1.取材与固定固定剂同时具有硬化细胞组织的作用，使制片便于进行。2.洗涤与脱水洗涤是把深入组织中的固定剂洗去，防止染色中的结晶产生，驱除组织中的水分，利于透明和浸蜡。3.透明与浸蜡(透蜡)脱水后的组织中水分已被透明剂所代替，而有利于浸蜡。浸蜡的目的是使组织有一定的硬度而有利于切片和细胞组织保持一定的生活时状态。4.包埋与切片用石蜡和其他包埋剂(组织填充剂作包埋剂)包绕一定的形状以便于切片。将包埋好的组织块用切片机切成一定的厚度(厚度以um计)。5.贴片(展片、捞片)和染色将已且妥的切片在温水中展平整后用载玻片贴上，稍晾干后再烤片。染色可使细胞和组织被染上不同的颜色而产生一定的折射率，便于显微镜观察。6.切片染色后用胶类物质将其封固，便于长期保存。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。南京实验医学平台一站式病理实验外包检测平台。

病理实验外包，病理染色常见染色介绍甲苯胺蓝染色：甲苯胺蓝（Toloniumchloride），是一种化合物，分子式为C28H20N2O10S2·2Na，分子量为656.62，甲苯胺蓝深绿色粉末，具古铜色光泽，易溶于水，呈蓝紫色溶液。微溶于醇呈蓝色，极微溶于氯仿，几乎不溶于醚。商品大部分为氯化锌复盐。主要用于氧化还原指示剂。用于眼科检查角膜缺陷和损伤部分，组织化学中用于测定脱氧核糖核酸和诊断白喉。甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种，属于醌亚胺染料类，这类染料一般含有两个发色团，一个是胺基，一个是醌型苯环，来构成色原显色。染料除有发色团外，还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，为碱性染料，甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。软骨基质对甲苯胺蓝的异染性，是因为软骨基质的主要成分是软骨黏蛋白、多糖物质，而酸性硫酸根与嗜碱性染料有亲和力。病理实验外包所需样本如何保存。宁夏专门做病理实验外包实验室

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病理实验外包，病理染色切片常见问题及解决方法：1.切片粘在切片刀不易取下●原因：切片时有静电作用，产生静电吸引，在冬季或气候干燥时常出现这种情况。●解决方法：可用加湿器。以增加空气中的水分，而减少静电作用。2.切片厚薄不均●原因：①切片微动部分失灵，齿轮跳格。②蜡块太大，过硬，转动时刀刃受震动。●解决方法：①修理切片机失灵的部分，调整螺旋。加机油润滑零件，必要时需请专业技术人员调整切片机。②如蜡块过大，以后取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬，可返回水中浸泡，再重新脱水和包埋。宁夏专门做病理实验外包实验室

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